枯草杆菌蛋白酶水解大豆胰蛋白酶抑制剂的研究

采用改进的BAPNA法探讨了枯草杆菌蛋白酶对大豆胰蛋白酶抑制的水解作用,通过实验了最适反应条件为：反应温度40－60,PH值7．5－8．5,酶活力大于等于40000units/mL以及40min的反应时间。     

用推广的模拟退火算法研究HIV—1蛋白酶与苯甲醚配体的刚性对接

推广的模拟退火算法是一种普遍的全局极小化方法,在目标函数自变量数目不很大时,计算效率较高,首先将该算法应用于假想分子模型间的刚性对接,然后将算法应用于HIV－1蛋白酶与苯甲醚配体的刚性对接。结果表明,该算法可以较高的效率查找到分子对接的最佳能量构型,对实际分子的计算结果与晶体结构非常接近,偏差为0．03nmRMSD。     

黄精属植物种间蛋白质和蛋白水解酶的分析比较

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术和复性电泳(G-PAGE)技术对五种黄精属植物茎和叶的蛋白谱带和蛋白水解酶谱进行了分析。结果表明:(1)茎和叶的蛋白质和蛋白水解酶种类有很大差异;(2)它们的茎中均含有66.2、54.6、38.5、28、18.6kD蛋白质和肠、55kD的蛋白水解酶;(3)蛋白质和蛋白水解酶可作为黄精属植物的分类依据之一。     

蛋白酶抑制剂在肿瘤治疗中的作用研究

蛋白酶及其抑制剂是非常重要的信号分子,涉及多个关键的人体生理代谢途径,在体内受到严格的调控.蛋白酶抑制剂活性的紊乱可导致多种疾病,诸如心血管和炎症疾病、癌症和神经系统障碍等.已知蛋白酶在肿瘤细胞侵袭和转移过程中扮演着重要的角色.细胞外基质和基底膜重塑是癌细胞侵袭转移过程中的关键环节,这个过程需多个蛋白水解酶的表达和激活.蛋白酶抑制剂的应用在一定程度上可减少由蛋白酶水解引起的肿瘤细胞的侵袭和转移,且它的抑制作用具有不同程度的特异性,可以减缓肿瘤恶性发展的进程.文章对蛋白酶及其抑制剂的靶向治疗药物及临床应用研究进展进行了综述.     

两种蛋白酶在生皮脱毛上应用试验

无公害工业化生产要求制革企业放弃制革工艺中沿用的传统有害物质,采用新方法生产高质量皮革制品。介绍了中俄科研人员用两种不同的方法(涂布法、浸酶法)和两种不同的脱毛酶制剂进行的生皮脱毛试验。试验证明,用酶制剂脱毛效果良好,完全可以替代传统的硫化碱,同时能够改善制革工艺,削弱碱性物质对皮革表面的侵害,减少制革业对水源污染。     

中华猕猴桃蛋白酶热失活动力学

改进了酶的提纯方法获得聚焦电泳为单一区带酶制剂。酶热失活以 HbCO 为底物时为一级反应,动力学方法表明 HbCO 对酶的热失活有保护作用,68.90℃时k_(+0)/k′_(+3)比值24,“HbCO”络合物活化能 535kJ/mol,焓 531 kJ/mol,自由能 116kJ/mol,熵1 212kJ/mol,生成自由能和生成热分别为20和209kJ/mol,这些参数说明 HbCO对酶热失活保护作用以及对酶构象影响可能与二者的多键结合和HbCO 水化作用有关。本文中还得到CBZ-Lys-ONp 为底物的热力学参数,观察到 DTT 对酶热失活保护是很小的。     

水稻中一个25 kD Bowman-Birk 蛋白酶抑制剂的表达和抑制活性分析

水稻Bowman-Birk 蛋白酶抑制剂(RBBI)在体外是胰蛋白酶抑制剂, 有的有1 个同源结构域 (8 kD), 有的有2 个同源结构域(16 kD). 本研究发现, 在水稻体内存在带有3 个同源结构域的RBBI(25kD), 而且RBBI 受发育和伤害调控. 体外实验发现, 3:13 二硫键(而不是4:5 二硫键)可抑制胰蛋白酶的活性; 而RBBI3-1 的D3 结构域对胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、木瓜蛋白酶和枯草芽孢杆菌素没有抑制活性. 突变实验表明, 改变D1 结构域N 端的P1 位点(把Lys 突变为Leu)并不能获得对胰凝乳蛋白酶的抑制活性, 这表明RBBI3-1 的D1 结构域反应回环阻碍了P1 位点获得新的抑制活性; 而对胰凝乳蛋白酶的抑制活性可能还需要其他结构(比如3:13 二硫键)的参与.     

整合素αvβ3对正常和癌变的人滋养层细胞分泌基质金属蛋白酶的影响

胚胎植入过程中,滋养层细胞对母体子宫内膜的侵润过程与肿瘤的迁移非常类似,显著区别在于前者是受严格调控的有节制侵润.利用体外培养的人早孕胚胎细胞滋养层细胞和人绒毛膜上皮癌细胞模型,通过RT-PCR、明胶酶谱和免疫细胞化学分析等手段,对比研究了整合素αvβ3对正常和肿瘤细胞产生基质金属蛋白酶的调节.结果表明,正常细胞滋养层细胞和绒毛膜上皮癌细胞均可产生整合素αvβ3;整合素αvβ3抗体能够促进正常滋养层细胞产生基质金属蛋白酶的能力,但抑制绒毛膜上皮癌细胞中基质金属蛋白酶的分泌.这表明整合素能够调节基质金属蛋白酶表达,同时也表明正常和肿瘤化的滋养层细胞中基质金属蛋白酶的表达存在截然不同的调节机制.     

Overinhibition of Mitogen-Activated Protein Kinase Inducing Tau Hyperphosphorylation

To reveal the relationship between mitogen-activated protein kinase (MAPK) and tau phosphorylation, we used different concentration of PD98059, an inhibitor of MEK (MAPK kinase), to treat mice neuroblastma (N2a) cell line for 6 h. It showed that the activity of MAPK decreased in a dose-dependent manner. But Western blot and immunofluorescence revealed that just when the cells were treated with 16μmol/L PD98059, tau was hyperphosphorylated at Ser396/404 and Ser199/202 sites. We obtained the conclusion that overinhibited MAPK induced tau hyperphosphorylation at Ser396/404 and Ser199/202 sites.