链霉菌种间原生质体融合的研究(Ⅱ)——融合子56-2菌株的鉴定

通过金霉素链霉菌和龟裂链霉菌原生质体融合选育出的融合子５６－２菌株，其酯酶同工酶谱与双亲有显著差异，产抗生素能力及遗传稳定性均优于金霉素链霉菌３＃，发酵产物四环素符合中国药典的各项指标，并具有抗噬菌体Ｐ５，Ｐ８的能力。     

双亲灭活原生质体融合技术在苏云金杆菌菌种选育上的应用(Ⅱ)——融合产物的鉴定

在双亲灭活原生质体融合选育苏云金杆菌新菌株的过程中,最终筛选出一株毒力效价较双亲分别提高４１％和１１７％的新菌株３＃。该菌株的酯酶同工酶谱及晶体蛋白多肽均与双亲有显著不同。     

人型结核杆菌H37Pv株菌体特异性的抗原TB4单克隆抗体？…

采用硫酸铵法，辛酸二步法，ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ５０离子交换柱层析法，从杂交瘤小鼠腹水中纯化人型结核杆菌Ｈ３７Ｒｖ株特异性抗原ＴＢ４的单克隆抗体，从回收率、纯度和活性３个方面进行了比较。     

溶液粘度和EcoRI限制性核酸内切酶—P_2-DNA复合物解离的动力学

Eco.RI限制性内切酶像所有球蛋白一样是动力学系统,并且存在着大量的构象底物。酶和底物之间能够发生反应,仅仅在酶蛋白被底物诱导而变构以后,变构能克服起动化学反应的阈值。粘度不仅影响扩散和分子彼此碰撞,而且也影响酶的变构。温度影响溶液粘度,从而也可间接地影响酶的变构。为了证明这种观点,我们在不同粘度和温度条件下,用Eco.RI限制性内切酶切割P_2—DNA,研究了酶——底物复合物催化速度常数的改变。一起考虑来自所有溶液的资料,酶——底物复合物的解离速度常数作为固定粘度下的温度函数和固定温度下的粘度函数被研究。酶——底物复合物的转变速度依赖于溶液粘度,溶液粘度在测定蛋白质动力学状态中起着重要的作用。我们的实验资料表明,最大的催化速度常数Kc值,出现在20%(V/V)的甘油溶液中,在不同温度下,Kc值在高于最适粘度的广大粘度范围内,将随粘度的增加而下降,反之,在低于最适粘度时,Kc值将随粘度的下降而下降。实验结果暗示,EcoRI酶——P_2—DNA复合物解离速度常数值,对于粘度和周围介质产生的酶的调控作用是敏感的。可能的机制将被讨论。     

人型结核杆菌H_(37)Rv株菌体特异性抗原TB4单克隆抗体的纯化

采用硫酸铵法、辛酸二步法、ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ５０ 离子交换柱层析法,从杂交瘤小鼠腹水中纯化人型结核杆菌Ｈ３７Ｒｖ 株特异性抗原ＴＢ４ 的单克隆抗体,从回收率、纯度和活性３ 个方面进行比较。结果显示,硫酸铵法回收率最高,层析法纯度最高,３ 种方法对单抗的活性均无大的影响。认为：辛酸二步法可有效地去除白蛋白,适用于大量腹水中单抗的提取、纯化,具有简单、省时等优点;柱层析法适用于小量腹水单抗纯化及分析用途     

固定化谷氨酸棒杆菌T6-13细胞生产L-谷氨酸

本文比较了海藻酸钙、明胶-戊二醛、聚丙烯酰胺和琼脂包埋法制备固定化细胞的方法。前者较后几种有较大的优越性,是一种较为理想的固定化方法.分析了海藻酸钙法国定化细胞各主要因素对酶活性的影响,确定出制备固定化细胞的最佳条件.观察凝胶珠中细胞及酶活性的变化表明,细胞在凝胶珠中生长良好,有利于谷氨酸生产.固定化细胞发酵谷氨酸的最适 pH 为7. 0～7. 5,最适温度32℃,最适转速140rpm.每批发酵96小时,糖利用率为98%,产酸量达20g/L,比常规游离细胞增加15%.     

内切酶xhoI部分氨基酸残基的化学修饰

限制性核酸内切酶xho I能够被巯基试试剂和修饰赖氨酸、精氨酸残基的试剂抑制,酶的抑制作用遵守假一级动力学,底物λ-DNA对酶的抑制作用有强烈地保护作用,这些资料表明xho Ⅰ含有对酶活性至关重要的必须的赖氨酸残基、精氨酸残基和巯基。     

EcoRI核酸限制性内测酶切割Ad_5-DNA的动力学研究

本文用荧光扫描的技术研究了腺病毒5一型(Ad_5)DNA被EcoRI内切酶切割的动力学。这种技术能够定量地测定在琼脂糖凝胶上经溴乙锭染色的分离DNA片段的荧光强度,而且能根据各片段的荧光强度对切割时间的依赖关系,求得相应切割位点的切割速度。我们发现同一DNA分子上各切割位点的切割速度有着很大的差异,而且总的切割速度和酶—底物复合物的解离速度对酶浓度和温度有着明显的依赖性。切点两侧的碱基成分d(G-C)/d(A-T)比率高,则要求较多的活化能。