木聚糖降解菌的筛选和木聚糖酶性质的研究

筛选两株生长快、产木聚糖酶活力高的菌种；黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ，ＡＮ０１）、链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｓｐ．Ｓｔｒ７Ｂ），酶活力分别达１２８ｍｇ／Ｌ·ｍｉｎ和１７６ｍｇ／Ｌ·ｍｉｎ；酶反应最适温度分别为６０℃与５０℃；最适ｐＨ值为５．０和６．０，并分别在ｐＨ２．２～５．０，５．８～６．４酶活性稳定；在６０℃条件下保温１．５ｈ，酶活力分别剩余２０．５％，８８．５％，其中ＡＮ０１株原酶液在９０℃保温１０ｍｉｎ，活力仍剩余１４．５％．Ｃｕ２＋对酶活表现出极强抑制，Ｆｅ２＋，Ｍｇ２＋，Ｃａ２＋等离子则有促进作用；用纸层析法探讨了不同培养时间各种产物产生的情况．     

嗜碱细菌NTT33碱性β—甘露聚糖酶的纯化与性质研究

根据了嗜碱芽孢杆菌ＮＴＴ３３产生的碱性β－甘露聚糖酶经纯化后,在ＰＡＧＥ电泳上呈现一条蛋白带,分子量为３．８９×１０＾７,等电点为３．０￣４．０,酶反应最适ｐＨ为９．０￣１０．０,最适作用温度为８０℃,稳定ｐＨ为６．０￣９．０,稳定温度为６０℃以下,金属离子Ｃｕ＾２＋,Ｍｇ＾２＋,Ａｌ＾３＋,Ｃｏ＾２＋对该酶有一定的激活作用,而Ａｇ＾＋,Ｈｇ＾２＋,Ｍｎ＾２＋对该酶有明显抑制作用,经薄层层析鉴定,     

福寿螺β-葡萄糖苷酶的分离纯化及性质的初步研究

以福寿螺内脏为材料,经本实验室开发的工业生产法制备粗酶粉,进一步采用葡聚糖凝胶（ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００）和ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０柱层析纯化,获得经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单一纯的β－葡萄糖苷酶制剂．测定该酶的最适反应温度为４３℃,最适反应ｐＨ为５．１;在ｐＨ５．１,４５℃下,该酶催化水杨素水解的Ｋｍ值为３．４０ｍｍｏｌ／Ｌ,活化能为５０．６３ｋＪ／ｍｏｌ．研究几种效应物对酶活力的影响,结果表明：Ｍｎ２＋、Ｃｏ２＋对酶有激活作用,而Ｃｕ２＋、Ｈｇ２＋、Ｐｂ２＋、ＳＤＳ及脲对酶有不同程度的抑制作用,其中Ｃｕ２＋和Ｈｇ２＋对该酶的抑制作用最强,其抑制机理均表现为非竞争性抑制     

枯草杆菌AS1．398制备中性蛋白酶的研究

本文研究了枯草杆菌ＡＳ１．３９８发酵培养制备中性蛋白酶，对发酵培养基配比，培养条件，金属离子的影响等进行了摇瓶试验。制备的ＡＳ１．３９８中性蛋白酶有如下性质：最适ＰＨ７．２－７．４，在ＰＨ６．５－８．０稳定。最适温度４２－４４℃，３５℃下处理２小时能保持约８５％酶活力，６０℃下１０分钟酶完全失活，此酶被ＥＤＴＡ和Ｃｕ２＋所抑制     

紫外诱变原生质体选育碱性蛋白酶高产菌株的研究Ⅲ.诱变株的选育及其产酶条件的研究

以地衣芽孢杆菌（ＢａｃｉｌｕｓＬｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）５３号菌为出发菌株，在原生质形成和再生的最佳条件下制备原生质体，并对原生质体进行了多次诱变处理，从大量突变株进行筛选最终获得了高产、稳定、耐热的碱性蛋白酶产生菌株５３－Ｇ３８－６，产酶活力由１１０４Ｕ／ｍｌ提高到２２０８０Ｕ／ｍｌ．该诱变株最适产酶条件为：培养基由质量分数（ｗ／％）为胰蛋白胨１，酵母膏０．５，玉米粉５，Ｎａ２ＨＰＯ４１２Ｈ２Ｏ０．４，ＫＨ２ＰＯ４０．０３，Ｎａ２ＣＯ３０．１组成，ｐＨ自然，培养温度４２℃，培养时间４４～４８ｈ，ｗ／％为０．２的ＣａＣＯ３可提高酶的产量．酶作用的最适条件：６２℃，ｐＨ１０．０，ｐＨ在９～１０之间稳定     

紫外诱变原生质体选育碱性蛋白酶高产菌株的研究──1出发菌株的筛选及产酶条件的研究

从土壤中筛选到一株嗜碱性地衣芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）５３－Ａ６．，该菌株能在ｐＨ１０以上６０℃的环境中良好生长，４５℃ｐＨ９～１２的条件下均可产生活力较高的碱性蛋白酶。酶反应的最适条件：６０℃，ｐＨ１０～１１，在ｐＨ８．５～１１之间较稳定。６０℃保温１ｈ剩余酶活在２０％以上。     

木霉4131菌株纤维素酶的分离纯化和部分性质研究

绿色木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ Ｖｉｒｉｄｅ）突变菌株４１３１＾［１］产生的纤维素酶经过ｓｅｐｈａｄｅｘＧ－７５和ＤＥＡＥ－ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ａ－２５两种层析分离,分离得到具有内切α－葡聚糖酶（ＣＭＣａｓｅ）活性的纯组分,提纯后酶的比活力提高到原来的２６．２倍;回收率为３２．８％,分子量为５６９００,等电点为４．０,最适反应温度为５５℃,最适ｐＨ为４．５,金属离子Ｋ＾＋,Ｎａ＾＋,Ｍｇ＾２＋对其     

绿色木霉A10纤维素酶的分离纯化及理化性质研究

绿色木霉Ａ＿（１０）纤维素酶Ａ＿２的Ｃ＿１酶和Ｃｘ酶被分离纯化。Ｃ＿１酶的分子量为５４，４９，４４．５ｋｄ（三个亚基），最适温度为５０℃，最适ｐＨ为５．０；Ｃｘ酶的分子量为１７．５ｋｄ，最适温度为５５℃，最适ｐＨ为４．５。两者均为糖蛋白，富含极性氨基酸，水溶性好。     

黑曲霉单宁酶的纯化及部分性质研究

黑曲霉在五倍子单宁的诱导下产生单宁酶。通过（ＮＨ４）２ＳＯ４分形沉淀,ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换层析,Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１５０凝胶过滤,从黑曲霉的发酵液和菌丝中纯化得到凝胶电泳均一的单宁酶。酶作用的最适温度为３０℃,最适ｐＨ值为５．５,在温度１０－３０℃和ｐＨ４－６之间保持稳定,金属离子对单宁酶没有的激活作用,Ｆｅ＾２＋和Ｍｎ＾２＋则对酶有抑制作用。     

紫外诱变原生质体选育碱性蛋白酶高产菌株的研究…

从土壤中筛选到一株嗜碱性地衣芽孢杆菌５３－Ａ６．，该菌株能在ｐＨ１０以上６０℃的环境中良好生长，４５℃ｐＨ９￣１２的条件下均可产生活力较高的碱性蛋白酶，酶反应的最适条件：６０℃，ｐＨ１０￣１１，在ｐＨ８．５￣１１之间较稳定。６０℃保温１ｈ剩余酶活在２０％以上。     

絮凝剂在处理碱性蛋白酶发酵液中的应用

絮凝剂（ＳＰＡＮ）是不同接枝率的演粉与聚丙烯酰胺的接枝共聚物。作为一种高效、无毒、价廉的优良絮凝剂已广泛应用在化工、轻纺、石油开采以及环保工业中。本文进行了将此絮凝剂推广应用到发酵液的预处理中的一系列研究,获得了满意的结果。     

碱性蛋白酶交联酶晶体的制备及稳定性

研究了用透析平衡法制备碱性蛋白酶晶体的过程,在硫酸铵饱和度为２５％的条件下获得了符合要求的碱性蛋白酶晶体,然后采用戊二醛进行交联,制备出了交联酶晶体,并对其在高酸碱度、高温、有机溶剂或有机溶液中的稳定性进行了研究．实验结果表明,交联酶晶体有较高的稳定性．     

pH值和温度对虎纹蛙消化系统蛋白酶活力的影响

采用福林-酚试剂法,就pH值和温度对虎纹蛙(Rana rugulosa)消化系统蛋白酶活力的影响进行了研究.结果表明,虎纹蛙食道、胃、前肠、后肠、直肠和胰脏蛋白酶的最适pH值分别为1.5、1.5、7.4、7.4、7.4和9.6,最适温度则均为50℃.文中对蛙类的人工养殖提出了几点建议.     

产中性蛋白酶的枯草杆菌478的发酵及其基本特性

枯草芽孢杆菌478是为生皮脱毛选育的一株中性蛋白酶产生茵。500 ml 摇瓶,装量50 ml 培养基,接种一小铲,31℃摇床培养40小时,产酶为5502 u/ml。BF—12—Ⅰ型罐发酵28小时,31℃产酶为5795 u/ml。酶的酪蛋白水解最适 PH 为7.0,活性范围为 PH 6.5～7.5,此间热稳定性较好,40℃两小时失活为12%。酪蛋白水解的最适温度为40～50℃。Fe ~(++)Hg~(++)与 Cu 对酶有抑制作用,Ca~(++)与 Mg~(++)则有激活作用。聚丙烯酰胺凝胶电泳分析得到9条带。国内外一直沿用的硫化碱脱毛工艺对环境污染严重。酶法脱毛则是解决污染问题的可行途径。半个世纪以来人们对此作了积极的研究。然而,可用的产酶株仍是屈指可数,脱毛工艺的革新受到很大限制。为了推进酶法脱毛工艺向前发展,我们选育了脱毛效果较好的枯草芽孢杆菌478中性蛋白酶产生株。本文对该茵的发酵及其产生的中性蛋白酶的一些基木特性作一报导。     

海洋细菌Pseudomonas sp.7-11产碱性蛋白酶的研究

本文研究了海洋细菌Pseudomonas sp.7-11产碱性蛋白酶的发酵条件及调控机制，并对该蛋白酶进行了分离纯化，实验结果显示，7－11为好氧菌，具有某些嗜低温的特性，而且适宜在偏碱性的条件下生长并产酶；酪蛋白培养基适合该菌株产酶；K^＋对产酶起关键作用；复合氨基酸对产酶有抑制作用，发酵液经盐析和离子交换层析等得到了两个活性峰，其中一个峰达到电泳纯，因此该菌产生蛋白酶不止一种。     

培养基成分对海洋假单胞菌7-11产蛋白酶的影响

对海洋假单胞菌7-11(pseudomonas sp.7-11)产蛋白酶进行了培养基的优化,初步确定了促使蛋白酶产率提高的培养基的配方.经过26℃、140r/min、12 h培养,蛋白酶的相对产量可达201.7 IU/mL,比培养基优化前的26.8 IU/mL提高了646%.     

碱性蛋白酶与表面活性剂的协同去污性能研究

建立了一种污布上蛋白质污垢含量的分析方法。研究了碱性蛋白酶Ｓａｖｉｎａｓｅ与四种表面活性剂对蛋白质污后、人工普通污垢及复合污后的脱除性能。     

黑曲霉HD－404酸性蛋白酶若干动力学性质的研究

研究金属离子、ＥＤＴＡ、表面活性剂、碘乙酸等对黑曲霉ＨＤ－４０４酸性蛋白酶活力的影响的结果表明：Ｃｕ２＋、Ｍｎ２＋对酶有明显的激活作用；Ｃｕ２＋、Ｍｎ２＋和Ａｌ３＋同时使用时，产生协同效应，显著提高酶活力；十二烷基磺酸钠（ＳＤＳ）、西湖高效洗洁剂对酶有明显的抑制作用；在以酪蛋白为底物时．ＡｇＮＯ３是酶的不可逆抑制剂．     

环状芽胞杆菌（Bacilluscirculans）的转化和中性蛋白酶基因的表达

用枯草芽胞杆菌质拉载体ｐＮＱ１２２和含有中性蛋白酶基因的重组质粒ｐＭＰＲ８转化环状芽胞杆菌Ｃ－２，转化频率为１．０×１０３转化子／μｇＤＮＡ．含有ｐＭＰＲ８的转化子能在酪蛋白平板上形成清晰的水解圈，其蛋白酶活性与相同质粒转化枯草杆菌ＤＢ１０４所得酶活性相近．Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交结果证实了转化细胞中存在质粒ｐＮＱ１２２和ｐＭＰＲ８，两种质粒在该菌中的稳定性差别很大．