产中性蛋白酶的枯草杆菌478的发酵及其基本特性

枯草芽孢杆菌478是为生皮脱毛选育的一株中性蛋白酶产生茵。500 ml 摇瓶,装量50 ml 培养基,接种一小铲,31℃摇床培养40小时,产酶为5502 u/ml。BF—12—Ⅰ型罐发酵28小时,31℃产酶为5795 u/ml。酶的酪蛋白水解最适 PH 为7.0,活性范围为 PH 6.5～7.5,此间热稳定性较好,40℃两小时失活为12%。酪蛋白水解的最适温度为40～50℃。Fe ~(++)Hg~(++)与 Cu 对酶有抑制作用,Ca~(++)与 Mg~(++)则有激活作用。聚丙烯酰胺凝胶电泳分析得到9条带。国内外一直沿用的硫化碱脱毛工艺对环境污染严重。酶法脱毛则是解决污染问题的可行途径。半个世纪以来人们对此作了积极的研究。然而,可用的产酶株仍是屈指可数,脱毛工艺的革新受到很大限制。为了推进酶法脱毛工艺向前发展,我们选育了脱毛效果较好的枯草芽孢杆菌478中性蛋白酶产生株。本文对该茵的发酵及其产生的中性蛋白酶的一些基木特性作一报导。     

制革用细菌蛋白酶生产菌222-UV90的选育及其应用研究

枯草杆菌222-UV 90是为生皮脱毛选育的一株中性蛋白酶产生菌。其亲株222是从变质的黄豆粉中分离得到。变异株222-UV 90是经NTG和UV诱变育种获得。发酵试验表明:500ml摇瓶装量50ml培养基,接种一小铲,32℃摇床培养40小时,产酶为8081μ/ml;BF-12-1型发酵罐32℃发酵36-38小时,产酶为8453u/ml。酶在PH6.0-8.0较稳定,35～40℃时活性稳定,40℃两小时仅失活16.7％。Ca~╫和Mg~╫对酶有激活作用,Fe~╫、Hg~╫和Cu~╫则有抑制作用。聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳分析得到11条带。酶制剂使用安全无毒。制革脱毛软化应用试验结果表明:该酶用于猪皮正面革脱毛软化效果很好。每克皮用200 Folin单位的酶,38～40℃,pH7～8,1.5～2.0小时脱毛软化同时达到终点。成革质量达灰碱法水平,且可消除制革脱毛过程中硫化物对环境的污染。