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相似文献
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1.
用改进的高离子强度法分离的萝卜叶绿体经SDS60℃裂解,抽提的ctDNA只需简单纯化即可用于酶切分析,萝卜ctDNA用4种限制性内切酶BamHI,PstI,HindⅢ和EcoRⅠ分别进行单酶完全酶解,推算其分子量和长度分别为82.5×1066T 125KB。  相似文献   

2.
黑曲霉(Aspergillusniger728)的粗酶液,经硫酸铵沉淀,SephadexG-25柱凝胶过滤脱盐,DEAE-Toyopearl离子交换柱层析和SephacryS-100凝胶层析纯化,经PAGE鉴定为一条带SDS凝胶电泳测定分子量为70000.金属离子Fe3+对该酶有一定的抑制作用,该酶的等电点为3.7,最适pH为4,最适温度为60℃.E2801%为15.72,Km值为0.112×10-3m.  相似文献   

3.
通过DEAE-CelluloseDE-52和DEAE-SePhadexA-50离子交换层析等提纯步骤,对解脂假丝酵母胞外脂肪酶进行了纯化,得到了层析纯样品,比活提高27.4倍,得率11%.该酶反应最适温度为40℃;最适PH为7.5;等电点约在PH4.5~5.0之间;8℃以下存放,酶活力损失较少,30℃以上存放,酶活力有明显损失.金属离子Sr2+,Ba2+,Zn2+和Mg2+对该酶的激活作用为Sr2+>Ba2+>Zn2+>Mg2+.Cu2+和Na+对酶活性有抑制作用.NaN3对保持酶活性有重要作用.  相似文献   

4.
本文研究了枯草杆菌AS1.398发酵培养制备中性蛋白酶,对发酵培养基配比,培养条件,金属离子的影响等进行了摇瓶试验。制备的AS1.398中性蛋白酶有如下性质:最适PH7.2-7.4,在PH6.5-8.0稳定。最适温度42-44℃,35℃下处理2小时能保持约85%酶活力,60℃下10分钟酶完全失活,此酶被EDTA和Cu2+所抑制  相似文献   

5.
牛血红细胞铜锌超氧物歧化酶经氯仿-乙醇混合液处理,丙酮沉淀,凝胶过滤和DEAE-纤维素柱层析等步骤提取和纯化.纯化酶在聚丙烯酰胺凝胶电脉(PAGE)图谱上的两条蛋白染色带和活性染色带相互对应,在SDS—PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱上呈现单一区单一区带,说明该酶已纯化到均一程度.此酶分子量为34000,亚基分予量为17000,在紫外区最大吸收值为258nm.该酶对KCN和H2O2均敏感,在0~75℃温度范围内对热稳定.纯化酶的比活性为7463U/mg,纯化1009倍,酶的回收率为79%.  相似文献   

6.
对固体表面化学发光法固体基质的发光背景进行了考察.提出了降低背景的方法,以NaOH与水的质量比值为1.5%溶液、10-2mol·L-1EDTA溶液或其混合溶液浸泡滤纸24h,滤纸背景的降低分别为60%,79%及82%.  相似文献   

7.
从菊芋根际土壤中分离出一株菊粉酶(InulinaseE.C.3.2.1.7)产生菌,经物理和化学诱变得高酶活黑曲霉突变株AJ1958.该菌株在培养基(0.07g/mL菊芋提取液1000mL,豆饼粉5g,麸皮5g,KCI0.7g,FeSO4·7H2O0.01g,MgSO4·7H2O0.5g,PH5.0)中,于30℃振荡培养3d,酶活力可达64μmol·min-1.酶水解反应的最适PH为3.0~4.0,最适温度为60℃,在PH2.5~5.5的范围内和75℃以下较稳定.适宜条件下,10h内0.05g/mL的菊粉溶液中之底物几乎100%被酶水解.产物糖中果糖质量分数为93%,葡萄糖质量分数为5.6%.该突变株产生的菊粉酶具有较满意的水解性和热稳定性.  相似文献   

8.
生长因子对牛体外受精卵体外发育的影响   总被引:2,自引:0,他引:2  
本研究探讨了在成熟培养液和发育培养液内添加EGF和TGF-α对牛体外受精卵发育的影响,在成熟培养液内分别添加EGF和TGF-α,经体外受精处理后卵裂率分别为78.3%和82.6%,显著高于对照组60.2%的卵裂率;三个处理组囊胚发育率分别为19.6%、24.5%和18.7%,三者间无显著差异.在发育培养液内分别添加EGF和TGF-α,其囊胚发育率分别为30.0%和23.4%,与对照组21.0%的囊胚发育率相比差异不显著.在成熟培养液内添加TGF-α,在发育培养液内添加EGF,经这两种生长因子分别作用后,体外受精卵翼胚发育率为21.0%,与单独使用其中一种生长因子相比囊胚发育率无明显提高.  相似文献   

9.
丙酮沉淀法提取中性β-甘露聚糖酶的条件研究   总被引:7,自引:0,他引:7  
利用丙酮沉淀提取枯草芽孢杆菌K3-14发酵产生的中性β-甘露聚糖酶-20℃时V(发酵液):V(丙酮)用量为1:1.0时,提取率为82.57%,固体酶制酶活力为19.43万U/g,1:2.0时提取率为95.40g,所得固体酶净重增加此工艺在工业上是可行的。  相似文献   

10.
产耐热蛋白酶菌株的分离和酶性质的研究   总被引:3,自引:1,他引:3  
从南汇县黄路乡一草堆下的土壤中分离到一株产耐热蛋白酶的链霉菌。该酶的最适反应温度为70℃。在60℃时稳定,当80℃时处理10min,尚余84%活性。在Ca^2+存在的条件下,酶的热稳定性有显著提高。酶反应的最适pH为8.5,在pH5~9之间稳定,因此属于微碱性蛋白酶。通过抑制剂试验,该酶基本上被PMSF(苯甲基磺酰化合物)抑制,但不被金属螯合剂(EDTA,双吡啶)抑制。金属离子Cu^2+,Zn^2  相似文献   

11.
通过对特产于重庆地区的濒危物种缙云卫矛(Euonymus chloranthoides Yang)7个居群91个个体其功能叶片的过氧化物酶(POD)、细胞色素氧化酶(CYT)、超氧化物歧化酶(SOD)、酯酶(ES)、淀粉酶(AMY)同工酶谱带的分析,研究了该植物的遗传多样性水平.结呆显示:缙云卫矛的所有居群都存在着一定数量的迁移率相同的主要酶谱带(4条),占酶谱带总数的10.81%;5个酶系统共检测出酶谱带37条,等位基因位点数18个,其中多态位点数8个,单态位点数10个,乡态位点百分数P=44、44%,平均每个位点的等位基因素A=l,5,平均期望杂合度He=18.82%,平均实际杂合度H0=24.23%.  相似文献   

12.
以本实验室筛选的一株米曲霉为出发菌株,通过紫外线诱变,并经过初筛、复筛等步骤而得到一株植酸酶高产菌株,酶活约提高156%,最高酶活达240U/ml粗酶液,72h左右达到产酶高峰期.植酸酶的最适温度为56℃,最适pH为5.5;Fe2+、Zn2+、Al3+对其酶活有强烈的抑制作用,而Mg2+和EDTA在浓度为1mmol/L时有激活作用  相似文献   

13.
采用细菌培养、尿素酶试验和酶免疫技术同时进行Hp检测,对三种检测方法进行评估。以细菌培养为金标准,尿素酶试验的灵敏性和特异性分别为96.51%和96%,EIA法为95.35%和86%。细菌培养对Hp感染具有确认价值,但耗时较长,检测过程较复杂。尿毒酶试验简便快捷,适宜于在胃镜室快速检测以及在基层医院普及开展。EIA灵敏性高,特异性稍低,但仍不失为一种Hp感染血清流行病学调查的有效手段。  相似文献   

14.
丝瓜果实发育过程中4—CL连接酶的特性研究   总被引:8,自引:0,他引:8  
以丝瓜果实为材料,分析了4-香豆酸辅酶A连接酶(4-CL)的理化性质及其在木质素合成和导管分子(TE)分化中作用。发现4-CL存在两种同工酶,经柱层析后,酶I纯化15.68倍,含量为22.63%;酶Ⅱ纯化44.23倍,含量为3.91%。酶I对得豆酸和咖啡酸有较大亲和性,对阿魏酸较小;而酶Ⅱ对香豆酸和咖啡酸有一定亲和性,对阿魏酸亲和性极小。酶I有较好的热稳定性,最适温度为40℃,最适pH8.0。发现  相似文献   

15.
环糊精葡萄糖基转移酶在壳聚糖上的固定化   总被引:3,自引:0,他引:3  
以甲醛作为活化剂将环糊精葡萄糖基移酶(CGTase,EC,3.2,2.19)固定在壳聚糖上。发现CGTase经固定化后,最适温度没有改变,最适pH从6.0移到5.0,热稳定性及pH稳定性都有所提高,在pH8.5和50℃下,经过4次分批反应,固定化酶保留约66%活力,柱式连续反应的半衰期大约为6天。  相似文献   

16.
丝状蓝藻与大肠肝菌之间杂合质粒的构建与克隆   总被引:1,自引:3,他引:1  
丝状蓝藻Plectonema boryanum的pPb1经HpaⅡ酶酶切与AccI酶酶切的pUC13构成杂合质粒,杂合质粒克隆到E.coliJM109,频率为3.4%.转化进E.ColiJM109的杂合粒,用EcoRI和HpaI酶切后得到证实。杂合质粒转化到新制备的P。boryanum原生质球或丝状体后,再生的藻体表现高于原来两倍以上的AP抗性。利用AP每感的E.coli平板培养,证实了转化入藻体  相似文献   

17.
从酒糟样品中筛选得到五株胞外植酸酶活性较高的酵母,选择酶活最高的1-1作为出发菌株,经单倍体分离、原生质体制备、紫外诱变,最后得到一株突变株Msp-2128,其胞外植酸酶活力为23.08U/mL,比出发菌株提高了82%,且产酶稳定  相似文献   

18.
固态发酵酿造糟渣制备菌体蛋白饲料   总被引:3,自引:0,他引:3  
用木霉、扣囊拟内孢霉和丝孢酵母固态发酵酱油渣、醋糟制备菌体蛋白饲料,培养料配比为酱油渣60%,醋糟20%,麦麸10%,玉米面10%,无机营养盐适量。经121℃,30min或100℃,60min灭菌后,以10%接种等量混合的固体菌种开放培养42h后,物料收率82%左右,蛋白含量24.6%,粗纤维含量22.3%,每克干料中的生物量为3.5×109。  相似文献   

19.
短小芽孢杆菌碱性蛋白酶的性质   总被引:1,自引:0,他引:1  
对短小芽孢杆菌c172(pBX96)转化子发酵淀粉产生的碱性蛋白酶,采用硫酸铵沉淀、SephadexG-25脱盐、DEAE-纤维素柱层析等方法进行纯化,并对纯化酶的性质进行了研究.结果表明,酶反应的最适pH值为11.0;在pH8.0~11.0之间稳定;最适反应温度为40℃;热稳定性较好,45℃下处理30min酶活性不变,60℃下处理30min活力保留65%.对甲基苯磺酰氟(PMSF)能完全抑制该酶活性,洗涤剂中的三聚磷酸钠对酶有较大钝化作用.  相似文献   

20.
克鲁维酵母y-85菊粉酶水解菊粉的研究及其中试   总被引:1,自引:0,他引:1  
克鲁维酵母(Kluveromycessp.)Y-85在菊粉提取液培养基中生长产菊粉酶,其细胞和胞外的菊粉酶活力分别约占菊粉酶总活力的76%和24%.试验中以酶发酵液作酶液.该酶的S/I值为15.2.酶液在50,55和60℃下保温1h,活力分别残留100%,96%和65%;在8℃下放置7d,14d,酶活力分别残留98%和96%.在pH3.6~7.0内,酶活性十分稳定.5mmolL-半胱氨酸和Fe+2分别可使酶活力提高10.4%和41.2%.y-85菊粉酶水解菊粉的适宜条件是:底物为总糖浓度10%~15%菊粉提取液,pH5.0,温度为55℃,酶用量为底物每克糖加酶800u(以蔗糖为底物测酶活力)或26.3u(以菊糖为底物测酶活力)、搅拌酶解6h.在上述条件上,底物降解率最高可达98.5%.酶解液中,果糖占总还原糖量的85%.用1100L罐进行酶解中试,5批试验,底物降解率平均达94.2%.  相似文献   

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