马桑叶中黄酮类化合物的生物活性研究

探讨马桑叶中6种黄酮类化合物的体外抗氧化作用及对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,通过测定其体外抑制红细胞溶血时间研究其抗氧化性.采用MTT法,测定了协同ConA对小鼠T淋巴细胞增殖的抑制作用,并测定了协同LPS对小鼠B淋巴细胞增殖的抑制作用.结果表明,这6种黄酮类化合物对AAPH诱导红细胞溶血有很好的抑制作用,其中效果最好的是槲皮素,槲皮素的糖苷强于山奈酚的糖苷;能协同ConA对小鼠T淋巴细胞增殖产生抑制作用,效果最好的是山奈酚-3-O-β-D-半乳糖(K-Gal)和山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖(K-Glu);能协同LPS对小鼠B淋巴细胞增殖产生抑制作用,效果最好的是槲皮素3-O-α-L-阿拉伯糖(Q-Ara)和槲皮素(Q).     

尖顶羊肚菌菌丝体胞外多糖的分离纯化及结构研究

用乙醇沉淀、Sevag法除蛋白等方法得到羊肚菌菌丝体胞外粗多糖,并进一步通过离子交换色谱、分子筛色谱对粗多糖进行分离纯化,得到单一多糖组分MEP3A.经外光谱法、紫外光谱法、核磁共振法等仪器分析方法确定该多糖组分结构为直链→6)-α-D-Man p-(1→,分子量81.2 kDa,不含蛋白质、多肽和氨基酸.采用MTT法检测表明,该多糖组分可促进小鼠脾淋巴细胞增殖,具有免疫调节活性.     

C_2-神经酰胺对小鼠T淋巴细胞体外活化和增殖的影响

目的:研究C2-神经酰胺(C2-cer)对小鼠T细胞体外活化和增殖的影响,并对其免疫调节作用进行初步探讨.方法:分离小鼠淋巴结细胞,加入刀豆蛋白A(ConA)或佛波醇酯(PMA)和离子霉索(Ion)进行刺激,以不同终浓度的C2-cer与T细胞共培养.流式细胞术结合双色荧光抗体染色,检测T细胞早期活化抗原CD69的表达;用羧基荧光素双醋酸盐琥珀酰(CFDA-SE)染色结合流式细胞术,并用ModFit软件分析T细胞增殖相关指数.结果:终浓度为25、50和75 μmol/L的C2-cer可以显著抑制ConA诱导的T细胞CD69的表达,由ConA组的(60.13±1.18)%,分别降低为(54.56±1.14)%、(48.73±1.26)%和(27.09±1.07)%(P＜0.01);CFDA-SE染色结果显示,各浓度C2-cer对ConA诱导的小鼠淋巴细胞增殖,具有明显的抑制作用,增殖指数(PI)由ConA组的(1.81±0.25),分别降低为(1.46±0.01)、(1.25±0.04)和(1.18±0.03)(P＜0.05);各浓度C2-cer均可明显抑制PMA+Ion诱导的小鼠淋巴细胞增殖,增殖指数(PI)由PMA+Ion组的(1.47±0.01),分别降低为(1.27±0.01)、(1.11±0.01)和(1.05±0.01)(P＜0.05).结论:C2-cer能有效地抑制小鼠T细胞的体外活化和增殖.     

新生牛肝中低分子抑瘤物体内抑瘤作用的研究

采用离子交换柱分离分子量小于1.0 kD的新生牛肝提取液,得到9份样品.在体外抑制肿瘤细胞增殖的基础上,选用体外抑瘤明显的离子交换柱层析获得的〈5〉组分进行体内对荷S-180肉瘤小鼠的肉瘤生长抑制实验.并从白细胞数、胸腺指数和脾指数三个角度分析了低分子抑瘤物对荷瘤小鼠免疫功能的影响;同时用斑点印记法,比较荷瘤前后重要脏器和肉瘤细胞内p27/k ip1细胞周期调控蛋白表达水平的变化.实验结果表明低分子新生牛肝提取液和经离子交换柱层析分离得到的〈5〉组分对荷S-180肉瘤小鼠的肉瘤生长有明显的抑制作用,实验同时发现来源于新生牛肝中的低分子抑瘤物,可通过增强荷瘤小鼠的免疫力,升高肉瘤细胞中的p27/k ip1蛋白表达水平的方式抑制肉瘤细胞的增殖,阻碍瘤细胞向正常组织的浸润和转移.     

红褐林蚁多肽的免疫活性及镇痛、抗感染作用

对红褐林蚁的多肽蛋白质进行了分离和制备,并对其免疫活性、镇痛及抗感染作用进行了研究.红褐林蚁水提物经SephadexG-50凝胶过滤层析分离得到组分Ⅰ和组分Ⅱ,经紫外检测均为蛋白质;每个组分经反相高效液相色谱分离和制备,组分Ⅰ得到a,b,c3个组分,其中组分a含量最高;组分Ⅱ得到d,e,f3个组分,其中组分e含量最高.淋巴细胞转化试验结果显示:组分a和组分e能抑制淋巴细胞增殖,表明其具有免疫活性;热板法所致小鼠痛阈值的变化和二甲苯诱发小鼠耳肿胀试验显示:红褐林蚁多肽试剂具有镇痛和抗感染作用.     

红车轴草提取物对小鼠T淋巴细胞体外活化与增殖的影响

目的:探讨红车轴草提取物(Trifoliumpratense Leguminosaeextract,TLE)对小鼠T淋巴细胞的体外活化和增殖的影响.方法:MTT比色法检测TLE对细胞的毒副作用及增殖抑制情况;双色荧光抗体染色结合流式细胞术分析TLE对小鼠T淋巴细胞在多克隆刺激剂(ConA)刺激下体外活化抗原CD69表达的影响;羧基荧光素乙酰乙酸(carboxyfluorescein diacetate,succinimidyl ester,CFDA-SE)标记技术结合流式细胞术,分析CD3 T淋巴细胞增殖相关指数.结果:TLE对小鼠淋巴结来源的淋巴细胞微毒副作用;终质量浓度为10、20、30、40 mg/L的TLE对ConA刺激下的T淋巴细胞体外活化抗原CD69表达具有明显的抑制作用(P＜001),40 mg/L抑制达到峰值;MTT法和CFDA-SE染色法都显示,10、20、30、40 mg/L TLE对ConA诱导的T淋巴细胞增殖具有显著的抑制作用(P＜001).     

猪白细胞介素-6基因的原核表达及其活性研究

用DNA重组技术，将已克隆的猪IL－6 cDNA片段插入pGEX-1λT质粒，转化大肠杆菌，以BamHI和Pst I酶切鉴定重组子，以IPTG诱导融合蛋白表达，并作RT－PCR及SDS－PAGE分析表达情况，从聚丙烯酰胺制备凝胶中回收融合蛋白，用MTT法测定重组蛋白刺激小鼠脾淋巴母细胞增殖反应的活性，并免疫家兔制备高免血清，得到高效表达猪IL－6的质粒pGPIL-6,RT-PCR确证pGPIL-6在大肠杆菌中能正确转录，经SDS－PAGE分析表达蛋白分子量为49kD，融合蛋白具有较高的促小鼠淋巴细胞增殖反应活性，以此免疫家兔，可制备滴度为1：128 000的兔高免血清。     

吉林人参低聚肽的免疫调节作用

 为研究吉林人参低聚肽(GOP)对小鼠的免疫调节作用, 选取280 只SPF 级雌性BALB/c 小鼠, 随机分为7 组:空白对照组、乳清蛋白组(150 mg/kg)及5 个GOP 组(37.5、75、150、300、600 mg/kg)。连续灌胃30 d 后, 进行免疫7 项实验测定, 观察GOP 对小鼠免疫器官相对重量、细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能和NK 细胞活性的影响。结果表明:GOP 显著提高了ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力、迟发型变态反应能力、抗体生成细胞数、小鼠碳廓清指数、巨噬细胞吞噬率和吞噬指数、NK 细胞活性(P<0.05), 且效果优于乳清蛋白。由此可知, GOP 可以通过增强细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞吞噬能力和NK 细胞活性, 起到增强免疫力的作用。     

思茅藤不同极性部分化学成分分析及其免疫抑制活性

探究了思茅藤提取物不同极性部分的主要化学成分及其免疫抑制活性情况,并对其可能的活性机制进行初步探讨.利用D101大孔吸附树脂对思茅藤提取物不同极性部分进行划分,采用超高效液相色谱-高分辨质谱联用技术(UHPLC-MS/MS)分析各提取物的主要化学成分,并建立刀豆蛋白A(Con A)和脂多糖(LPS)刺激的小鼠脾淋巴细胞模型,通过测定不同极性部分的思茅藤提取物对小鼠脾淋巴细胞增殖及相关细胞因子分泌的影响评价其免疫抑制活性.结果显示,思茅藤提取物Fr.20%～40%段的化学成分主要为酚类物质,而Fr.80%～100%段富含以甾体类化合物为主的成分.Fr.100%部分能有效的减少Con A刺激的过量炎症因子的产生,显示出最强的免疫抑制活性,且该抑制效果主要发生在G0/G1期.     

亮菌多糖对S180荷瘤小鼠免疫功能的研究

通过对荷瘤小鼠腹腔注射亮菌多糖后，观察其对荷瘤小鼠淋巴细胞增殖反应、NK细胞活性及对IL-1、IL-2、TNF-α、IFN-γ诱生的影响.研究结果表明：亮菌多糖能够显著提高荷瘤小鼠NK细胞杀伤活性、对ConA刺激的小鼠淋巴细胞有明显的促进作用，提高荷瘤小鼠脾细胞产生IL-2的能力；促进荷瘤小鼠机体细胞分泌TNF-α；明显提高荷瘤小鼠血清中IFN-γ的含量.提示亮菌多糖可通过调节机体免疫功能而间接起到抗肿瘤的作用.     

Effect of enzymatic fish frame protein hydrolysate on freeze-induced denaturation of myofibrillar protein from bighead carp fish （Aristichthys nobilis ） during frozen storage

Three kinds offish frame protein hydrolysates （PPH, APH and FPH） were prepared from fish frame of red drum （ Sciaenops ocellatus ） by papain, alkaline proteinase and flavorzyme treatment. The hydrolysates were mainly composed of peptide （83.5 % -84.6% ） and displayed different molecular weight distribution pattern. The protective effects of hydrolysates on the freeze-induced denaturation of myofibrillar protein （Mf） from bighead carp （Aristichthys nobilis） mince during storage at -20℃ for 12 weeks were investigated. The hydrolysate （5 % dried weight/wet weight） reduced the freeze-induced denaturation of Mf as evidenced by the lowered decrease in Ca-ATPase activity and reactive sulfllydryl contents as well as the impeded increase in surface hydrophobicity. Microscopic photographs indicated that the hydrolysates inhibited the growth of ice crystal in fish mince, and then prevented the aggregation of Mf during frozen storage. The protective effects of hydrolysates on freeze-induced denaturation of Mf were influenced by the molecular weight distribution. PPH had strongest cryoprotective ability among three hydrolysates.     

双子表面活性剂与原油组分相互作用研究

针对五里湾油田长6油藏地层水和脱水原油特征,双子表面活性剂A2可以实现超低界面张力。为了探索双子表面活性剂与原油组分间的构效关系,采用原油柱色谱分离方法对原油各组分进行了分离,获知了原油的基本组成;并对双子表面活性剂A2与原油各组分之间的界面张力进行了测定。结果表明,该表活剂在0.5~0.02%的浓度范围内均具有高的界面活性,可以令原油实现超低界面张力,证实了原油中非烃组分对超低界面张力的产生具有至关重要的作用;即双子表活剂与非烃组分之间存在协同效应。     

皮蛋模拟胃肠道消化物对HepG2细胞的影响

皮蛋是中国传统食品,其水解物具有抗氧化、抗炎和抗癌等功效,具有良好的医学前景,但目前皮蛋发挥抗癌功效的途径及作用机制尚不清楚。探究了皮蛋模拟胃肠道消化物(preserved eggs simulated gastrointestinal digests,PESD)对人肝癌HepG2细胞增殖和细胞周期的影响。将皮蛋经体外模拟胃肠道消化处理后,进行细胞实验,用CCK-8法进行细胞增殖分析,研究PESD对HepG2细胞存活率的影响,采用碘化丙啶(propidium iodide, PI)染色标记的方法,通过流式细胞术测定PESD对HepG2细胞周期的影响,用western blot法测定细胞周期相关调控蛋白的表达。研究发现:PESD以剂量依赖性方式对HepG2细胞增殖进行抑制,IC₅₀为4.17mg/mL;PESD处理显著增加了S期细胞的占比(P<0.05),使HepG2细胞阻滞于S期;4mg/mL的PESD处理HepG2细胞24h后,细胞中cyclin A、cyclin E、ATM、chk2和CDC25A的蛋白表达水平上升(P<0.05),而CDK2蛋白表达水平下降(P<0.05)。研究认为,皮蛋模拟胃肠道消化物是以剂量依赖性的方式来抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,主要是通过ATM-chk2-CDC25A信号通路,上调cyclin A和cyclin E蛋白的表达,下调CDK2蛋白的表达来实现人肝癌HepG2细胞阻滞于S期,影响人肝癌HepG2细胞周期进程,抑制癌细胞的增殖。研究结果旨在为皮蛋抗癌作用机制的阐明提供一定的理论基础。     

非蛋白氨基酸的功能和药物作用研究进展

本文介绍了非蛋白氨基酸作为含氮物质的前身，细菌细胞壁的成分、储能、充当神经递质和形成跨膜离子能道等基本功能，对非蛋白氨基酸在抗癌、抗菌、抗坏血病等方面的药物作用着重进行了介绍。     

抗CD71人-鼠嵌合抗体的制备及其诱导肿瘤细胞凋亡

目的 :研究在液氮中冻存 2年的转染瘤细胞株 (D2C)复苏后其分泌抗CD71人 -鼠嵌合抗体的特异性、分泌量及诱导肿瘤细胞凋亡的效应。方法 :用ELISA方法检测转染瘤细胞培养上清的抗体分泌量。经DEAE SephadexA 5 0离子交换法纯化产生的抗体 ,并采用SDS PAGE电泳鉴定 ;台盼蓝拒染法观察其对K5 6 2细胞生存的影响 ;细胞计数和MTT试验测定嵌合抗体及鼠源性抗体对K5 6 2细胞的作用 ;琼脂糖凝胶电泳和透射电镜观察K5 6 2细胞凋亡。结果 :Balb/c裸鼠腹腔接种转染瘤细胞后 ,每只裸鼠腹水量在 3～ 5mL。抗体经纯化 ,产量约为 1～ 2mg/mL腹水。经SDS PAGE电泳鉴定 ,在分子量 5 5kD和 2 7kD处 ,可见有抗体IgG重链和轻链的染色条带。抗CD71嵌合抗体及鼠源性抗CD71抗体均可抑制K5 6 2细胞的增殖作用 ,且二者抑制作用无显著性差异 (P >0 .0 5 )。经琼脂糖凝胶电泳和透射电镜观察分别可见抗体诱导的K5 6 2细胞DNA梯形条带和细胞凋亡的形态改变。结论 :液氮中冻存 2年的转染瘤细胞体外生长良好 ,抗体分泌稳定 ,特异性高 ,并可诱导K5 6 2人红白血病细胞凋亡     

Multiple Suppressive Effects of a Protein from Caesalpinia minax on Murine Melanoma Cells

IntroductionIn recent years,a great deal of attention hasfocused on finding potential anti- tumor agentsfrom natural sources[14 ] .A vast number ofpromising candidate molecules,especiallycomponents extracted from plants,have beenevaluated[59] .　 Herbs have a long history of use as Chinesetraditional medicine.Caesalpinia minax (C.minax) is a wild plantin Yunnan Province,China.The high level of ultraviolet radiation in thistropical province causes widespread skin diseases inthis area.Extract…     

不同品种洋葱粉营养成分分析

为选择洋葱加工专用品种,试验以山东省8个主栽品种的洋葱粉为原料,采用国标分析其营养组分.结果表明：除灰分外,不同品种洋葱粉营养成分包括总糖、蛋白质、粗纤维等,都具有显著差异（P〈0.05）,总糖含量最高,其次为蛋白质、粗脂肪、粗纤维、灰分,类黄酮质量比在76.13-556.63 mg/100 g之间.洋葱中水解氨基酸质量分数在8.54%-15.31%之间.矿物质中以K含量最高,其次为P、Ca、Mg、Na,而Fe含量几乎为零.白洋葱2和红A5可作为加工专用品种,其中白洋葱2适合作为提取洋葱油、洋葱多糖的原料,红A5可作为饲料添加剂.     

短小芽孢杆菌JK-SX001非蛋白抗菌物质研究

为探讨短小芽孢杆菌JK-SX001菌株非蛋白抗菌物质对杨树溃疡病的作用机制,研究了该菌株非蛋白抗菌物质的提取方法及抗菌物质对金黄壳囊孢(Cytospora chrysosperma)、拟茎点霉(Phomopsis macrospora)和七叶树壳梭孢(Fusicoccum aesculi)真菌菌丝及分生孢子的抑制机制,同时对其部分理化性质进行了测定。结果表明,JK-SX001菌株产生的非蛋白抗菌物质能强烈抑制病原真菌菌丝生长和分生孢子萌发,且能使分生孢子溶解。光照、温度对抗菌物质影响较小,而有效存储期对抗菌物质影响相对较大。     

超高压对蓝蛤酶解液风味及其蛋白质结构的影响

以蓝蛤为原料,研究了经超高压处理后蓝蛤酶解液中游离氨基酸、核苷酸和有机酸等含量的变化,同时分析了挥发性风味物质、蛋白质结构和外源添加酶活性的变化。结果表明:超高压处理对风味蛋白酶和复合风味蛋白酶有激活作用,且对风味蛋白酶激活作用更强;超高压处理蓝蛤酶解液中游离氨基酸、琥珀酸及味精当量高于常压处理的酶解液;超高压处理酶解液鲜味及整体滋味更好,主要挥发性物质种类和含量增加,不良风味物质种类和含量减少,改变了其挥发性物质的组成,从而达到增香的作用。超高压能破坏蛋白质结构,促进了呈味氨基酸的释放,改善了酶解液的风味,提高了蛋白质利用率。超高压处理是通过提高蛋白酶活性特别是风味蛋白酶活性,破坏蛋白质结构,从而增加了蛋白质水解度,促进了呈味氨基酸、核苷酸、有机酸等的释放,改善了酶解液的风味。     

2个海域野生三疣梭子蟹肌肉中营养成分比较

通过分析比较2个不同海域野生三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)肌肉的营养成分,对其营养价值进行综合评价。采用国家标准方法测定肌肉中的水分、灰分、粗蛋白、粗脂肪、脂肪酸、氨基酸、矿物质元素、核苷酸、甜菜碱和胆固醇,根据联合国粮农组织(FAO)标准进行营养品质评价,并针对营养组成、风味物质含量同产地之间的关联进行对比分析。结果表明:2个不同海域的三疣梭子蟹在蛋白质、氨基酸、核苷酸、甜菜碱等营养组成上差异显著。浙江台州海域野生雄蟹肌肉蛋白质含量、必需氨基酸含量和总氨基酸含量均高于山东日照海域野生雄蟹,差异显著(P＜0.05);浙江台州海域野生三疣梭子蟹肌肉中肌苷酸含量、甜菜碱含量均显著高于山东日照海域(P＜0.05)。研究发现,2个海域野生三疣梭子蟹肌肉中营养成分含量存在一定差异,并对其风味及营养价值产生影响,可能与环境因素、遗传基因、摄食饵料等因素有关。