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1.
建兰DNA的快速提取 总被引:4,自引:0,他引:4
用SDS高盐提取介质简便快速提取建兰(Cymbidiumensifolium)嫩叶DNA.提得的DNA分子大小约为48kb,A260/A280=1.77~1.86,DNA得率为每g鲜叶410~1145μg.提取的DNA无需经RNase处理,可直接用于限制性内切酶酶切和随机扩增多态DNA反应. 相似文献
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针对黑木相思富含多酚、多糖等次生代谢物质的特点,以其组培苗为试材,采用改良CTAB裂解法、硼砂-SDS裂解法、改良异硫氰酸胍裂解法、CTAB-异硫氰酸胍裂解法、改良CTAB-异硫氰酸胍裂解法等5种不同的提取方法提取其总RNA.结果发现:改良CTAB-异硫氰酸胍裂解法能有效地控制多酚、多糖、蛋白质以及DNA等对所提取总RNA的污染,所得总RNA质量高、完整性好.紫外分光光度检测,A260/A280比值为1.96~2.00,A260/A230比值1.98~2.20,总RNA得率为118.4~213.6μg.g-1,电泳检测,28SrRNA亮度约为18SrRNA的2倍,所提RNA质量可以满足dscDNA合成和cDNA-AFLP等后续分子操作要求. 相似文献
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坛紫菜(Porphyra haitanensis)叶绿体DNA 的快速提取 总被引:2,自引:0,他引:2
以阴干的坛紫菜叶状体为材料,通过酶解等方法获取完整的叶绿体.再裂解叶绿体并酚仿抽提获得叶绿体DNA.限制性内切酶Hind Ⅲ和EcoR Ⅰ双酶切及RAPD检测结果显示:叶绿体DNA与基因组DNA的酶切图谱及RAPD图谱均有比较明显的差异.多次重复实验证明,按此法提取的叶绿体DNA.其得率稳定,并可用作PCR扩增的模板及酶切图谱的构建等.该方法操作简便.过程快捷.可作为大型海藻叶绿体DNA提取的参考方法. 相似文献
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β-巯基乙醇与PVP在红干椒DNA提取中的比较研究 总被引:1,自引:0,他引:1
红干椒叶片中富含的酚类物质较多,为提取适于红干椒RAPD分析的高质量DNA,通过在CTAB提取缓冲液中分别添加β-巯基乙醇和PVP抗氧化剂,研究β-巯基乙醇和PVP对红干椒叶片DNA提取质量的影响.结果证明,在CTAB提取液中添加适量的β-巯基乙醇所获DNA纯度较高,A260/A280比值在1.800附近,电泳谱带清晰,无明显拖尾现象,辣椒叶片DNA平均产量为505.83ng·μl^-1,DNA的质量和纯度满足于RAPD技术的要求. 相似文献
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《南开大学学报(自然科学版)》2017,(6)
为建立高效提取几种红景天属植物叶片RNA的方法,试验以采自西藏林芝色季拉山的大花红景天为材料,分析了CTAB法,Trizol法,SDS法,尿素法提取叶片RNA的可行性,并利用Nano Drop 1 000、RTPCR和q RT-PCR等手段分析了该方法获得RNA的质量.结果显示,SDS法和CTAB-异丙醇均可得到完整的RNA条带,但是相比于SDS法,后者所提取的RNA产率较高,质量完整,条带清晰.随后对9种不同产地,不同品种的红景天进行RNA的提取,并用Nano Drop 1 000、RT-PCR分析结果.结果显示,所提取RNA的浓度均在200 ng/μL之上,A260/A280均在2.0-2.2之间,A260/A230均大于1.8.此外利用q RT-PCR获得18S内参基因的标准曲线相关系数为0.983.因此证明所提取的RNA的纯度、完整性和产率较高,蛋白、多糖及多酚类物质去除干净.所以CTAB-异丙醇法可以适用于红景天属叶片RNA的提取,为红景天的分子生物学研究奠定了基础. 相似文献
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用SDS高盐介质法和1.5×CTAB法提取黑木相思幼叶及叶状柄基因组DNA,将其与2×CTAB法、3×CTAB法、改进的CTAB法进行比较,并用紫外光谱吸收、凝胶电泳、限制性内切酶消化、RAPD(Radomly Amplified Polymorphic DNA)和ISSR(Inter-Simple Sequence Repeat)等方法进行鉴定.结果表明,叶状柄多糖的质量分数较幼叶少,更易于基因组DNA的提取;SDS高盐介质法与1.5×CTAB法提取叶状柄的基因组DNA得率为180.0~697.5 μg·g-1,分子质量为48 kb,D(260)/D(280)=1.750~1.955,无需经Rnase 处理,可直接用于限制性酶切和RAPD及ISSR分析;1.5×CTAB法所提的基因组DNA的纯度优于SDS高盐介质法.综合考虑认为,1.5×CTAB法可作为黑木相思基因组DNA快速提取的简便方法. 相似文献
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苔藓植物DNA不同提取方法的比较分析 总被引:9,自引:0,他引:9
以苔藓植物为材料,比较快速提取法、SDS法和改良CTAB法(自行设计)提取苔藓植物总DNA的效果.结果表明:改良CTAB法提取的基因组DNA质量最好(A260/A280为1.83~1.86;A260/A230为2.05~2.50),快速提取法次之(A260/A280为1.64~1.73;A260/A230为1.68~1.77),SDS法较差(A260/A280为1.51~1.61;A260/A230为1.56~1.76).改良CTAB法提取的苔藓植物的DNA适合于作为PCR的模板,并成功地进行了RAPD扩增. 相似文献
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高原植物体内所含有的酚类、多糖、色素等次生代谢物质严重影响提取其基因组DNA的得率和纯度,是导致后续分子操作失败的主要原因.运用一种新改进的CTAB法对变色硅胶保存的高原植物珠芽蓼(Polygonumviviparum)叶片进行基因组DNA的提取,采取常温下沉淀DNA,增加洗涤沉淀的体积分数为70%乙醇用量和洗涤时间等措施,有效地去除了酚类、多糖、色素等物质的干扰,减少了褐化现象的发生.样品检测所得DNA片段均在48 kb左右,电泳谱带呈线状,无拖尾现象;紫外分光光度计检测,A260nm/A280nm值在1.7~1.9之间.RAPD扩增结果表明,此方法提取的DNA无论在质量和纯度上都较理想. 相似文献
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快速而稳定地提取大草履虫的基因组DNA是进行后续分子生物学研究的前提.文章通过比较传统SDS法、CTABⅠ法和CTABⅡ法等提取大草履虫DNA的效果,进一步优化提取方法,获得快速稳定地提取大草履虫基因组DNA的方法.结果表明:用CTAB I法提取的DNA浓度低,杂质较多;CTABII提取的DNA电泳时检测不出条带;而SDS法提取的DNA在电泳时带型较整齐,无降解,且DNA的得率和纯度较高,但仍有蛋白质污染.针对蛋白质的去除,用SDS-蛋白酶K法和SDS-NaAc法来提取DNA,经过试验发现这2种方法都能够很好地去除蛋白质,所获DNA样品的纯度和得率都能用于进一步分子试验,而SDS-NaAc法更经济适用. 相似文献
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DNA与水溶性C60衍生物的相互作用 总被引:1,自引:0,他引:1
发展了一种新的研究方法,即DNA修饰金电极表面电化学方法,结合紫外光谱研究了一种水溶性C60衍生物——C60乙醇胺加成物与ds DNA的相互作用。结果表明,富勒烯衍生物是以DNA双螺旋的大沟为作用靶点的。 相似文献
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新疆棉花枯萎病菌酯酶同工酶的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
利用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定新疆棉花枯萎病菌的酯酶同工酶,结果表明,供试的30个代表性菌株的酯酶同工酶有4种类型的主酶带,类型1有E21,E20,E19,E6,E5 5条主酶带,包括25个供试菌株;类型有E21,E20,E54个主酶带,包括1个供试菌析对照3析标准菌株的酯酶同工酶及1997年新疆棉花枯萎病菌生理小种鉴定结果,可以看出:新疆棉花枯萎病菌生理小种与酯酶同工酶有显著性相关性。用生化的方法再 相似文献
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用激光溅射多相反应体系,以石墨为固体靶,以四氯化碳为气相和液相反应物,合成了一系列全氯代稠环芳烃化合物。分离和表征了其中的八氯萘、十氯蒽、十氯菲、十氯芘。结果表明,激光溅射这一物理方法可以做为一种有效的合成手段,通过等离子体反应得到产物。 相似文献
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采用CTAB法、改良SDS法、高盐低pH法提取了剑叶龙血树叶DNA,并通过紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳检测了不同方法的提取效果.结果表明:CTAB法所提取的DNA浓度与纯度均高于其它2种方法,泳带分布集中,无拖尾现象,A260/A280=1.81,DNA浓度为735 ng/μL,能满足RAPD、SSR/ISSR扩增的要求,是提取龙血树叶片DNA的最佳方法. 相似文献
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MALDI-TOF MS 测定多肽和蛋白质混合物的可行性研究 总被引:3,自引:0,他引:3
考察了基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (matrixassistedlaserdesorption ionizationtime_of_flightmassspectrometry,MALDI_TOFMS)测定多肽和蛋白质混合物的可行性。实验结果表明 :MALDI_TOFMS能快速地同时提供多肽和蛋白质混合物中各组分的准确相对分子质量。对于相对分子质量较小的多肽混合物 ,采用反射模式 ,多肽组分分子离子峰M H 的各同位素峰清楚地区别开来 ,达到了基线分离水平。对于 5种相对分子质量在10 4 6 5 4~ 6 6 4 31 0 0范围内的多肽和蛋白质混合物 ,采用线性检测模式 ,MALDI_TOFMS同样能够检测到各组分的分子离子。 相似文献
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随着印染技术的发展,其生产工艺有很大改进,同时更多的化学印染助剂与化工原料广泛的应用于印染生产中,导致印染废水成份日趋复杂,对其治理难度增大。本文通过对技术更新前后的印染废水中CODMn与CODCr测定相关性研究结果表明:(1)印染废水中可生化性有机物成份呈下降趋势;(2)CODMn测定值越接近CODCr测定值时,废水中可生化物成分增大,与传统的BOD5与CODCr相关性研究结论相一致;(3)依据 相似文献
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ISSR 和 RAPD PCR技术对东北地区主推玉米品种的鉴别 总被引:3,自引:0,他引:3
运用现代分子生物学简单重复区间序列扩增多态性(ISSR)和随机扩增片段多态性DNA(RAPD)两种分子标记技术, 对吉林省主推6个玉米杂交种及其父本、 母本共计18份基因图谱进行鉴别. 以ISSR为主要检测方法、 RAPD为验证方法,分别从30条ISSR引物中选出4条、 从30条RAPD引物中筛选出2条扩增效果明显、 特异性高的引物. 结果表明, 运用ISSR和RAPD-PCR技术提高了玉米品种鉴定和纯度鉴定的准确性. 相似文献
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负反馈对放大器频率响应的影响再分析 总被引:4,自引:1,他引:3
应用电路分析的方法,导出了单级负反馈放大器上、下限截止频率FHf、fLf的新关系式,说明了方块图法不能体现电路的基尔霍夫定律作用。新关系式能全面直观描述FHf、fLf和电路中所有元件参数之间的关系,更便于理论分析和工程设计,及计算机辅助分析。 相似文献