水稻过敏原基因cDNA原核表达产物的功能分析

在大多数的禾谷类植物中,如小麦、高梁、玉米等,广泛存在着抑制α淀粉酶的蛋白,它们属于禾谷类植物α淀粉酶/胰蛋白酶抑制剂家族.长期以来人们认为在水稻中没有α淀粉酶抑制剂.近年来有人从水稻胚乳中分离到一类称为水稻过敏原(ＲｉｃｅＡｌｌｅｒｇｅｎ)的蛋白,分子量约14～16ｋｕ[1],由一个多基因家族编码[2].根据基因序列比较的结果人们把水稻过敏原归入α淀粉酶/胰蛋白酶抑制剂家族,但对它们是抑制α淀粉酶还是抑制胰蛋白酶尚不清楚.我们通过ＲＴＰＣＲ从水稻未成熟种子中扩增并克隆了一个水稻过敏原基因ＲＡ17[3],并将其转到原核表达载…     

大豆抗营养因子对生长蛋鸡小肠内胰酶活性的影响

采用４８０只海兰褐蛋用雏鸡,以熟豆饼日粮为对照,从３周或９周开始给饲３个水平的生大豆日粮（４％,９％和１３％）,每期每个日粮４个重复,观察不同梯度大豆抗营养因子对不同生理阶段的生长蛋鸡小肠内胰蛋白酶活性的影响。在８,１３和１８周末每个重复随机抽取试鸡２只屠宰,观察小肠内容物胰蛋白酶活性的变化。结果表明,不同生理阶段给饲不同梯度大豆ＡＮＦｓ对８,１３和１８周龄雏鸡小肠内容物胰蛋白酶活性没有显著影响。     

动物胰蛋白酶的纯化、性质及其固定化研究进展

根据近年国内外胰蛋白酶最新研究报道,综述了动物胰蛋白酶的研究进展,包括酶的纯化、特性以及酶的固定化,以期为胰腺蛋白酶的研究、开发和利用提供一定的参考.     

海参内脏酶解制备海参肽工艺

以蛋白水解度和酶解液中海参肽相对分子质量的分布作为指标,考察不同蛋白酶的酶解效果,筛选水解海参内脏的最适合蛋白酶,并通过单因素实验和正交实验优化酶解工艺.实验结果表明:胰蛋白酶的水解效果最佳,可用于水解海参内脏制备海参肽;在底物质量分数为1.0%,加酶量为0.375 1 mkat·g^-1,pH值为8.0,酶解温度为37 ℃,水解时间为5 h的最优酶解条件下,海参内脏的水解度可达到48.90%,酶解液中的多肽(2 000~5 000 u)质量分数为52.68%,寡肽(含氨基酸)(≤2 000 u)质量分数为47.25%.     

两种胰蛋白酶酶解羊肌肉总蛋白样品的质谱分析

摘要: 目的比较国产和进口两种胰蛋白酶对蛋白质的酶解效果,为后续蛋白质组学稳定研究提供依据。方法用超声破碎法提取羊肌肉组织总蛋白,经两种胰蛋白酶酶解后液相色谱串联质谱检测酶解肽段,将结果上传蛋白质序列数据库,利用质谱分析鉴定方法分析比较两种胰蛋白酶的酶解效果,并借助生物信息学工具对所得数据进行分析。结果两种胰蛋白酶酶解同种蛋白质样品产生的肽段长度86%以上均为6-18 个氨基酸,适用于质谱检测。酶解后肽段产生的质量国产胰蛋白酶优于进口胰蛋白酶,国产胰蛋白酶比进口胰酶酶解可多鉴定到19% 的蛋白质和34%的肽段。结论进口、国产的胰蛋白酶在酶解蛋白质方面均可用于质谱检测前蛋白质的酶解消化。但国产胰蛋白酶价格明显低于进口胰酶,更具应用优势。本研究为评价胰蛋白酶酶解效果提供了一种有效、全面的研究方法。     

细胞用胰蛋白酶制备的新工艺研究

用新鲜牛胰脏,采用盐析、层析、超滤方法对胰蛋白酶的提取和纯化工艺进行优化,探索一套胰蛋白酶制备的新工艺.结果表明:此工艺比传统工艺的操作相对简单,周期短,只需一星期;酶比活和收率比传统工艺高,酶比活可达2 368.5 BAEE/mg,收率为0.48%.可为细胞用胰蛋白酶的产业化生产提供一定的理论和实验依据.     

胰蛋白酶切修饰SOD的可行性研究

:37℃下用胰蛋白酶水解SOD ,于 2 ,4,6 ,8和 1 0h对水解样及对照进行聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,同时用邻苯三酚自氧化法测定酶活。结果表明 ,在体外SOD不能被胰蛋白酶水解 ,不同时间处理的SOD PAGE电泳谱带与对照完全一致。即活性染色均出现 4条带 ,蛋白染色均出现 6条带。 4条谱带于酶活性染色图谱中表明有酶活力 ,而另 2条无活力。胰蛋白酶水解处理后SOD活力呈明显下降趋势 ,水解 1 0h酶活降至原来的 80 %左右。与对照 37℃温度处理SOD活力下降趋势相同 ,推测可能是温度使酶变性对活力下降起主要作用。     

鲨软骨粘多糖的酶法提取及组分分析

通过正交实验法分别研究单酶法提取次数和双酶法不同提取方式对鲨软骨粘多糖提取率的影响,从而获得胰蛋白酶和／或木瓜蛋白酶水解鲨软骨提取粘多糖的最佳工艺：并采用乙酸纤维素薄膜电泳和琼脂糖凝胶电泳分析不同提取方法获得的粘多糖的组分．实验结果表明：双酶水解方式比单酶水解方式的软骨降解率和多糖提取率要高;在双酶水解方式中,木-胰方式比胰-木方式能更有效地降解软骨,并且能获得更高的粘多糖提取率;而木瓜蛋白酶法提取的粘多糖纯度比胰蛋白酶法高．     

胰蛋白酶固定化条件及稳定性对比研究

以 MR- MVA树脂为固定化载体 ,对胰蛋白酶的固定化条件进行研究 ,并与溶液酶在保存温度、保存时间、p H稳定性三方面进行对比研究 ,结果表明 :固定化酶在 6 0℃～ 70℃仍具有较高活性 ,保存时间明显增加 ,p H稳定性明显增加