丙酮酸激酶M1和M2的表达水平与结肠癌发展相关性研究

研究旨在探讨丙酮酸激酶M1(pyruvate kinase M1,PKM1)、丙酮酸激酶M2(pyruvate kinase M2,PKM2)在不同结肠癌细胞中表达情况与结肠癌发展的相关性。通过Western blot、实时荧光定量PCR、丙酮酸激酶活性分析,检测不同恶性程度结肠癌细胞中PKM1、PKM2的蛋白与基因表达水平及丙酮酸激酶活性,分析它们与结肠癌恶性程度的相关性。PKM1和PKM2在人结肠癌细胞和正常结肠上皮细胞中均有表达;PKM1及PKM2的总蛋白和mRNA表达情况与人结肠癌恶性程度无明显相关性;细胞核中PKM1与PKM2的表达量比值与结肠癌恶性程度呈负相关;丙酮酸激酶活性与结肠癌恶性程度呈正相关。细胞核中PKM1与PKM2的表达量比值可以作为结肠癌恶性评价的一个指标。     

含内蛋白子融合表达载体的构建与人神经营养因子-3的初步表达

为了构建一个含蛋白质剪接元件的表达载体 ,将 3.38kb的 p Ex Sec 的多克隆位点 (Eco R /Bam H )处插入一个含多个酶切位点的 49bp寡聚核苷酸。然后将 p MYB12 9中 intein- CBD基因片段移插入上述经改造的p Ex Sec I中 ,构建成含内蛋白子的表达载体 p Ex IC。根据人神经营养因子 - 3(h NT- 3)的已知 DNA序列 ,设计含 NdeI/Xho I酶切位点的引物 ,用 PCR法从人全血总 DNA中扩增 h NT- 3,再插入 p Ex IC载体中 ,构建成 p Ex IC- h NT- 3重组质粒。经转化后 ,工程菌 E.coli BL 2 1(DE3) /p Ex IC- h NT- 3在 L B培养基中获得融合表达 ,根据 intein的自剪切原理 ,在还原剂 DTT作用下 ,初步获得了约 14k D的 h NT- 3目的蛋白。     

重组质粒p434crohis的构建与表达

根据噬菌体４３４ｃｒｏ的基因序列,合成了一对在Ｃｒｏ的Ｃ－末端含有６个Ｈｉｓ密码子的寡核苷酸（６９ｂｐ）,并在其两端设计了ＰｓｔＩ和ＫａｓＩ两个酶切位点。经粘合、退火后将双股寡核苷酸链分别插入ｐ４３４ｃｒｏ（３．３５ｋｂ）质粒的４３８位（ＰｓｔＩ切点）和６３８位（ＫａｓＩ切点）,构建成含４３４ｃｒｏｈｉｓ基因的重组质粒。其表达产物为Ｃ端含有６个Ｈｉｓ的阻遏蛋白４３４ｃｒｏｈｉｓ。经功能测定表明融合蛋白４３４ｃｒｏｈｉｓ仍具有调节ＤＮＡ转录功能,并用金属亲和层析鉴定了表达产物     

太岳山种子植物区系的初步分析

太岳山位于山西省中南部,植物资源丰富,计有种子植物1403种,538属,102科。本文对该山种子植物区系进行了分析,并与秦岭太白山和关帝山的云顶山植物区系组成作了比较。     

蛋白酶抑制剂在肿瘤治疗中的作用研究

蛋白酶及其抑制剂是非常重要的信号分子,涉及多个关键的人体生理代谢途径,在体内受到严格的调控.蛋白酶抑制剂活性的紊乱可导致多种疾病,诸如心血管和炎症疾病、癌症和神经系统障碍等.已知蛋白酶在肿瘤细胞侵袭和转移过程中扮演着重要的角色.细胞外基质和基底膜重塑是癌细胞侵袭转移过程中的关键环节,这个过程需多个蛋白水解酶的表达和激活.蛋白酶抑制剂的应用在一定程度上可减少由蛋白酶水解引起的肿瘤细胞的侵袭和转移,且它的抑制作用具有不同程度的特异性,可以减缓肿瘤恶性发展的进程.文章对蛋白酶及其抑制剂的靶向治疗药物及临床应用研究进展进行了综述.     

重组绿豆胰蛋白酶抑制剂片段对肠癌细胞SW480迁移的影响

探讨重组胰蛋白酶抑制剂活性片段(LysGP33)的抗肠癌效应.大肠杆菌原核表达LysGP33活性片段,GST亲和层析柱对表达蛋白进行纯化.MTT比色和细胞划痕方法检测LysGP33活性片段对SW480细胞增殖和迁移的影响.结果表明:10 μmol/L LysGP33活性片段对SW480细胞的增殖活性无明显影响,但能够有效地抑制SW480细胞的迁移,并呈现时间依赖效应.绿豆胰蛋白酶抑制剂抑制了肠癌细胞的迁移,在抗肿瘤浸润和转移中具有一定的应用前景.     

三种抗癌中草药单一提剂及其组合剂抑瘤率比较研究

探讨并比较了苦参、半枝莲、白花蛇舌草的单一提剂水/醇提物及其组合剂对人结肠癌细胞株SW620生长的抑制作用.通过体外培养SW620细胞,加入终浓度分别为1、3、5mg.mL-1的单一提剂及其组合剂,采用MTT法测定药物对SW620的增殖抑制率(IR).结果表明单一提剂对SW620体外增殖均有抑制作用,且呈浓度剂量依赖性;中草药醇提剂抑瘤作用均强于水提剂.组合剂中,除半枝莲与白花蛇舌草水提组合剂比单一提剂作用弱外,其余组合剂均强于单一提剂的抑瘤率,且呈浓度剂量依赖性;中草药醇提液组合剂抑瘤作用均强于水提液.说明苦参、半枝莲、白花蛇舌草水/醇提取物对SW620细胞的生长均有抑制作用,醇提剂抗肿瘤有效成分多于水提剂;三种中草药组合剂抗肿瘤效果优于单一提剂(除半枝莲与白花蛇舌草水提组合剂外).     

绿豆胰蛋白酶抑制剂精氨酸活性片段衍生物的克隆表达及生物学活性研究

绿豆胰蛋白酶抑制剂(MBTI)具有赖氨酸和精氨酸两个活性中心.通过化学合成MBTI-Argc编码基因,克隆到原核表达载体pGEX-4T-1并转化到大肠杆菌DH5α.表达的可溶性融合蛋白GST-Argc经GST层析柱纯化后体外测定活性表明,该片段3.3分子对1分子胰蛋白酶活力的抑制率不足5％.DTNB法定量测定二硫键表明,与天然产物相比,Argc的二硫键个数有所减少.GST-Argc对细胞增殖和迁移生物学效应的检测实验发现,GST-Argc能显著促进细胞的增殖和迁移效应.上述结果表明,MBTI-Argc与天然产物相比在结构和功能上都发生了显著变化,表现出类生长因子活性,可能在组织细胞损伤修复及创伤愈合中具有广泛应用前景.     

山西省点地梅属植物

该文基本澄清了山西省报春花科Primulaceae点地梅属Androsace Linn.植物的名称及分布、计有8种,其中北点地梅A·septentrionalis L.为山西省的新纪录。