丙酮酸激酶M1和M2的表达水平与结肠癌发展相关性研究

研究旨在探讨丙酮酸激酶M1(pyruvate kinase M1,PKM1)、丙酮酸激酶M2(pyruvate kinase M2,PKM2)在不同结肠癌细胞中表达情况与结肠癌发展的相关性。通过Western blot、实时荧光定量PCR、丙酮酸激酶活性分析,检测不同恶性程度结肠癌细胞中PKM1、PKM2的蛋白与基因表达水平及丙酮酸激酶活性,分析它们与结肠癌恶性程度的相关性。PKM1和PKM2在人结肠癌细胞和正常结肠上皮细胞中均有表达;PKM1及PKM2的总蛋白和mRNA表达情况与人结肠癌恶性程度无明显相关性;细胞核中PKM1与PKM2的表达量比值与结肠癌恶性程度呈负相关;丙酮酸激酶活性与结肠癌恶性程度呈正相关。细胞核中PKM1与PKM2的表达量比值可以作为结肠癌恶性评价的一个指标。     

一株假单胞杆菌（Pseudomonas sp.）中D—海因酶的分离纯化

菌体经超声波处理后,上清液首先用热变性作为纯化的第一步,后经硫酸铵沉淀和Q－Sepharose fast flow阴离子交换柱,Phenyl-Sepharose fast flow疏水层析,Superose12凝胶排阻层析等步骤,从Pseudomonas2262菌体中获得电泳纯的海因酶,酶活力回收15．6％,比活为18．37U／mg,提纯倍数为59．3。     

人尿胰酶抑制剂部分生化性质

用自制人尿胰酶抑制剂（HUTI）,研究了它的部分生物化学性质。经HPLC和凝胶排阻层析表明,纯HUTI的表观分子量与牛血清白蛋白相当,约为66kD。然而,10％SDS－PAGE分析表明,它的分子量约为40kD,这一差异可能与蛋白分子具有高含量 的糖链有关。另外,对HUTI的氨基酸组成、糖含量和抑制类型等亦进行了研究。     

生命不息 信念不倒——“信念”主题阅读

【阅读小贴士】信念,是一种强大的内在的精神寄托,是托起人生大厦的支柱。对于一个有志者来说,信念是立身的法宝和希望的长河。信念是理想和意志的融合,是精神和品格的交汇;信念,是成功事业的台阶,是战胜困难的力量;信念,是人生的精华、幸福的源泉。     

沙棘叶多酚的分离纯化及其活性分析

近年来，药食同源植物因其绿色环保引起了人们极大的关注。山西省是沙棘资源大省之一，但其开发利用远远不足。沙棘叶中富含黄酮、多酚、萜类等化合物，具备较好的保健与医药价值。因此，本研究优化了沙棘叶中自由酚、结合酚的提取，并对其抑制肿瘤细胞生长活性进行评价。首先比较了80%丙酮、80%乙醇、超纯水、80%甲醇、80%乙酸乙酯5种溶剂提取了沙棘叶自由酚的效率，结果发现沙棘叶甲醇提取物中总酚、黄酮、单宁含量均显著高于其他溶剂，且较其它4种溶剂的提取物，其对结肠癌细胞表现出显著的增殖抑制作用。然后采用不同的水解方法从甲醇提取自由态多酚后的沉淀物中提取沙棘叶结合酚，结果表明碱水解法得到的总酚、黄酮、单宁含量及对肿瘤细胞生长抑制活性显著高于酸水解法，且高于自由酚。为得到较纯的活性多酚，进一步分别选用极性、非极性的大孔树脂进行纯化，筛选出最优树脂为HPD600。然后用30%、60%、95%的乙醇梯度洗脱多酚，发现60%的乙醇洗脱液具较强抑制肿瘤细胞增殖的作用。本研究的实施为我省野生沙棘资源在生物医药领域的开发利用提供了理论依据。     

谷子源可溶性膳食纤维对肝癌细胞HepG2的抑制作用

以谷子、小米和谷糠为原料利用酶法结合化学法获得三种谷子源可溶性膳食纤维（SDF）。通过MTT法检测其对人肝癌HepG2细胞存活率的影响,筛选出最具抗肝癌活性的谷子源可溶性膳食纤维;采用克隆形成实验、细胞划痕实验、流式细胞仪评估抗肝癌效果最显著的谷子源可溶性膳食纤维对HepG2单细胞克隆形成、迁移及凋亡的影响。结果表明：三种谷子源可溶性膳食纤维均能够抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,揭示谷糠可溶性膳食纤维的抗肝癌效果尤为显著,并具有剂量依赖性（P<0.05）,且对人正常肝细胞HL-7702无抑制作用（P>0.05）。此外,克隆形成实验证明谷糠可溶性膳食纤维可显著减少HepG2细胞的克隆存活（P<0.05）;细胞划痕结果揭示谷糠源膳食纤维能够有效抑制HepG2细胞的迁移（P<0.05）;并且流式细胞术检测结果表明谷糠可溶性膳食纤维能够显著诱导HepG2细胞凋亡（P<0.05）。     

后坐-离心独立冗余保险系统解除保险可靠性的Monte-Calo仿真与安全性

1 解除保险可靠性研究1.1 后坐-离心独立冗余保险系统可靠性结构图模型