小麦幼叶中小G蛋白的粗分离

对小麦幼苗叶片中的蛋白进行了粗提,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测在20.1 KDa～31 KDa间呈现一条蛋白条带,经分析其分子量约为23.1 KDa,占所提取总蛋白的2.93%,推测其为小G蛋白家族中的成员.采用传统的硫酸铵盐析法对此目的蛋白进行粗分离.结果显示,30%的硫酸铵饱和度可将该蛋白分离,且所含杂蛋白量最少,其纯度和得率分别是22.96%和47.3%,是进一步细分离纯化的较好选择.     

菜豆种质盐溶蛋白遗传多态性分析

以39个菜豆品种和1个杂交后代为材料,通过SDS-PAGE技术获得了种子盐溶蛋白的亚基分布电泳图谱,比较了分布差异,并分析了其遗传表现.结果表明：40个供试种质的盐溶蛋白带型差异显著,电泳共分离出27条迁移率不同的条带,其中有4条保守带（均为100%表达）,分子质量分别为99.039、58.267、25.234、15....     

苏云金芽孢杆菌cry1基因的PCR-RFLP鉴定分析

利用PCR—RFLP技术对含有已知cry1基因的8株标准菌株和2株遗传工程菌进行了基因分析，证实了该方法的可行性．并在此基础上鉴定了分离保藏的70株B．t菌株的cry1型基因，结合SDS—PAGE分析以及室内生物测定结果，讨论了基因型与蛋白表达及毒力之间的关系．     

Analysis of the Protein Electrophoresis Patterns of Curvularia Lunata in Maize and Immunological Detection of the Pathogenic Culture

Twelve isolates of Curvularia lunata and six related species from maize or other host plants are examined for the analysis of polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) patterns of their soluble proteins,Differences exist significantly among different species and the same species.There is a special protein band for Curvularia at relative mobility value 0.177(Rf 0.177) and a special protein band for C.lunata at Rf 0.225,Two kinds of rpimary antibodies to C.lunata are used to indirect ELISA and Avidin-Biotion-peroxidase Complex(ABC) immunoassay to evaluate their detecting sensitivity and specificity,The sensitivity of ABC immuno- assay is higher than indirect ELISA.APAbs to C.lunata is special to C.lunata.     

用N-(3-P)NEM标记毛发角蛋白研究毛发中低硫蛋白和高硫蛋白的状态

本文用一种特异性标记蛋白质巯基的N-(3-P)NEM为荧光探针标记毛发角蛋白,经SDS-PAGE后,通过荧光薄层扫描确定N-(3-P)NEM与含巯基蛋白结合的部位。结果表明,毛发角蛋白中的低硫蛋白分子量在45,000～63,000范围,约占总蛋白量的49.6％～68.2％;高硫蛋白分子量在4,000～20,000范围,约占总蛋白量的18.9％～36.2％。除低硫和高硫蛋白以外,毛发角蛋白中还可能存在一种极低硫蛋白,分子量位于22,000～32,000范围。对人与5种动物的毛发角蛋白组分进行比较,证实人与动物的毛发角蛋白的主要差异在高硫蛋白,不同种属的动物毛发角蛋白中低硫蛋白和高硫蛋白的含量也不相同。作者认为毛发角蛋白中含巯基蛋白的差异可为动物分类学和法医学在进行毛发比较鉴别方面提供新的重要信息。     

野生二粒小麦高分子量谷蛋白亚基组成的多态性研究

对来自以色列的38份野生二粒小麦的高分子量谷蛋白亚基(high molecular weight glutenin subunits,HMW-GS)组成进行SDS-PAGE检测,发现其HMW-GS具有较高的遗传多样性.在Glu-A1和Glu-B1位点共有18种可确定的亚基变异类型.其中,A1位点上的亚基1、2*(出现频率分别为60.53%和13.16%)和B1位点上的亚基13+16、14+15与17+18为优质亚基(出现频率分别为26.32%、7.89%和2.63%).同时出现了许多普通小麦所稀有或缺乏的特异亚基类型,如6+8*,7*+9,6+9*,7+9*,20,22等,在2份材料中出现了1种未命名的新亚基类型.     

野生大豆DNA导入小麦及RAPD分子验证

利用花粉管通道法将野生大豆总DNA导入小麦，以期获得变异系小麦．对小麦球蛋白的SDS—PAGE，印迹表明，冬小麦T2l6#产生了新的蛋白亚基，其分子量为78kD，而有的变异品系一些蛋白亚基消失了；凯氏定氮法和氨基酸分析表明小麦后代T216#的总蛋白含量增加，其氨基酸组成，尤其是赖氨酸含量明显提高．RAPD分析结果表明，新品系基因组出现多态性，并具有供体特异性DNA带，这些变异现象表明该小麦品系为转基因后代．本实验为选育高蛋白、优质的新小麦品种提供了途径．     

适用于我国小麦品质育种的SDS—PAGE方法

本文根据多年来实验室工作的经验，采用国产的仪器设备和药品，提出了在182mm×95mm的凝胶上，一次可装载100个样品，每次点样只需1．5－2μl，用于HMW麦谷蛋白亚基分析的SDS—PAGE方法。该方法具有分辨率高，经济性好，简单易行的特点。特别适于小麦育种计划中对大量品系进行HMW麦谷蛋白亚基分析及利用“半粒法”进行HMW麦谷蛋白亚基分析。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳——曙红Y染色法

十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳已广泛用于分子生物学和医学临床等领域,但该技术的染色方法多沿用考马斯亮蓝和银染色,这两种方法均有其局限性,如蛋白凝胶染色前须经酸或醛固定,不易洗脱且操作繁琐,脱色耗时等。而曙红Y染色具有检测灵敏度高,操作简便,染色时间短,可对各种蛋白质染色,染色后的蛋白质可直接进行电泳转移印迹,也可将凝胶中蛋白质电泳转移后染色。染色后的蛋白质仍具有抗原性。此外,还具有试剂便宜,使用安全,便于推广应用等优点。     

小麦谷蛋白亚基的快速提取分离及SDS-PAGE分析

用70％乙醇和50％异丙醇除去醇溶蛋白，以二硫苏糖醇(DTT)为还原剂，在50％异丙醇，0．08mol／L Tris-HCl(pH为8．0)缓冲液中提取总麦谷蛋白亚基，加入丙酮至浓度为40％时，高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)沉淀析出；继续加入丙酮至80％时，析出低分子量麦谷蛋白亚基(LMW-GS)．在3．3％浓缩胶和10％分离胶的不连续体系中进行SDSPAGE电泳，结果表明，该方法可以有效地除去醇溶蛋白对麦谷蛋白亚基电泳分析的背景干扰，HMW-GS和IMW-GS的提取、分离一步完成，操作简便，时间短，对大量小麦样品的HMW-GS和LMW-GS可以快速分离、提纯和鉴定．