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阔叶榧总DNA的提取及其RAPD反应条件的研究
引用本文:叶冰莹,陈由强,庄振宏,林荣华,朱锦懋.阔叶榧总DNA的提取及其RAPD反应条件的研究[J].厦门大学学报(自然科学版),2002,41(5):683-686.
作者姓名:叶冰莹  陈由强  庄振宏  林荣华  朱锦懋
作者单位:福建师范大学生物工程学院,福建,福州,350007
基金项目:福建省科技厅国际合作基金 (2 0 0 0I0 0 7),福建省教委基金 (JB990 0 7)资助项目
摘    要:在阔叶榧新鲜针叶DNA提取过程中,应用pH值较低,无机盐浓度较高的提取缓冲液可沉淀蛋白质,其中加入2%的β-颈基乙醇可有效地防止次生代谢物质使DNA变色。提取出的DNA样品产率在83.7-197.5ng/mg.f.,DNA质量和纯度较高,260nm/280nm光密度比值在1.8-1.9之间。所得DNA可直接用于限制性内切酶酶切,并可用于随机引物PCR扩增,在优化RAPD各种反应条件研究中,确定 了阔叶榧最佳RAPD反应体系为:15μL反应体系中含有50mmol/L KCl.10mmol/L Tris-HCl(pH9.0).0.1%Triton-100、3nmolμL MgCl2、0.6nmol/μLdNTPs、6μg/μL BSA、1U Taq酶、60ng引物、50-100ng左右的阔叶榧DNA。

关 键 词:阔叶榧  DNA提取  限制性内切酶酶切  反应条件  裸子植物  次生代谢物质  RAPD反应
文章编号:0438-0479(2002)05-0683-04
修稿时间:2002年5月20日

Study on Isolation and Characterization of Total DNA and RAPD Reaction Condition in Torreya fargesii Franch
YE Bing-ying,CHEN You-qiang,ZHUANG Zhen-hong,LIN Rong-hua,ZHU Jin-mao.Study on Isolation and Characterization of Total DNA and RAPD Reaction Condition in Torreya fargesii Franch[J].Journal of Xiamen University(Natural Science),2002,41(5):683-686.
Authors:YE Bing-ying  CHEN You-qiang  ZHUANG Zhen-hong  LIN Rong-hua  ZHU Jin-mao
Abstract:
Keywords:Torreya fargesii Franch  RAPD  digestion with restriction enzyme  isolation of total DNA  reaction condition
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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