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赤枝栲(Castanopsis kawakamii)叶绿体DNA的提纯方法研究 总被引:1,自引:0,他引:1
建立了一个快速、简便的提取赤枝榜(Castanopsis kawakamii)叶绿体DNA的方法,该方法主要步骤包括:叶绿体分离、DNA酶处理、裂解、去蛋白和纯化.本方法具有高产率、高纯度、高质量和快速简便等优点,省去了传统的蔗糖密度梯度离心和氯化铯密度梯度离心等昂贵、耗时的步骤.对获得的叶绿体DNA进行了限制性内切酶消化、RAPD分析并摸索出其最适应条件. 相似文献
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对家蚕和蓖麻蚕的蚕蜕和蛾翅分别采用SDS裂解法和动物组织基因组试剂盒提取法提取DNS,并与常规方法以蚕蛹提取的DNA一起进行RAPD扩增图谱比较、分析,结果表明用非损伤性方法提取的DNA的RAPD图谱和常规方法提取的DNA的RAPD图谱基本一致。 相似文献
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阔叶榧总DNA的提取及其RAPD反应条件的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
在阔叶榧新鲜针叶DNA提取过程中,应用pH值较低,无机盐浓度较高的提取缓冲液可沉淀蛋白质,其中加入2%的β-颈基乙醇可有效地防止次生代谢物质使DNA变色。提取出的DNA样品产率在83.7-197.5ng/mg.f.,DNA质量和纯度较高,260nm/280nm光密度比值在1.8-1.9之间。所得DNA可直接用于限制性内切酶酶切,并可用于随机引物PCR扩增,在优化RAPD各种反应条件研究中,确定 了阔叶榧最佳RAPD反应体系为:15μL反应体系中含有50mmol/L KCl.10mmol/L Tris-HCl(pH9.0).0.1%Triton-100、3nmolμL MgCl2、0.6nmol/μLdNTPs、6μg/μL BSA、1U Taq酶、60ng引物、50-100ng左右的阔叶榧DNA。 相似文献
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对太白红杉总DNA提取方法进行了探讨,并对其不同部位和器官、不同处理方式材料进行了提取实验研究.通过琼脂糖凝胶电泳、限制性内切酶处理等方法对所提取的DNA样品进行检测.结果表明,改良后的CTAB法,对于太白红杉总DNA的提取是一种良好的简单易行的方法,无论是烘干后的材料还是新鲜材料提取的总DNA中基本没有蛋白质及酚类污染.该方法可在短时间内获得大量的DNA样品,并可根据需要对样品进行适当操作. 相似文献
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用SDS高盐介质法和1.5×CTAB法提取黑木相思幼叶及叶状柄基因组DNA,将其与2×CTAB法、3×CTAB法、改进的CTAB法进行比较,并用紫外光谱吸收、凝胶电泳、限制性内切酶消化、RAPD(Radomly Amplified Polymorphic DNA)和ISSR(Inter-Simple Sequence Repeat)等方法进行鉴定.结果表明,叶状柄多糖的质量分数较幼叶少,更易于基因组DNA的提取;SDS高盐介质法与1.5×CTAB法提取叶状柄的基因组DNA得率为180.0~697.5 μg·g-1,分子质量为48 kb,D(260)/D(280)=1.750~1.955,无需经Rnase 处理,可直接用于限制性酶切和RAPD及ISSR分析;1.5×CTAB法所提的基因组DNA的纯度优于SDS高盐介质法.综合考虑认为,1.5×CTAB法可作为黑木相思基因组DNA快速提取的简便方法. 相似文献
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木麻黄小枝基因组DNA的快速提取研究 总被引:4,自引:0,他引:4
李晓青 《福建师范大学学报(自然科学版)》1999,15(3)
提取介质中加入2.5% β-巯基乙醇, 能有效去除次生物质对木麻黄基因组DNA提取的影响.用新建方法所提DNA产率比用前人方法提的高出0.8倍左右.鉴定结果表明:鲜小枝、干小枝的DNA样品皆为48kb左右,适于限制性酶切和RAPD反应; 同时发现同一株树的鲜小枝、干小枝,基因组DNA RAPD扩增可得到相同的产物. 相似文献
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环境DNA的提取和纯化方法的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
比较了从土壤中提取DNA的二三种方法,结果发现TENS法对不同土壤都有较好的提取效果,提取的DNA片段长度均在23kbp以上,并且无明显的降解现象,提取效果明显好于SDS高盐提取法和裂解酶法.在DNA纯化过程中,分别比较了试剂盒法、透析袋法和琼脂糖酶法等纯化方法,发现使用琼脂糖酶法纯化粗提的DNA时回收率最高,获得的DNA的质量也很高,纯化DNA可用于酶切等分子生物学操作. 相似文献
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在对传统CTAB法进行改进的基础上,提取了沙藏珙桐休眠期去中果皮种子高质量基因组DNA,琼脂糖电泳及紫外分光光度分析,表明其OD260nm/OD280nm在1.8—2.0之间,用所提取的基因组DNA作为模板,S17为引物,进行RAPD扩增,获得了清晰的扩增图谱. 相似文献
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强晓艺 《西安联合大学学报》2002,5(2):22-25
DNA 计算机是当前研究的热点问题,我国的研究刚刚起步,本文详细论述了DNA序列的概念及性质,DNA计算的原理,同时介绍了DNA计算的研究进展概况。 相似文献
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DNA计算是计算科学和分子生物学相结合的新领域。目前关于DNA计算的研究主要是抽象的计算模型和简单的原理性试验。DNA剪接计算模型是以生物DNA分子重组技术为基础的文法系统。本文主要介绍DNA剪接计算模型的文法结构及计算方法,证明了DNA剪接模型可以计算所有图灵机可计算函数。 相似文献
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为评估聚乙烯基吡咯烷酮(Polyvinylpyrrolidone,PVP)的生物可利用性,研究了不同相对分子质量PVP对闭合环状双链质粒DNA pBR322的降解效应.实验结果表明:在常温、非光催化条件下,相对分子质量小的PVP(PVP8000)可引起质粒DNA构象的改变,并且这种效应与反应温度、反应时间及PVP的相对... 相似文献
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目的:为确认Tn3-gpt已插入小鼠巨细胞病毒(mouse cytomegalovirus,MCMV)基因组的特定位置,改进大分子病毒DNA的测序方法,建立以230kb DNA为模板直接进行DNA序列测定的方法。方法:待测MCMV的Tr3-gpt插入突变株感染NIH3T3细胞后,从培养液中制备病毒颗粒并从中纯化得到基因组DNA,以此DNA为模板,合成的寡核苷酸为引物,用热循环方法按Promega公司的DNA Cycle Sequencing System试剂盒的方法进行测序。结果:获得纯度较高可直接作为模板进行测序的:DNA,测序所得放射自显影图片条带清晰明亮,间隔正常,分辨率较高,可顺利读出插入位点的MCMV的DNA序列,证实Tn3-gpt插入在特定的位置。结论:长达230kb的大分子病毒DNA可直接作为模板,用热循环测序方法进行测序,无需切割成小片段后才进行测序。 相似文献
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单核苷酸多态性(Singlenucleotidepolymorphism,SNP)是人类基因组中单个碱基的变异,其最低基因频率不低于1%,是倍受关注的第三代多态性遗传标记,为法医物证检验提供了新的方向,本文就其研究最新进展、应用及检测手段作一综述. 相似文献
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对不同焚烧程度的长骨用CTAB法提取DNA和用DNAIQ^TMSystem试剂盒纯化方法,较有效解决火烧骨的DNA的提取和荧光STR复合扩增检验的问题,为今后对杀人焚尸、火灾、爆炸等恶性案件和事故中进行个人识别和亲子鉴定提供了一定的科学依据。 相似文献
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DNA分子标记在真菌系统分类与鉴定中的应用 总被引:4,自引:0,他引:4
近年来分子生物学技术的发展,为从核酸分子水平上研究真菌的遗传本质,为真菌的进化研究、系统分类和鉴定开辟了新的途径.概述了几种主要的DNA分子标记的基本原理和特点,以及在真菌鉴定与分类中的应用. 相似文献