卵巢囊肿奶牛乳汁孕酮和17β-E_2水平研究

采用放射免疫分析法测定了12头卵巢囊肿奶牛(其中卵泡囊肿8头,黄体囊肿4头)脱脂乳中孕酮和17β一雌二醇水平。结果卵泡囊肿奶牛脱脂乳中孕酮和17β一雌二醇水平分别为0.46±0.31ng/ml和26.33±12.44pg/ml;黄体囊肿奶牛脱脂乳中孕酮和17β一雌二醇水平分别为3.46±1.79ng/ml和8.25±1.35pg/ml。结果还表明,卵巢囊肿奶牛通过测定脱脂乳中孕酮水平可作出准确诊断,孕酮水平大于1ng/ml为黄体囊肿,小于1ng/ml为卵泡囊肿;卵泡囊肿奶牛脱脂乳中17β一雌二醇水平较高,且和病程长短有关。     

母牦牛生殖器官疾病的病理形态学研究

扼要报道了母牦牛子宫发育不全、双阴道、卵泡囊肿、黄体滞留、卵巢炎、输卵管炎、阴道上皮囊肿、子宫角囊肿，以及输卵管浆膜下囊肿等病例的临床特征；描述了直检印像和病理形态上的变化，讨论了发病的原因。     

动物抑制素的分子生物学特性(综述)

抑制素是一种水溶性非类固醇促性腺因子，它选择性地抑制促卵泡素的分泌，是控制卵泡生长和精子生成的关键激素之一。近年来，用克隆技术已测出大鼠、牛、绵羊、猪、禽类和人类的抑制素氨基酸序列。本文综述了动物抑制素的来源、合成特性、分子结构、牛卵泡液抑制素Ｎ端氨基酸序列、人类抑制素基因结构、几种动物抑制素亚单位比较和亚单位的表达等方面的研究进展。     

动物抑制素的分子生物学特性

抑制素是一种水溶性非类固醇促性腺因子，它选择地抑制促卵泡素的分泌，是控制卵泡生长和精子生成的关键激素之一。近年来，用克隆技术已测出大鼠，牛，绵羊，猪，禽类和人类的抑制素氨基酸序列。本文综述了动物抑制素的来源，合成特性，分子结构，牛卵泡液抑制素Ｎ端氨基酸序列，人类抑制素基因结构，几种动物抑制素亚单位比较和亚单位的表达等方面的研究进展。     

理囊散治疗卵泡囊肿不孕奶牛血清微量元素与激素的相关性分析

用ELISA法测定了理囊散治疗卵泡囊肿不孕奶牛前后血清中促卵泡激素（FSH）、促黄体激素（LH）、孕激素（P）和雌二醇（Ez）的浓度,以原子吸收光谱法测定血清Cu、Fe、Mn和zn的含量,分析探讨4种激素和四种微量元素间的相关性与回归方程。结果表明：Cu、Fe、Zn与P呈正相关,Mn与P呈负相关;Mn与E。呈正相关,Cu、Fe、Zn与Ez呈负相关;Mn、Zn与FSH呈正相关,Cu、Fe与FSH呈负相关;Cu、Mn、Zn与LH呈正相关,Fe与LH呈负相关。结论：理囊散治疗卵泡囊肿不孕奶牛前后血清中微量元素含量与激素水平具有相关性。     

"两步法"体外培养山羊卵母细胞的初步研究

体外成熟培养的卵母细胞经本外受精后，囊胚发育率远低于体内成熟卵母细胞，原因之一是由于体外成熟卵母细胞的不充分获能造成的，有假说认为：卵母细胞在体外培养过程中，如果延长GV期，可促进卵母细胞进一步获能，从而提高发育潜能。本文以山羊卵子为研究对象，探讨了山羊卵泡各种成分以及异种家畜卵泡液对山羊卵母细胞核成熟抑制以及抑制解除后减数分裂的影响，结果显示，山羊50％Q卵泡液、100％卵泡液、半卵泡、打孔整体卵泡以及完整卵泡对山羊卵母细胞的核成熟抑制率分别为：0.00%、9.38%、60.47％、78.26%和70.09%，随后，对经山羊半卵泡、打孔整体卵泡、完整卵泡抑制培养后的卵子进行恢复培养发现，卵子核成熟率分别为：64.29%、3.49%和4.13%，山卵母细胞与半卵泡共培养24h后进行0h、12h、20h、24h和30h的恢复培养，核成率分别为：0.00%、20.00%、61.90%、64.29%和43.75%，表明山羊半卵泡可以有效抑制山羊卵母细胞使之处于GV期，并且这种抑制作用可以恢复，恢复培养时间以20h和24h较为适宜，初步研究异种家畜卵泡液对山羊卵母细胞核成熟抑制的影响发现，50％牛卵泡液、1005牛卵泡液、50％绵羊卵泡液、100％绵羊卵泡液对山羊卵母细胞核成熟抑制率分别为3.7%、21.88%、10.00%、58.82%，表明，100％绵羊卵泡液对山羊卵母细胞核成熟抑制效果较好。     

卵母细胞的不同对牛体外受精效果的影响

为了进一步提高牛体外受精（ＢＩＶＦ）胚的发育率，探讨了来自不同大小卵泡、具有不同卵丘细胞层数以及细胞质形态不同的卵母细胞对牛体外受精效果的影响。结果表明：１）分别采自直径大于５ｍｍ、２￣５ｍｍ和小于２ｍｍ的卵泡的卵母细胞，经体外成熟、体外受精后，卵裂率分别为５４．５％（３０／５５）、６４．４％（８５／１３２）和５０．４％（６３／１２５）。其中，２￣５ｍｍ卵泡的卵母细胞的体外受精结果显高于小于２ｍ     

单克隆抗体亲和渗滤法制备两种牛生殖激素

在本室已获得高特异抗牛促卵泡激素 (bFSH)和抗牛促黄体激素 (bLH)杂交瘤细胞的基础上 ,制备纯化抗bFSH和抗bLH两种单克隆抗体 (McAbs) ,并进而建立了一种单抗免疫亲和渗滤新技术。使用该技术成功地制备了上述两种牛生殖激素 ,从 7g牛垂体干粉可提取 3.3mg亲和纯bFSH和 1 1 .1mg亲和纯bLH。回收率分别为 85 %和 82 %。     

单克隆抗体亲和渗滤法制备两种生殖激素

在本室已获得高特异抗牛促卵泡激素（bFSH）和抗牛促黄体激素（bLH）杂交瘤细胞的基础上，制备纯化抗bFSH和抗bLH两种单克隆抗体（McAbs），并进而建立了一种单抗免疫亲和渗滤新技术。使用该技术成功地制备了上述两种牛生殖激素，从7g牛垂体干粉可提取3．3mg亲和纯bFSH和11．1mg亲和纯bLH。回收率分别为85％和82％。     

切割采卵法及牛卵巢深层卵泡卵母细胞的体外受精

为提高牛体外受精(BIVF)过程中屠宰牛卵巢的利用率,本研究将采集的110个牛卵巢先用常规的注射器抽吸法采卵后,再用刀片切割法采集了位于深层的卵泡卵母细胞,并对两种方法回收的卵子分别进行了BIVF实验。结果表明,在先用抽吸法采卵每头牛可得到9.88±2.42枚可用卵子的基础上,切割法采卵又可获得平均8.74±3.48枚可用卵子。这使得平均采卵数达到了每头牛18.62±2.59枚。体外受精后,由切割法回收的深层卵子其卵裂率和桑椹胚、囊胚发育率分别为43.01％(160/372),14.24％(53/372)和10.48％(39/372),均明显低于抽吸法回收卵的73.62％(201/273)、31.14％(85/273)和19.05％(52/273),(P<0.01)。本研究证明了抽吸后再切割的两次采卵法对提高牛卵巢采卵效率有着明显的效果,而且这部分深层卵泡卵母细胞用于体外受精后可发育为正常的早期胚胎,但各项发育指标尚有待于进一步提高。     

短额负蝗卵子发生及卵母细胞凋亡的组织学观察

用组织学方法对短额负蝗卵子发生和卵母细胞凋亡进行了显微观察.根据卵母细胞的大小、形态、胞核的变化、卵黄物质的形成以及滤泡细胞的形态变化等特征,将短额负蝗卵子发生分为3个时期8个阶段,并描述了各个阶段卵母细胞和滤泡细胞的形态特征.卵子发生过程中卵母细胞凋亡现象主要发生在卵母细胞生长期,特征主要表现为滤泡细胞向卵母细胞质内分裂增殖,卵母细胞的胞质不均匀,出现许多空泡状物质.     

大鼠胚胎毛囊发育的形态学观察

研究了大鼠胚胎发育过程中,毛囊的发生时间及其形态学结构变化.采用胎龄为11,12,14,15,17 d的Wistar大鼠胚胎,石蜡切片,HE和PAS染色,光镜观察毛囊胚芽的形态学发生.结果显示:第11天的胚胎周皮仍呈单层,未见毛囊形态发生;第12天胚胎可见数量较少的毛囊胚芽形成;随着胎龄的延长,毛囊的数量明显增加,且形态上逐渐增大.研究结果表明:大鼠胚胎毛囊的形态发生时间为胚胎第12天,是由表皮基底层细胞向真皮突出形成,其周围有间充质细胞聚集.     

南方鲇卵巢滤泡细胞和卵膜生成的超微结构研究

滤泡细胞来源于卵巢基质细胞,其发育过程分为:零散卵泡膜细胞期、单层扁平卵泡膜细胞期、多层扁平 卵泡膜细胞期、立方形颗粒细胞期、柱状颗粒细胞期、颗粒细胞分泌期6个时期.多层细胞的滤泡可以分为外膜 层、鞘膜细胞层、粗纤维层、细纤维层、滤泡细胞层5个亚层.颗粒细胞具丰富的微丝、线粒体、内质网、核糖 体,高尔基体也丰富而发达.滤泡细胞具有生成次级卵膜、合成卵黄蛋白并加工成卵黄前体颗粒和中间颗粒、产 生类固醇激素和协助排卵等作用. 卵膜包括初级卵膜和次级卵膜.初级卵膜分为3个亚层,由卵母细胞依次产生的3个亚层最终融合并致密化 形成放射带.而次级卵膜在卵黄合成后期由滤泡细胞产生.     

彩色多普勒血流显像在不孕症卵泡监测中的应用

通过对不孕症者30例,累计共45个月的月经周期的观察,将其患者分为对照组、服用克罗米芬组,并分别于月经周期第7d、10d、14d,对停服克罗米芬后第2d～4d、5d～7d的排卵前测量子宫内膜厚度、卵泡直径、子宫动脉的阻力指数(RI)、搏动指数(PI) 结果发现两组中见生长卵泡者为第41个月月经周期,卵泡检出率为91.11% 卵泡发育良好者,子宫内膜厚度与卵泡直径之间有密切相关性 同时可测得子宫动脉的血流参数,排卵前RI、PI的下降趋势.因此,CDFI检查为无侵害并易为患者所接受的监测和预测排卵的可靠方法     

氯化汞对小白鼠卵巢损伤的显微镜及超微结构研究

对氯化汞染毒小白鼠卵巢进行了显微和超微结构研究。结果表明,氯化汞对小白鼠卵巢发育有明显的毒性作用,主要表现出卵巢内发育的卵泡（原始卵泡、生长卵泡、成熟卵泡）数量随剂量的增高依次性减少,而闭锁卵泡的数量则相反,为依次性增高。超微结构显示,从中剂量组开始,卵照相结构表现出病理学变化,主要表现为卵细胞核膜皱缩,染色质凝聚,胞质内线粒体肿胀、变形,外膜和内嵴受损,次级溶酶体及残余小体增多等现象。     

以30日龄长爪沙鼠为介体建立犬贾第虫纯培养

将取自然感染犬贾第虫的德国牧羊犬的包囊利用蔗糖梯度离心-G1耐酸漏斗滤过法进行分离和纯化，经口感染给30日龄的沙鼠．8d后无菌取小肠上段，分离出滋养体，转入改良TYI—S-33培养基中37℃培养．72h后在管壁上形成了细胞单层，将培养物置肉汤及血琼脂平板培养，未见细菌及霉菌污染，为纯培养．     

蝇类卵巢染色体制备的新方法

以羽化后未交尾的雌性麻蝇为活体材料,通过“Feulgan预染——显微解剖悬液铺片——Giemsa复染法”获得形态良好、分散适中、着色清晰的卵泡细胞有丝分裂中期染色体标本。本法材料性别来源明确,对蝇类性染色体鉴定的准确性有重要意义。     

miR-26b和miR-224在梅山与杜洛克猪卵泡中的差异表达分析

为了探讨miRNAs在猪卵泡和繁殖相关组织中的表达,采用荧光定量RT-PCR法和组织表达谱分析法,对miR-26b和miR-224在梅山和杜洛克猪卵泡及其他繁殖相关组织中的表达进行了研究。组织表达谱分析结果表明:miR-26b和miR-224在下丘脑、垂体、子宫、输卵管、卵巢、子宫角、黄体组织中均有表达。RT-PCR结果表明:miR-26b在L卵泡中的表达量梅山猪是杜洛克猪的2倍(P0.01);而在S卵泡中的表达量杜洛克是梅山猪的10倍(P0.01);两品种在M1和M2卵泡中的表达量差异不显著。miR-224在S卵泡中的表达量杜洛克是梅山的7.79倍(P0.01);而在M2卵泡中表达量梅山是杜洛克的1.84倍(P0.05);两品种在M1和L卵泡中的表达量差异不显著。在猪种内大卵泡L、中等卵泡M2、中等卵泡M1、小卵泡S的相对表达量也有不同程度的差异。此研究表明,miR-26b和miR-224在梅山和杜洛克猪中表达趋势相似,它们的表达差异可能影响卵泡发育和成熟,为深入了解miR-26b和miR-224在卵泡发育中的作用奠定了基础。     

Localized requirement for torso-like expression in follicle cells for development of terminal anlagen of the Drosophila embryo

The torso (tor) gene, one of six identified maternal genes essential for the development of the anterior and posterior terminal structures in the Drosophila embryo, is likely to function as a transmembrane receptor tyrosine kinase. Although tor protein is uniformly distributed in the membrane of the egg cell and syncytial embryo, genetic and molecular data suggest that tor is locally activated at the ends of the embryo by a ligand present in the perivitelline space. Local activation of tor could be achieved if the ligand were expressed by a subpopulation of the follicle cells that surround the developing oocyte. Here we describe torso-like (tsl), the sixth member of the terminal gene class, and show that it is unique among these genes in that its expression is required in the somatic follicle cells rather than in the germ line. Moreover, mosaic analysis demonstrates that tsl expression is necessary only in subpopulations of follicle cells located at the poles of the oocyte. Thus, the spatially regulated expression of tsl in the follicle cell layer may generate a localized signal that is transduced by tor, ultimately resulting in the formation of the terminal structures of the embryo.     

Wnt-dependent de novo hair follicle regeneration in adult mouse skin after wounding

The mammalian hair follicle is a complex 'mini-organ' thought to form only during development; loss of an adult follicle is considered permanent. However, the possibility that hair follicles develop de novo following wounding was raised in studies on rabbits, mice and even humans fifty years ago. Subsequently, these observations were generally discounted because definitive evidence for follicular neogenesis was not presented. Here we show that, after wounding, hair follicles form de novo in genetically normal adult mice. The regenerated hair follicles establish a stem cell population, express known molecular markers of follicle differentiation, produce a hair shaft and progress through all stages of the hair follicle cycle. Lineage analysis demonstrated that the nascent follicles arise from epithelial cells outside of the hair follicle stem cell niche, suggesting that epidermal cells in the wound assume a hair follicle stem cell phenotype. Inhibition of Wnt signalling after re-epithelialization completely abrogates this wounding-induced folliculogenesis, whereas overexpression of Wnt ligand in the epidermis increases the number of regenerated hair follicles. These remarkable regenerative capabilities of the adult support the notion that wounding induces an embryonic phenotype in skin, and that this provides a window for manipulation of hair follicle neogenesis by Wnt proteins. These findings suggest treatments for wounds, hair loss and other degenerative skin disorders.