利用pGenesil-1.0构建人Dna2真核表达干扰载体

目的:构建人基因Dna2干扰(RNAi)的真核表达载体.方法:根据GenBank上人Dna2的cDNA序列设计并合成两条单链寡核苷酸,退火以后,插入质粒pGenesil-1.0多克隆位点的BamH I和Hind III之间进行重组,构建重组干扰载体,转化DH5α后测序鉴定出阳性菌株.重组质粒以脂质体法转染HeLa细胞,提取Dna2蛋白以免疫印迹法检验干扰效果.结果:设计的目的干扰序列5’-catagccagtagtattcgatg-3’可明显抑制Dna2在HeLa细胞的表达.结论:利用pGenesil-1.0构建的人Dna2干扰载体适用于该基因功能研究.     

三氯杀螨醇对中华大蟾蜍的急性毒性

用三氯杀螨醇对中华大蟾蜍蝌蚪水体染毒和成体体腔染毒,采用寇氏法测定了不同温度条件下三氯杀螨醇对中华大蟾蜍蝌蚪(15℃和20℃)和成体(20℃)的半致死浓度(LC50)及其95%可信限范围,并观察了中毒症状.结果表明:在15℃和20℃条件下,三氯杀螨醇对蝌蚪的LC50分别为13.24 mg/L和9.85 mg/L,其95%可信限范围分别为12.30~14.24 mg/L和9.18~10.57 mg/L;20℃时,三氯杀螨醇对雄性成体和雌性成体的LC50分别为114.89 mg/kg和174.14 mg/kg,其95%可信限范围分别为80.00~165.01 mg/kg和121.25~250.11 mg/kg.     

三氯杀螨醇对雌性中华蟾蜍的生殖毒性

以不同浓度(0.00、0.25、0.50、1.00和2.00mg·kg-1)的三氯杀螨醇(DCF)分别处理中华蟾蜍雌性个体,运用组织学方法研究DCF的生殖毒性.结果表明:DCF处理会导致中华蟾蜍卵巢系数增大、卵泡数量增多、卵泡发育进程紊乱和卵泡畸形.     

骨关节炎间充质干细胞治疗进展

骨关节炎(Osteoarthritis,OA)是最常见的骨科疾病.传统的治疗方法包括非手术法和手术法,但在恢复骨关节炎软骨的正常结构与机能方面并不理想.因此,急需建立新的高效的治疗骨关节炎的方法.以干细胞疗法为研究方向的再生医学为关节软骨的修复提供了新的治疗方向.对可用于治疗骨关节炎的间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)的来源、作用机理和治疗方法的研究进展进行了阐述.     

艾拉莫德对脂多糖诱导的小鼠系统性炎症的保护作用

研究艾拉莫德对脂多糖(LPS)诱导的小鼠系统性炎症和多器官损伤的保护作用。小鼠腹腔注射LPS 5 mg/kg建立系统性炎症和多器官损伤模型。试验结果显示,与模型组相比,阳性药强的松组(prednisone)和T614中高剂量组动物死亡率、临床症状、脏器系数及组织病理学结果均显著改善;同时血液生化指标(ALT、AST、ALP、BUN、CREA和UA)显著降低(均P0.01),血液学指标(WBC、RBC、PLT和RET)均与空白对照组动物水平相当。试验结果表明T614对LPS诱导的小鼠系统性炎症和多器官损伤具有保护作用。     

三氯杀螨醇生物效应及其检测方法研究进展

对常用杀虫剂三氯杀螨醇(dicofol,DCF)的研究发现,它具有毒性,致畸、致突变、致癌性和 雌激素效应等.为了对其生物效应及检测方法有个整体认识,对其研究现状进行了总结,具体论述 了国内外在其生物效应及检测方法上所做的工作和得出的结论,并提出进一步的研究思路.     

茶多酚对小鼠小肠黏膜组织结构及5-羟色胺分泌的影响

目的:研究茶多酚(TP)对小鼠小肠黏膜组织结构及5-羟色胺(5-HT)分泌的影响.方法:昆明种小鼠28只,随机均分为A,B,C,D组.A组为对照组,以蒸馏水灌胃,剂量为0.20 mL/d;B,C,D组以茶多酚灌胃,剂量分别为0.50、1.00、2.00 mg/d,连续灌胃30 d.于第31 d取小鼠血清放免测定5-HT含量;取小鼠小肠以甲醛固定后制作石蜡切片,H-E染色示肠黏膜组织结构变化,免疫组化染色示肠黏膜内5-HT分泌细胞数量变化.结果:与A组相比,B,C,D组小鼠血液5-HT含量较低,小肠绒毛疏松,肠腺萎缩,黏膜内5-HT分泌细胞数量明显较少.结论:连续服用TP对小鼠小肠黏膜组织结构和5-HT分泌均有抑制性影响.     

RAPD法探究百草枯对HepG2细胞基因组稳定性的影响

目的:探讨百草枯(PQ)处理对HepG2细胞基因组稳定性的影响.方法:采用随机扩增多态性DNA(RAPD)标记技术,选取20种随机引物分析PQ处理24h对HepG2细胞基因组稳定性的影响.结果:引物5’-GGAAGTCGCC-3’、5’-ACGCGCATGT-3’和5’-GAATCGGCCA-3’的扩增产物在正常组与7.21、10.67、15.78、22.36和34.57mg/L的PQ处理组间有较明显差异.其中,引物5’-GGAAGTCGCC-3’的2种扩增产物(约2 200和2 600bp)在所有PQ处理组均缺失;引物5’-ACGCGCATGT-3’的2种扩增产物(约250和1 200bp)在高于7.21mg/L的PQ处理组均发生缺失,1种扩增产物(约1 500bp)在34.57mg/L的PQ处理组发生缺失,另有2种扩增产物(约400和550bp)在34.57mg/L的PQ处理组含量较低;引物5’-GAATCGGCCA-3’有2种扩增产物(约900和1 900bp)在全部PQ处理组均缺失,另2种扩增产物(约530和560bp)新出现在各PQ处理组.结论PQ处理会破坏HepG2细胞基因组的完整性和稳定性.     

短额负蝗卵子发生及卵母细胞凋亡的组织学观察

用组织学方法对短额负蝗卵子发生和卵母细胞凋亡进行了显微观察.根据卵母细胞的大小、形态、胞核的变化、卵黄物质的形成以及滤泡细胞的形态变化等特征,将短额负蝗卵子发生分为3个时期8个阶段,并描述了各个阶段卵母细胞和滤泡细胞的形态特征.卵子发生过程中卵母细胞凋亡现象主要发生在卵母细胞生长期,特征主要表现为滤泡细胞向卵母细胞质内分裂增殖,卵母细胞的胞质不均匀,出现许多空泡状物质.     

RECQL4与肿瘤发生的关系

RECQL4属于人类RECQ解旋酶家族,广泛参与DNA的复制和损伤修复.早期研究证实,RECQL4突变会导致RTS,BGS和RAPA 3种综合症,其中RTS和BGS患者都有很高的骨肉瘤和淋巴瘤发生倾向,此外,RECQL4还可通过维持线粒体和端粒的基因稳定避免多种肿瘤发生,RECQL4也被认为与血液恶性肿瘤爆发相关.最新实验结果提示,RECQL4缺陷的大部分骨肉瘤患者9号外显子缺失,RECQL4维持线粒体稳定的重要结合蛋白是p53,RECQL4是与生存素结合在一起避免乳腺癌细胞凋亡的,RECQL4过量表达通过增强MCM复制起始复合物活性而促进宫颈癌细胞等的增殖.但目前有关RECQL4与肿瘤关系的机制仍有许多不明之处,需进一步深入探讨.本文对RECQL4与肿瘤发生的关系作一综述,以期为癌症研究和治疗提供思路.