野木瓜水溶性多糖的提取、分离及结构分析

采用纤维素酶法从野木瓜中提取水溶性粗多糖,通过正交试验确定了最佳提取条件:提取温度50 ℃,pH 4.0,提取时间2.5 h,酶用量50 U/g.粗多糖经蛋白酶与Sevage法相结合脱蛋白、大孔树脂脱色及水浴透析,得到野木瓜水溶性精多糖CCP,再经DEAE-纤维素阴离子交换层析柱,得一种主要洗脱组分CCP1.纸层析和Sepharose Cl- 6B色谱柱分析表明CCP1为多糖纯品,苯酚-硫酸比色法测得该多糖的糖含量为97.3%,紫外光谱分析未见蛋白质(280 nm)与核酸(260 nm)的特征吸收峰,红外光谱分析发现典型多糖吸收峰.结果表明,CCP1是初次从该植物中提取分离出来的新的均一多糖组分.     

野木瓜水溶性多糖的提取分离及鉴定

本文对纤维素酶法从野木瓜中提取水溶性粗多糖的工艺进行系统的研究,通过正交试验确定了最佳酶法提取条件：提取温度50℃,pH值4.0,提取时间2.5h, 酶用量3%。粗多糖经蛋白酶与Sevage法相结合脱蛋白、大孔树脂脱色及水浴透析,得到野木瓜水溶性精多糖CCP, 再经DEAE-纤维素阴离子交换层析柱,得一种洗脱组分CCP1。纸层析和Sepharose Cl-6B色谱柱分析表明CCP1为多糖纯品;用苯酚-硫酸比色法测定该多糖的糖含量为97.3%;紫外光谱分析未见蛋白质（280nm）与核酸（260nm）的特征吸收峰;红外光谱分析具有典型多糖吸收峰。结果表明,CCP1是初次从该植物中提取分离出来新的均一多糖组分。     

肉苁蓉茎水溶性多糖SPA的分离纯化与鉴定

从野生肉苁蓉的茎中分离出水溶性粗多糖.粗多糖经Sevage法脱蛋白、反复冻融、高速离心、超滤分级,得级分SPA.经高压液相色谱等方法证明SPA为均一组分,气相色谱分析,SPA的单糖组成为Ara, Rha,Man,Gal, Glc,摩尔比依次为1.83∶1.00∶3.06∶4.56∶14.74.以上结果表明多糖SPA是以葡萄糖和半乳糖为主兼有阿拉伯糖、鼠李糖和甘露糖的中性杂多糖.     

酶法提取百合多糖及其体外抗氧化活性

研究了热水法及复合酶法提取百合多糖（LBP）的最佳条件, 对两种方法得到的多 糖的生物活性进行了比较分析. 发现复合酶法能显著提高百合多糖的提取率, 可达31.03% , 是热水法的2.85倍. 复合酶法提取的多糖在体外抗氧化活性如对O^－₂ ·及·OH的抑制作用、 对H₂O₂诱导的人血红细胞氧化溶血 的抑制作用及人红细胞膜脂质过氧化的抑制作用均显著高于热水法提取的多糖. 经Sephadex G-75柱层析对粗多糖进行分离, 得到3种组分, 其中活性组分LBP-3主要存在于酶法提取 的多糖中, 测得该活性组分的分子量为13 400.     

鸡腿菇子实体多糖分离纯化和光谱分析

从鸡腿菇子实体中提取纯化多糖,鉴定其纯度并测定其结构.利用水浴浸提、乙醇沉淀多糖、TCA法去除蛋白质等工艺提取粗多糖;将得到的粗多糖通过DEAE-52柱层析和Sephadex G-200柱层析进行分离纯化,收集得到4个糖组分Ccp-Ⅰ-A、Ccp-Ⅰ-B、Ccp-Ⅱ-C和Ccp-Ⅱ-D;采用紫外分光光度计、红外光谱仪对多糖结构进行初步的光谱分析.     

桑叶多糖SDS-1和SDT-1的系统分离纯化

对桑叶水提取的粗多糖在离子交换纤维素上的吸附量进行了考察,然后利用离子交换纤维素柱色谱将粗多糖分为4个电荷性质不同的亚组分SD0、SD0.1、SD0.2、SD0.3。通过桑叶粗多糖在离子交换纤维素的吸附解吸行为可知,桑叶多糖主要以酸性多糖的形式存在。其中主要组分SD0.2进一步采用Sephacryl S-200凝胶介质进行纯化,采用苯酚-硫酸法和高效凝胶过滤色谱法同时进行检测,得到均一多糖SDS-1和SDT-1。SDS-1的Mw=8.9×104,Mn=7.5×104,分散度D=1.18;SDT-1的Mw=1.54×104,Mn=1.42×104,D=1.08。     

莪术多糖的分离纯化

研究莪术多糖分离纯化的最佳条件,优化莪术多糖的提取纯化工艺,为进一步探讨莪术多糖的生物活性奠定基础.莪术经热水提取,酒精沉淀,脱色,脱蛋白得粗多糖.粗多糖用50%、75%乙醇分级沉淀得2个级分CZ1、CZ2,进行DEAE-纤维素柱层析.调节DEAE-纤维素的pH值,比较洗脱曲线的不同.CZ1经DEAE-纤维素柱层析得到1个组分,CZ2在酸性、中性条件下层析得2个组分,在碱性条件下得1个组分,随pH升高,回收率降低,纯度增高.各纯化得到的多糖组分经纸层析、琼脂糖凝胶电泳鉴定为单一成分.实验证明,pH是影响层析的一个重要因素,因此莪术多糖的最佳纯化pH值为7.0.     

牛舌菌(Fistulina hepatica)水溶性多糖FHP-2P的分离与理化特征

牛舌菌(Fistulinahepatica)子实体经热水抽提,乙醇沉淀,蛋白酶法和Sevag法去蛋白后得粗多糖FHP.FHP经DEAE-纤维素和SephadexG-200柱进一步纯化得到牛舌菌多糖纯品FHP-2P.经测定该多糖为均一组分,相对分子质量为7.6×104.红外扫描呈现出典型的多糖吸收峰,并含有β-型糖苷连接键;紫外扫描无核酸和蛋白质的特征吸收峰.纸层析和气相色谱分析结果表明FHP-2P的单糖组成为D-葡萄糖、D-甘露糖、D-半乳糖和D-木糖,其摩尔比为13.9∶2.85∶3.25∶0.48.     

蜜环菌胞外多糖的分离纯化及其性质研究

从蜜环菌发酵液提取粗多糖,经分离纯化得到多糖-A和多糖-B两个组分,快速纯化系统(FPLC)和电泳法鉴定各自为均一的组分。FPLC法测定A组分的分子量分别为2.0×105,苯酚-硫酸法测得其总糖含量为86.6%,考马斯亮蓝法测其蛋白含量为12.92%,硫酸-咔唑法测其酸性多糖含量为28%,红外光谱呈现多糖吸收特征峰,含有吡喃糖苷键。β-消去反应初步证明所提取的多糖-A存在O-糖肽键。     

绞股蓝多糖脱蛋白工艺及相对分子质量的测定

采用Sevag法、木瓜蛋白酶-Sevag法、TCA-Sevag法对绞股蓝粗多糖脱蛋白工艺进行研究.通过DEAE—52纤维素柱层析和葡聚糖凝胶G—200柱层析对粗多糖进行分离纯化,采用高效液相色谱分析法对精制多糖GPM—21的相对分子质量进行测定分析.结果表明:木瓜蛋白酶-Sevag法效果最佳,蛋白脱除率高且多糖损失量小,累计蛋白脱除率可达63.08%,多糖保留率为77.34%.液相渗透色谱法测定GPM—21的相对分子质量为200 576.     

蛹虫草多糖分离纯化及性质的研究

以蛹虫草菌丝体粗多糖为材料进行分离纯化及性质的研究.提取液浓缩用3倍体积乙醇沉淀,等电点Sevag法除蛋白,10%H2O2脱色,得到的粗多糖经DEAE-DE52纤维素柱层析,用0～0.2mol/L的NaCl洗脱,可以得到未完全分离的多糖.将此多糖经Sephadex-G200柱层析,用蒸馏水洗脱.将多糖用Sepharose CL-6B柱层析进行纯度鉴定,经验证是单一多糖.对多糖进行纸层析,证明组分是D-葡萄糖和D-半乳糖.用高效液相色谱法测定多糖分子质量为3.76×104ku.以昆明种小鼠对多糖进行生物活性研究,多糖对小鼠S180肉瘤抑制率达到71.92%.     

青龙衣多糖的提取及单糖组分和质量分数测定

提取青龙衣多糖,经纯化后,分析其单糖组分并测定其总糖质量分数.水提醇沉法提取粗多糖,酸性条件下离心脱色,Sevage法除蛋白,H2O2脱结合色素,高效毛细管电泳(HPCE)测定单糖组成,苯酚-硫酸法测定质量分数.青龙衣粗多糖提取率为38.07%,精制多糖为76.08%;主要单糖组分为半乳糖(Gal)、葡萄糖(G lu)、阿拉伯糖(Ara)、鼠李糖(Rha)、果糖(Fru),其百分比分别为42.998%、23.30%、16.03%、10.123%、7.549%.高效毛细管电泳分离度高,可用于单糖组分定量、定性分析;苯酚-硫酸法实验操作简便,准确可靠,可用于青龙衣多糖质量分数的测定.     

野西瓜多糖分离纯化及其质量浓度研究

研究了野西瓜多糖分离纯化、质量浓度及分子质量.通过木瓜蛋白酶-Sevag法脱除蛋白,采用双氧水及透析法除去色素及小分子,利用分步醇沉法得到质量最大的CSPSⅠ,并对其进行DEAE-52柱层析,进而得到糖质量浓度最高的组分CSPSⅠC.纯度鉴定确认CSPSⅠC为高纯度多糖.对CSPSⅠC糖质量浓度、糖醛酸、硫酸基质量浓度进行测定并考察了其方法学,证实得到的结果准确可靠.采用高效液相色谱得到了CSPSⅠC的相对分子质量.通过对野西瓜多糖分离纯化及质量浓度测定为继续深入研究野西瓜多糖奠定了基础.     

灰树花胞外多糖的分离纯化及免疫调节作用

通过对灰树花(Grifola frondosa)深层发酵的胞外多糖(EXGFP)进行分离纯化,研究其性质和免疫活性.灰树花胞外粗多糖经醇沉、酶–sevag脱蛋白和Sephadex G-100色谱柱分离得到纯化组分EXGFP-A.通过Sepharose 4B凝胶柱法和HPLC法鉴定EXGFP-A的纯度,结果表明EXGFP-A是均一多糖组分,纯度为92.68%,.理化性质实验结果表明,EXGFP-A是一种非淀粉类、不含糖醛酸及多酚类物质,含有α–D–葡萄糖苷键和吡喃糖环的中性多糖.MTT实验表明,当EXGFP-A质量浓度为80,μg/m L、作用48,h时,小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞增殖指数达到最大值,为137.5%,.吞噬活性实验结果证实EXGFP-A能够提高RAW264.7细胞对中性红的吞噬能力,扫描电子显微镜结果发现RAW264.7细胞经过EXGFP-A处理后,细胞表现出了明显的活化特征.     

紫菜多糖的提取及抗流感病毒活性研究

采用4种方法提取坛紫菜多糖,其中综合法提取率高达16.58%.气相色谱及化学分析表明其单糖主要由半乳糖、3,6-内醚-L-半乳糖、甘露糖和少量木糖组成.可溶性多糖经DEAE-23柱层析进一步纯化,得到蒸馏水洗脱组分———中性多糖和1.0-2.0mol LNaCl梯度洗脱组分———酸性多糖,各占4.12%和95.88%.酸性多糖经硫酸降解和超滤膜分离得到多糖组分F1(350030000),二者比例为4∶1.鸡胚实验表明,紫菜多糖具有抗甲1型流感病毒活性,且F1>F2>中性多糖.     

甘薯多糖SPP-Ⅰ的制备与结构初步研究

研究采用水提醇沉法提取甘薯粗多糖,进行单因素试验考察,用正交法优化工艺.再经DEAE-纤维素-52阴离子交换柱和Sephadex G200凝胶柱对所得粗多糖进行层析纯化,得到甘薯多糖组分SPP-Ⅰ.应用苯酚硫酸法测定多糖百分含量,HPLC法测定多糖分子质量,紫外光谱、红外光谱、甲基化衍生结合GC-MS分析多糖结构.结果表明甘薯多糖最优提取工艺为提取温度90℃,提取时间3 h,液料比40∶1,提取次数3次.甘薯多糖SPP-Ⅰ总糖百分含量分别为97. 61%,分子质量为245ku,紫外光谱扫描结果显示无核酸和蛋白质吸收峰,红外光谱扫描结果表明含有多糖类物质的特征吸收峰,结合甲基化和GC-MS分析初步确定甘薯多糖SPP-Ⅰ是具有1→3、1→3→6糖苷键结构的α-葡聚糖.     

紫芝多糖的纯化及组分分析

紫芝（Ganoderma Sinense)多糖是紫芝抗肿瘤的主要成分，不同浓缩方法对多糖提取率及结构有较大影响。以超滤法浓缩为最佳，三氯乙酸法除蛋白比常用的Sevage法效果更好，利用DEAE纤维素离子交换层析和SephadexG－100凝胶层析对粗多糖多离纯化得到5种不同的多糖组分PW1，PW2，PJ，PW3，PS，并对各组分的组成，分子量和解性进行了测定。     

小远志多糖的提取及纯化

微波辐射下经水提取得到小远志粗多糖(提取率4.86%),经过脱蛋白、二乙氨基乙基纤维素(DEAE-52)离子交换和Sephadex G-200凝胶色谱法分离得到两个主要组分PP-1和PP-2,纸层析、HPLC、比旋光度法证明两者均为均一组分,经凝胶层析法测得两者的相对分子质量分别为40 800和97 300.     

铁皮石斛多糖的分离纯化及其结构研究

采用DEAE-52阴离子交换柱色谱法以及Sephadex G-100凝胶柱色谱法对铁皮石斛粗多糖进行分离纯化,得到4个不同相对分子质量(Mw)纯多糖组分(DOP1、DOP2、DOP3和DOP4)。运用柱前衍生化高效液相色谱法、凝胶渗透色谱(GPC)法和傅立叶红外光谱对其单糖组成、纯度和相对分子质量以及结构中单糖连接方式进行分析。研究结果表明:分离得到的4种铁皮石斛多糖的GPC色谱图均呈现为单一狭窄的对称峰,表明多糖纯度很高且均一性很好。单糖组成测定结果显示其主要为D-甘露糖和D-葡萄糖组成杂多糖,但D-甘露糖和D-葡萄糖的摩尔比在4种多糖中有一定差异性。红外光谱结果表明这四个多糖均为β-构型为主的酸性吡喃糖。研究结果可为今后铁皮石斛多糖活性和构效关系的研究奠定基础。     

金樱子果实中多糖的提取与分离纯化

目的：从金樱子果实中提取与纯化多糖。方法：用热水提取金樱子果实粗多糖，经Sevage脱蛋白，透析后经DEAE-Sepharose Fast Flow，和CM—Sepharose Fast Flow柱色谱分离纯化金樱子粗多糖；经高效液相色谱法测定其相对分子量；进行完全酸水解研究多糖的组成。结果：得到两个金樱子多糖组分RLPSⅠ、Ⅱ，其相对分子量分别为22712和16051；初步确定RLPS Ⅱ由D—半乳糖、D—甘露糖和木糖组成。结论：从中药金樱子中提取分离出了两个多糖。