民族药物指纹图谱的建设策略

在总结中药指纹图谱技术的基础上,提出基于民族医学理论从生物学谱图、化学组分谱图、功效谱图三个方面建设民族药物指纹图谱的策略,以生物学谱图确定道地药材种质,以化学组分谱图确定药物成分组群,以功效谱图确定药物成分组群与疾病疗效的关系,通过民族药物指纹图谱完成民族传统医学的传承与发展。     

酶工程实验教学改革探索

分析了传统酶工程实验教学中存在的问题,从实验内容、教学方式和考核方式等几个方面对酶工程实验课的教学进行探究和改革,为培育应用型、创新型人才的培养模式提供了新思路。     

产生多种抗真菌活性物质菌种的筛选分离和鉴定

从堆肥样品中分离出的伯克霍尔德菌(Burkholderia)CF-66株能够抑制若干植物病原霉菌和病原酵母菌,并且显示了广谱抗菌活性．这种抑制作用不需要细胞的接触或活细胞,说明抗菌活性物质应是分泌代谢到细胞外的化合物．通过生理学和生物化学检测及16S rRNA测序,清楚表明：CF-66菌株归属于洋葱伯克霍尔德菌群．以前的研究指出,洋葱伯克霍尔德菌群中的亚门(genomovar)Ⅱ、Ⅲ含有传染性的菌株,但通过species-specific PCR鉴定已证明,CF-66菌株并不属于洋葱伯克霍尔德菌群中的genomovarⅡ、Ⅲ,而归属于洋葱伯克霍尔德菌群genomovarV．     

基于AhsA蛋白的嗜水气单胞菌特异性抗体的制备与鉴定

选取嗜水气单胞菌表面特异性抗原蛋白AhsA,构建了pET-28a(+)-AhsA表达载体,并在大肠杆菌BL21中进行表达,利用Ni-NTA亲和层析、凝胶过滤层析等蛋白纯化方法进行纯化。重组蛋白表达效果较好,浓度可达10 mg·mL^-1,纯度可达90%以上,符合制备多克隆抗体的免疫原标准。利用Western Blot技术将AhsA抗体特定识别免疫原蛋白,结果表明该抗体能够特异性识别免疫原蛋白AhsA,而对于牛血清蛋白却不能发生免疫应答,表明该抗体具有一定的特异性且AhsA蛋白具有很好的免疫原性。同时通过检测验证了AhsA蛋白抗体能够特异性检测嗜水气单胞菌,将为水产品质量控制及临床检测嗜水气单胞菌可提供新的技术。     

解淀粉芽孢杆菌Q426可湿性粉剂的研制

通过对载体、润湿剂、分散剂、紫外保护剂的筛选,确定了解淀粉芽孢杆菌Q426可湿性粉剂的最佳配方。最终所得制剂中载体D10％、润湿剂6％、分散剂6％、紫外保护剂0．5％。测得制剂的芽孢数量为2．82×10”efu·g-1,润湿时间为43s,悬浮率为76％,指标均达到国家标准及预期目标。     

16S rDNA和recA-gene对乳酸菌Ⅱ32的鉴定

对乳酸菌Ⅱ32进行了生化实验.以菌株Ⅱ32的总DNA为模板,采用细菌通用的引物,对其16S rDNA进行特异扩增,并进行序列测定,将测定结果与GenBank DNA数据库中已知菌种的16S rDNA序列通过BLAST软件进行分析比较,初步确定该菌株为戊糖乳酸菌、植物乳杆菌或类植物乳杆菌.采用recA-gene约300bp的特异扩增片段最终确定乳酸菌Ⅱ32为类植物乳杆菌.     

环境DNA的提取和纯化方法的研究

比较了从土壤中提取DNA的二三种方法，结果发现TENS法对不同土壤都有较好的提取效果，提取的DNA片段长度均在23kbp以上，并且无明显的降解现象，提取效果明显好于SDS高盐提取法和裂解酶法．在DNA纯化过程中，分别比较了试剂盒法、透析袋法和琼脂糖酶法等纯化方法，发现使用琼脂糖酶法纯化粗提的DNA时回收率最高，获得的DNA的质量也很高，纯化DNA可用于酶切等分子生物学操作．     

超滤洋葱伯克霍尔德菌CF-66发酵液提取抗菌物质的研究

对洋葱伯克霍尔德菌（Burkholderia cepacia）CF-66进行摇床培养,获得具有活性的抗菌物质。对其发酵液中抗菌物质的提取采用截留分子量为10 000的双酚A型聚砜中空纤维膜超滤。结果表明,在室温、膜两侧压差0.02～0.03 MPa、料液体积流量为14 L·h^-1时超滤,抗菌活性物质均截留在浓缩液中,超滤浓缩的体积比为2.0%～3.6%,清洗后的膜通量可恢复至97%以上。     

具有AHL降解能力的海洋微生物的筛选与鉴定

以紫色视杆菌Chromobacterium violaceum 026为报告菌株,以己酰基高丝氨酸内酯作为菌株生长的唯一碳源及能源,通过富集培养、分离纯化,从西南印度洋海泥中筛选得到2株菌S2和S3。检测结果表明,S2、S3可能具有胞内AHL降解酶活性。形态鉴定和16S rDNA序列分析表明,2株菌均为芽孢杆菌属。系统发育分析表明,菌株S2、S3与Bacillus amyloliquefaciens的亲缘关系最近。