海洋低温BS070623菌株选育及其发酵培养基优化（Ⅰ）

以大连渤海湾分离260余株低温条件下生长良好的菌株为出发菌株,利用双层平板筛选方法选出2株低温蛋白酶产生菌(Bacillus subtilis).经UV、DES、NTG、EMS、LiCl单独及复合诱变,选育出一株(BS070623)蛋白酶高产突变株.通过单因素实验,确定了BS070623菌株蛋白酶发酵培养基为:玉米淀粉糖0.8%,豆饼粉1.4%,磷酸氢二钾1.0%,磷酸二氢钾0.7%.上述条件下该突变株低温蛋白酶产量为913.2 U/mg.     

产纤维素酶粗糙脉孢菌1602产酶条件优化

通过优化设计，确定纤维素高产菌株Neurospora crassa 1602摇瓶发酵最佳产酶条件为：培养液初始pH值为5、5，培养温度为28℃，摇瓶转速为150rpm，培养96h；3％玉米芯粉、0．5％麸皮酸水解液(0．6mol/L)能够促进产酶，最适宜的有机氮源为黄豆粉；最适宜的无机氮源为NH4HSO4．在最适发酵条件下，其纤维酶的活力CMCase为10．34IU／ml．FPase为0．71IU／ml．     

高温芽孢杆菌碱性蛋白酶发酵条件及酶性质研究

从西藏尼木卡如林温泉附近土样中分离到一个碱性蛋白酶产生菌株SD-142．该菌株经初步鉴定为芽孢杆菌．在50℃条件下，以10％的接种量接种于发酵培养基中振荡培养48h后，发酵液中碱性蛋白酶活可达516U／mL．发酵培养基的组成成分为麦芽糖6％、豆饼粉3％、麸皮3％、Na2HPO4 0．4％、MgSO4 0．02％、CaCl2 0．02％，pH自然．对该酶的性质研究表明，其最适作用pH为9．5，最适反应温度为60℃，具有良好的pH稳定性和热稳定性，并且显示了与去污剂良好的相容性．     

生物聚合物Ss合成菌的分类鉴定及发酵条件的初步研究

菌株TP-3能合成一种具有增稠性和假塑性的新型生物聚合物Ss,通过形态观察、生理生化实验和16S rDNA同源性序列分析,初步鉴定该菌为鞘氨醇单胞菌（Sphingomonas sp．）的一个新种．发酵条件优化结果表明,生物聚合物Ss合成的最适培养基为葡萄糖40g／L,豆饼粉2．5g／L,NaCl 0．5g／L,MgSO4 0．3g／L,MnCl2 0．004g／L,FeSO4 0．005g／L,CaCO3 1．0g／L,最适培养温度为30℃,最适初始pH为7．5,最适培养周期为60h．     

假丝酵母Candida sp.木糖发酵生产乙醇

研究了供氧水平、培养基初始pH值、木糖质量浓度等条件对假丝酵母1779A木糖发酵生产乙醇的影响．结果表明：在温度（30℃）、转速（150r／min）恒定的条件下,假丝酵母木糖发酵生产乙醇适宜在半好氧务件下进行,乙醇产生的最适初始pH值为5．0,最适木糖质量浓度为60g／L,最大乙醇转化率为62．1％．假丝酵母木糖发酵生产乙醇存在葡萄糖效应,以葡萄糖与木糖的质量比3：1混合发酵生产乙醇时的产量比单独木糖发酵生产时的高57．6％．     

暗纹东方Tun蛋白酶活性的研究

pH是影响蛋白酶活性的显著因素之一。本文仅初步探讨了pH对一龄、二龄两种规格暗纹东方Tun的胃、肠、肝胰脏蛋白酶活性的影响。结果表明,一、二龄鱼的胃蛋白酶最适pH均在2．2,肠蛋白酶最适pH为8．5,而一龄鱼肝胰脏蛋白酶最适pH在9．0以上,二龄鱼的最适pH为8．5。另外,蛋白酶活性大小依次为胃、肠、肝胰脏。0．5mol/L CaCI2溶液能明显地抑制胃蛋白酶的活性。     

啤酒糟固态发酵生产生物农药条件的优化

探讨了以啤酒糟为主要原料进行固态发酵生产生物农药的方法，研究了不同培养基成分及培养条件对苏云金杆菌毒力效价的影响．实验结果表明，最适发酵培养基为：啤酒糟1000g，玉米粉15g，豆粕180g，KH2PO42g；其最适发酵条件为：原料含水量为60％，发酵温度30℃、pH为7．5，培养时间56h．分析结果表明，苏云金杆菌的毒力效价达4960IU／mg．     

猪IFNα在毕赤酵母中分泌表达条件的优化及高密度发酵

从发酵时间、接种量、pH值、诱导剂量等方面对重组基因工程（毕赤酵母甲醇利用缓慢型）的摇瓶发酵条件进行了优化，进一步探索了酵母菌表达猪IFNα的发酵工艺，包括种细胞密度对初始发酵期的影响，补加甘油、甲醇速率条件的控制等．结果表明，摇瓶发酵时，诱导最佳时间为96h，甲醇最适浓度为8g/L，发酵pH范围为6.4～9．0．最适接种量2：1．在分批发酵、接种量为10%且种子细胞光密度（OD600）为5～6时，最有利于细胞的高密度培养，在补料发酵时，根据溶氧控制甘油流加速率与时机，细胞干重达到118．75g／L，在48h重组猪IFNα表达量达到1。304g／L．     

哈茨木霉SDU3.87耐碱性纤维素酶液体发酵条件的研究

从碱性土样中分离出的1株哈茨木霉(T．harzianum),液体发酵条件的实验表明,产酶最适的培养基初始pH为7．5,培养温度为28℃,摇床转速为160r／min;最适的单一碳源为麸皮,添加量为质量分数3．0％～5．0％;添加质量分数0．5％左右的复合氮源有利于产酶的提高;诱导物纤维素CF—11和微晶纤维素的最适添加量分别为质量分数2．0％和1．0％;添加吐温80有利于产酶的提高,添加量质量分数0．2％;用300mL三角瓶液体摇床发酵时装样量80mL左右为宜;发酵周期5～6d,获得的粗酶液的内切酶活最高为1．85U/mL,FPA为0．96U/mL．水杨素酶活为0.81U／mL。     

一株产碱性蛋白酶菌株的分离与鉴定

从黄石市土壤中分离到一株产碱性蛋白酶的革兰氏阴性杆菌,不产芽抱,具美膜．能在ｐＨ９－１１条件下生长、产酶．产酶最适ｐＨ值为９,最适温度为３７℃,适发酵时间为３６ｈ．发酵产酶量为４５．０Ｕ·ｍＬ－１根据实验结果,该菌株鉴定为毛状假单抱菌Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｌａｓｉａ．     

酸性蛋白酶饲料固态发酵条件的研究

探讨了以啤酒糟为主要原料进行固态发酵生产酸性蛋白酶饲料的方法,研究了不同发酵基质配比及发酵条件对酸性蛋白酶活力的影响.试验结果表明,最适的发酵基质配比为m(啤酒糟)∶m(豆粕)∶m(玉米淀粉)∶m(KH2PO4)=100∶9∶2∶0.2;最适发酵条件为:原料含水量为58%,发酵温度31℃,初始pH为5.5,发酵时间84 h.在上述条件下,酸性蛋白酶活力达7 800 U/g.     

黑曲霉黄色变株A-2580产耐温酸性蛋白酶发酵条件的优化

经筛选诱变得到一株产生耐温酸性蛋白酶的黑曲霉黄色变株A－2580，对其发酵条件进行了优化：通过单因子试验和正交试验，确定其最适培养基为（g/L）：麸皮21.6、豆饼粉48.4、NH4Cl2、KH2PO40.8，pH4－5，温度30℃的条件下进行振荡培养，发酵72h，酶活可达6700u/ml。     

金针菇深层培养营养需求的探索

采用液体摇瓶培养法，对金针菇深层培养的适用碳、氮源，最适浓度及其发酵周期进行了探讨．结果表明，金针菇深层培养的适用碳源是籼米粉，适用氮源是黄豆饼粉，其最适碳源浓度为2．5％，氮源浓度为1．5％，最适发酵周期为5d．     

茶树菇液体培养条件的研究

经摇瓶实验将茶树菇菌丝体进行液体培养，选出了该菌株最佳工业发酵培养基C，并以单因子实验的形式，经10L发酵罐实验，确定了该菌株的最适工业发酵条件。温度在25℃，pH5．6，转速150r／min，通气量5L/min时，菌丝生长最旺，功丝干重2．5g／100mL，粗多糖含量为1．6g/100mL。     

患病草鱼主要消化酶活性变化的研究

分析了健康鱼和患肠炎病草鱼的淀粉酶和蛋白酶活性。其淀粉酶最适pH值均为7.2，蛋白酶最适pH值分别为7．0和6．0；其淀粉酶最适温度分别为30℃和35℃，蛋白酶最适温度均为40℃，且患肠炎病草鱼蛋白酶和淀粉酶活性较健康鱼低，但pH值在5．7以下时，患病鱼的蛋白酶活性较健康鱼高；温度在28℃以下时，患病鱼的淀粉酶活性比健康鱼高。     

枯草杆菌AS1．398制备中性蛋白酶的研究

本文研究了枯草杆菌ＡＳ１．３９８发酵培养制备中性蛋白酶，对发酵培养基配比，培养条件，金属离子的影响等进行了摇瓶试验。制备的ＡＳ１．３９８中性蛋白酶有如下性质：最适ＰＨ７．２－７．４，在ＰＨ６．５－８．０稳定。最适温度４２－４４℃，３５℃下处理２小时能保持约８５％酶活力，６０℃下１０分钟酶完全失活，此酶被ＥＤＴＡ和Ｃｕ２＋所抑制     

南极产低温蛋白酶菌株Marinobacter sp.R2的发酵条件及酶学性质研究

从南极海域沉积物中筛选到一产蛋白酶的菌株R2，经细菌学形态特征鉴定及16S rDNA序列分析鉴定，该菌株属于海杆菌属(Marinobacter)．生长特性研究表明该菌株属于兼性嗜冷菌，其最适生长温度为10～15℃．R2菌株能利用多种碳源产酶，最适产酶温度为20℃．粗酶液经硫酸铵盐析、DEAE cellulose-52柱层析进行初步分离纯化后进行酶学性质的研究．该菌株所分泌蛋白酶的最适作用温度为20℃，最适pH值为9～10，对热敏感．是典型的低温碱性蛋白酶．Ca^2 、Mn^2 、Cu^2 对该蛋白酶有较为明显的激活作用，而Cd^2 、Co^2 则能抑制酶活．高浓度的变性剂、PMSF、AEBSF和EDTA都能抑制该蛋白酶，表明该酶属于丝氨酸蛋白酶，且金属离子对酶活性中心构象有关键性的影响．     

生物农药固态发酵条件的研究

探讨了以麸皮为主要原料进行固态发酵生产生物农药的方法,研究了不同培养基成分及培养条件对苏云金杆菌毒力效价的影响．试验结果表明,最适发酵培养基为：麸皮1000g,玉米粉20g．豆粕150g,KH2PO4 2g;最佳发酵条件为：原料含水量为60％,发酵温度30℃、pH为7．5,培养时间48h．结果分析表明,苏云金杆菌的毒力效价达5400IU／mg。     

低温蛋白酶产生菌的筛选及其酶学性质的初步研究

从南印度洋深海沉积物中筛选获得1株产低温蛋白酶的嗜冷菌株11815,经16S r DNA鉴定,结合菌株的形态结构特征和生理生化特性分析,确定其为动性球菌属(Planococcus sp.).该菌株的最适生长温度及最佳产酶温度均为20,℃,经发酵条件初步优化后,48,h内摇瓶水平的蛋白酶产量可达280,U/m L;酶学性质分析结果显示:该菌株所产蛋白酶的最适作用温度为37,℃,最适p H为8.0,30,℃条件下可保持最高催化活力的80%以上,而在25~30,℃仍具有较高的催化活力(保持最高催化活力的50%以上).该菌株所产蛋白酶属于典型的低温蛋白酶,在常温下具有较好的催化活性,因此在食品加工业及冷水洗涤剂开发等方面具有较高的研究价值.     

响应面法优化黄杆菌YK-5产卡拉胶酶的发酵条件

采用响应面法对黄杆菌YK-5产卡拉胶酶的发酵条件进行了优化．首先利用Plackett．Burman设计从8个因子中筛选出3个影响YK-5产酶的主要因素,分别为：培养温度、培养基起始pH和培养基中卡拉胶含量．然后进行最陡爬坡试验逼近最佳响应面区域,最后通过Box．Behnken设计和响应面分析得到最适条件：培养温度28．17℃,培养基起始pH值8．77和培养基中卡拉胶含量3．71g／L．在最适条件下测得的酶活为215．72U／mL,是优化前的2．2l倍．