海洋低温BS070623菌株发酵条件优化(Ⅱ)

在发酵培养基优化研究基础上,建立了海洋低温蛋白酶茼株（Bacillus subtilis简写为BS070623）发酵最适pH值、温度、时间、接种量、通气量分别为5．5、16℃、48h、8％、200ml／500ml;在上述最适发酵条件下,BS070623菌株5L发酵低温蛋白酶活性为1189．3U／mg。     

产低温蛋白酶海洋菌筛选、鉴定及性质的初步研究

通过脱脂牛奶平板法从深海海泥中筛选到35株在低温条件(4℃)下具有蛋白酶活性的菌株,并对这35株菌进行了分子生物学鉴定和酶活测定,发现这35株菌分别属于动性球菌属(Planococcus)、芽孢杆菌属(Bacillus)、Fictibacillus、发光杆菌属(Photobacterium)、冷蛇菌属(Psychroserpens)、微小杆菌属(Exiguobacterium)、交替假单胞菌属(Pseudoalteromonas).选择各个属活性最高的菌株为研究对象,以酪蛋白为反应底物对其所产蛋白酶粗酶液酶学性质进行初步研究.结果表明,动性球菌属菌株PL4-1所产蛋白酶酶活最适反应温度为40℃,10℃时可保持50%以上的酶活,在60℃时酶活下降至40%以下,为典型的低温蛋白酶.     

低温蛋白酶产生菌的筛选及其酶学性质的初步研究

从南印度洋深海沉积物中筛选获得1株产低温蛋白酶的嗜冷菌株11815,经16S r DNA鉴定,结合菌株的形态结构特征和生理生化特性分析,确定其为动性球菌属(Planococcus sp.).该菌株的最适生长温度及最佳产酶温度均为20,℃,经发酵条件初步优化后,48,h内摇瓶水平的蛋白酶产量可达280,U/m L;酶学性质分析结果显示:该菌株所产蛋白酶的最适作用温度为37,℃,最适p H为8.0,30,℃条件下可保持最高催化活力的80%以上,而在25~30,℃仍具有较高的催化活力(保持最高催化活力的50%以上).该菌株所产蛋白酶属于典型的低温蛋白酶,在常温下具有较好的催化活性,因此在食品加工业及冷水洗涤剂开发等方面具有较高的研究价值.     

产乳酸链球菌素的乳酸乳球菌的等离子体诱变选育

采用产乳酸链球菌素(Nisin)的乳酸乳球菌为出发菌株,在含有高浓度Nisin的固体平板上,筛选出了耐受10 000IU/mL Nisin的乳酸乳球菌菌株,其发酵单位达到1 680IU/mL。以此菌株为起始菌株进行常压、室温等离子体诱变,利用24方孔深孔板快速筛选高产Nisin的突变株。结果表明,在诱变菌株的存活率为3%的条件下获得的突变株的正突变率达到27.3%。通过摇瓶发酵进一步考察初步筛选的正突变株的Nisin发酵水平,发现有一个突变株发酵Nisin的活性达到6 120IU/mL。     

微波辐照选育L-乳酸高产菌的生物学特性研究

在低功率微波条件下,采用水循环冷却器,对干酪乳杆菌鼠李糖亚种(Lactobacillus casei subsp. rhamnosus)X1-12进行诱变处理,在微波功率400 W,辐照时间3 min的诱变条件下得到L-乳酸产量为115.8 g/L的突变株W3-9,比原始菌株X1-12提高了57.98%,连续遗传8代,产酸性状稳定.通过原始菌株和突变株的生理生化实验,可知微波辐照后的菌株生物学特性发生部分改变.     

丁二酸高产菌株的选育及发酵条件优化

对产琥珀酸放线杆菌RH进行紫外诱变选育,用TLC法初筛得到84株丁二酸产量较高的菌株;对初筛得到的菌株进一步用HPLC法复筛,得到1株高产突变菌株C4-1.经遗传稳定性分析,发现该高产突变株连续传5代后丁二酸产量基本保持稳定.碳源、氮源优化实验表明,突变株C4-1产丁二酸的最适碳源为液化淀粉,最适氮源为玉米浆干粉,且可以采用液化玉米粉添加少量玉米浆干粉代替液化淀粉和玉米浆干粉,以节约成本;在优化条件下突变株C4-1三角瓶发酵60h,丁二酸产量达到(52.91±0.53)g/L,较原始菌株提高了33.46%.     

复合诱变及发酵优化选育染料木素转化菌株的研究

本研究通过对两株β-葡萄糖苷酶高产菌株黄丝曲霉JS-Q和黑曲霉XK-L进行复合诱变,诱变混合菌株直接进行产酶培养,利用"复杂系统定向调控技术",以酶活为指标对培养条件进行连续的定向调控,在产酶培养条件优化过程中富集正突变株并逐步提高酶活,在挑选出正突变株的同时优化出适合高酶活正突变株的培养条件.最终从优化产酶培养基中挑选到菌株F17和F27,产酶能力比出发前菌株XK-L提高了64.9%和49.4%.用这两株菌分别发酵槐角苷,经测定其转化率分别为76%和78%,比出发菌株XK-L提高31.0%和34.5%.     

氮离子注入选育耐酸性α-淀粉酶产生菌诱变效应的研究

利用低能(30keV)氮离子注入中温中性α-淀粉酶产生菌枯草芽孢杆菌BF7658,研究对其产耐酸性α-淀粉酶的诱变效应.结果表明,BF7658菌株存活率曲线是典型的"马鞍型"剂量-效应曲线,在"马鞍型"区域对应注入剂量50×1014～100×1014 ions/cm2下具有较高的突变率.通过诱变筛选到一株最适作用pH为5.0,较出发菌株的最适作用pH偏低一个单位的突变株,编号TUST743.该突变株产酸性α-淀粉酶的酶活为343U/mL.该酶在pH4.5和4.0条件下的相对酶活为61%和38%,说明此突变株所产酸性α-淀粉酶对低pH有较好的耐受性.经连续传代实验,表明该菌株遗传性质稳定.     

红曲霉固态发酵产糖化酶及酸性蛋白酶条件的优化

从8株红曲霉中筛选出红曲霉MQ7作为高产糖化酶和酸性蛋白酶的供试菌株,采用固态发酵方法测定在不同发酵温度、底物料液比、大米和麸皮比例条件下的产酶情况.利用正交实验优化固态发酵产酶过程,确定该菌株产酶最佳发酵条件为:发酵温度30,℃,底物料液比(g∶mL)20∶25,大米麸皮比例(g∶g)17∶3.在此条件下,糖化酶活力达1,641.69,U/g,酸性蛋白酶活力达151.09,U/g.同时研究了NaCl含量对红曲霉酶活力的抑制作用,当NaCl质量分数达到18.92%时,红曲霉MQ7产糖化酶活力下降64.8%,酸性蛋白酶活力下降85.6%.     

枯草杆菌诱导型高效表达-分泌系统的构建

利用枯草杆菌蛋白酶缺陷突变株,sacB诱导基因及degQ,degU(Hy)正调控基因构建了诱导型表达-分泌系统以解决枯草杆菌分泌大量胞外蛋白酶和外源基因表达水平不高的问题.采用共转化方法将枯草杆菌IA95的degU(Hy)突变引入枯草杆菌蛋白酶缺陷突变株DB403,获得degU(Hy)和蛋白酶三缺陷的新菌株DB1342;利用sacB基因的启动子--信号序列及芽孢杆菌的两个正调控基因degQ和degU(Hy)构建了诱导型表达-分泌载体pURT3及pURTQ4,由DB1342突变株及pURT3及pURTQ4载体组成枯草杆菌诱导型高效表达和分泌系统.在本系统中内源基因sacB的表达量是原菌株DB403的296倍,将地衣杆菌α-淀粉酶基因引入本系统后在sacB,degQ,degU的调控和蔗糖的诱导下,α-淀粉酶的表达量是在DB403中的140倍,证实degQ及degU对基因表达的增强作用是叠加的.     

抗黄瓜灰霉病的枯草芽孢杆菌筛选及其抑菌活性的初步研究

结合涂布平板法和温室盆栽植株法,测定了41株枯草芽孢杆菌发酵液对灰霉病病原菌及黄瓜灰霉病的抑制效果,以此筛选出针对灰霉病的生防菌株.结果表明,抑菌效果最好的枯草芽孢杆菌为BS01和BS03.采用涂布平板法研究了菌株BS01和BS03抑菌活性,结果表明,抑菌效果均为50%时,BS03比BS01的菌体浓度低,得到抑菌效果最好的菌株BS03.采用温室盆栽植株法测试了菌株BS03的抑菌活性,结果表明,菌悬液比发酵滤液的抑菌效果好,并且在菌悬液处理黄瓜苗后的第3天抑菌活性最高.     

透明圈法筛选柚苷酶高产菌株

在前人的研究基础之上,初步研究设计和实验了一种改良的柚苷酶平板透明圈筛选模型。在本实验室保藏的10株柚苷酶菌株中,3号黑曲霉产酶活最高,摇瓶产酶达251.93 U/mL,经平板分离纯化,得到3-54号菌株,摇瓶产酶达385.207 2 U/mL。     

大蒜拮抗性内生细菌的筛选

本实验以市面销售大蒜作为实验材料,通过表面消毒,利用粉碎机粉碎方法得到植物组织原液的方法,由平板涂布法分离得到药用植物组织内的内生细菌或者直接在无菌环境中取大蒜组织块在PDA培养基或NA培养基直接进行培养,通过不断地分离纯化提取得到的较纯植物内生细菌作为目标菌,以大肠杆菌（Escherichia coli）,耐甲氧西林金色葡萄球菌（methicillin resistant Staphylococcus aurous,MRSA）,金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aurous）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtitles）作为指示菌进行内生菌抑菌试验,由内生细菌对不同病原菌的抑菌圈大小的比较筛选出抑菌最强的内生细菌。研究结果表明：大蒜中有大量的内生细菌,分离得到16株内生细菌,16株菌对4种以上病原菌均有不同程度的抑制作用。其中DS1、DS2和BS2对四种病原菌的拮抗能力均较强,BS2对四种靶标菌的相对抑菌率在200%以上。     

Screening of benzoic acid biodegradation strains

Three strains BQ,BJ,and BS utilizing benzoic acid as the sole carbon source were achieved from Yichang City,Hubei Province,China,through selective enrichment and domestication.Both BQ and BJ were primarily identified as Acinetobacter.spp while BS was Geotrichum.spp.After three domestications,the removal rates of BQ,BJ,and BS to chemical oxygen demand(COD) value of benzoic acid were 62.41%,94.44%,and 43.34%,respectively.The strains were mixed cultured,and the degradation rates of strains to benzoic acid at different temperature,pH and benzoic acid concentration were determined.The results show that the optimum degradation conditions about strains were pH 7.0,temperature 30 ℃,and aerobic with 1 500 mg/L of concentration of benzoic acid.In this condition,the COD removal rate of strains to benzoic acid reached 84.93%.     

铝片TiO2薄膜在降解4BS染料中的应用

采用溶胶-凝胶(sol-gel)工艺在铝片表面制得了均匀透明的TiO2薄膜,考查了其光催化降解4BS染料的活性,研究了热处理温度、涂覆层数、以及溶液改性等因素对TiO2薄膜的光催化性能的影响.结果表明:该薄膜能有效降解4BS染料,热处理温度、涂覆层数影响薄膜的性能,层数为5,热处理温度为600 ℃的薄膜具有较高的光催化活性.TiO2薄膜对加入Fe3+的4BS溶液的降解率明显提高.     

内置BS接收画中画的三高频调谐彩色电视机研制

内置ＢＳ接收画中画的三高频调谐彩色电视机研制李元密，陈皓光，张毅（厦门大学电子工程系）（厦门达真磁记录有限公司）卫星电视广播是解决幅员辽阔和地形复杂所造成的电视复盖率低、节目源少的最好途径。随着“东方红号”和“亚洲一号”广播卫星的发射，必将导致卫星电...     

用TOF-MS和GC-TOF-MS分析改良乌尔门反应的副产物

采用EI和CI电离方式下的混合样品直接进样法、EI电离条件下的气质联用技术 ,利用飞行时间质谱的精确质量及准确的元素组成 ,鉴定了改良乌尔门反应的副产物多联苯混合物的结构 ,并测定了它的相对含量分别为联苯 1 ( 70 .0 % )、三联苯异构体 2 ( 3.9% )、四联苯异构体 3( 4 .9% )和五联苯及其异构体 5 亚甲基 1 ,2 ,3,4 四苯基 1 ,3 环戊二烯 4 ( 2 1 .2 % ) .由于具有共轭大π键的多联苯分子离子结构相当稳定 ,其纯化合物的分子离子的丰度都接近 1 0 0 %或为基峰 ,可根据混合物直接进样所得质谱 (CI)中各组分分子离子的相对丰度 ,估计出组分 2、3和 4在混合物中的相对含量 .这一结论与气质联用 (EI)所测的总离子流色谱图中 2和 3的相对含量相一致 .对通过重结晶得到的主要副产物纯品联苯 1的EI TOF MS谱作了具体的裂解分析     

流化床中光催化降解4BS染料废水的影响因素分析

用浸涂法以硅酸钠为粘结剂在沙子上制备了负载纳米TiO2光催化剂,在二相流化床光催化反应器中,通过处理4BS染料溶液考察了光催化剂的光催化活性和影响因素.得出最佳转化条件为, 催化剂(沙子,硅酸钠,二氧化钛)的最佳质量配比为10:1:2 ,光催化剂最适用量为20 mg,溶液中Fe3+最佳添加量为25 mg/L,在此条件下孔径0.45(40目)～0.90 mm(20目)的负载光催化剂处理20 mg/L的4BS染料溶液2 h,光催化降解率达到81.9%.结果还表明,溶液pH值为2～6时,光催化剂对4BS染料溶液的光催化降解率更高.     

肠鸣音的小波域滤波方法

肠鸣音信号是人体重要的生理信号之一,对其进行分析可以研究胃肠运动生理学,进而对许多胃肠功能紊乱疾病进行直接有效诊断.临床检测到的肠鸣音信号具有信号弱、噪声多、复杂且高度不平稳等特点,本文引入小波滤波方法,对采集到的原始信号采用不同的阚值去噪方法去噪,在MATLAB环境下进行仿真,分析了各自的滤波效果,总结出各种阚值去噪...     

Ni(Pz)_4Cl_2型化合物的低温热容量及顺磁性质的理论研究

本文利d~8（D_(4b)）全组态混合统一晶场理论计算出来的ZFS及EPR参量，对Ni（Pz）_4Cl_2型化合物在低温下的热容量、磁化率进行了统一的理论计算，理论计算结果与实验完全一致。