动物Trypsin基因结构、表达及应用研究进展

胰蛋白酶广泛存在于各类动物体内,是动物生长发育中不可缺少的一类催化蛋白质水解的酶.作为动物细胞内重要的水解酶,胰蛋白酶在自身活化以及激活胰分泌的其它蛋白酶类方面起关键作用,一般认为胰蛋白酶的活性与其结构和特性紧密相关.对近年来国内外主要动物胰蛋白酶的作用机理、基因、酶蛋白的氨基酸组成、结构及重组胰蛋白酶的表达等最新研究进展进行了综述,并展望了胰蛋白酶今后的研究发展方向.     

胰蛋白酶酶解文蛤制备文蛤多肽的研究

研究了胰蛋白酶水解文蛤肉制备多肽的最适条件,通过单因素实验和正交实验研究几种影响因素（pH、温度,时间和酶量）对胰蛋白酶水解文蛤肉的影响,分析探讨了影响胰蛋白酶水解文蛤肉的关键因素并确定胰蛋白酶水解文蛤肉的最佳水解条件．结果表明,采用pH8．5、温度50℃、加酶量：（87500：1）U／g、反应时闻5h的水解条件,利用胰蛋白酶水解文蛤肉悬液,可以得到分子量分布在500-3500Da范围内的文蛤多肽．     

喂食Cry1Ac毒素对棉铃虫中肠类胰蛋白酶的影响

苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)在芽胞形成过程中产生的原毒素被敏感昆虫吞食进入消化道后,在中肠蛋白酶的作用下经历一系列酶的剪切活化过程,形成具有杀虫活性的毒性肽.类胰蛋白酶因其在昆虫中肠内蛋白质水解和Bt毒素活化中起着重要作用而受到广泛研究.本研究提取了棉铃虫4龄幼虫的中肠BBMV蛋白,利用SDS-PAGE分析鉴定到喂食Cry1Ac毒素24 h后,棉铃虫幼虫中肠类胰蛋白酶的表达量呈明显下降趋势.该下降趋势很有可能是作为一种昆虫对Bt毒素作用的早期反应,通过影响Bt毒素在中肠中的酶解活化过程,从而为昆虫提供即时保护.     

黑藻抗氧化肽制备及其活性表征

采用胰蛋白酶酶解黑藻蛋白制备抗氧化肽,以酶解物清除2,2'' 联氮 双 3 乙基苯并噻唑啉 6 磺酸 (ABTS) 自由基的百分率为响应值,考察酶底比（酶与底物的比例,以质量百分比表示）、酶解pH和酶解时间对酶解物清除自由基的影响响应面法优化黑藻蛋白的最佳酶解条件为：酶底比86%、时间59 h、酶解pH值 73所得黑藻蛋白酶解物 (1 000 μg/mL) 对ABTS、DPPH自由基、超氧阴离子、羟自由基的清除率分别为679%、401%、501%、253%酶解物经截留分子量3 kDa和10 kDa的滤膜超滤和Sephadex G 25凝胶柱层析分离纯化后,所得黑藻抗氧化肽P 1和P 1 A (1 000 μg/mL) 对ABTS、DPPH自由基、超氧阴离子、羟自由基的清除率分别显著提升到806%、431%、521%、314%和882%、482%、544%、355%研究结果为黑藻抗氧化肽应用于功能性食品或天然抗氧化剂提供理论依据     

改进SDS-底物-PAGE技术鉴定淡水鱼消化酶

改进SDS-底物-PAGE技术以用于分析检测淡水鱼中的消化蛋白酶.主要改进了胶浓度、反应温度和时间以及底物蛋白质浓度和处理时间等因素.试验表明:用150 g/L的分离胶,胶片在4℃30 g/L的酪蛋白溶液中浸泡90 min,然后在35℃保温120 min,结合专一的蛋白酶抑制剂,使用SDS-底物-PAGE技术可以检测出草鱼和青鱼肠道中碱性白蛋酶的种类、数量,并推算出它们的分子质量.草鱼肠道中有3种胰蛋白酶,1种非丝氨酸蛋白酶,它们的分子质量分别为:26.4 kDa3、0.75 kDa、40.5 kDa和约105 kDa.青鱼肠道中有2种胰蛋白酶,2种胰凝乳蛋白酶,1种非丝氨酸蛋白酶,它们的分子质量分别为:27.5 kDa、30.1 kDa、40.5 kDa、42.5 kDa和78.5 kDa.     

新型磁性高分子多孔微球固定化木瓜蛋白酶活性与稳定性研究

以亲水性甲基丙烯酸环氧丙酯为单体,二甲基丙烯酸乙二醇酯为交联剂,在致孔剂存在下通过悬浮聚合法将经过表面改性的Fe3O4磁性纳米粒子包埋其中,合成了一种高亲水性、粒度均匀、分散性好、表面富含功能环氧基的磁性高分子多孔复合微球.并以木瓜蛋白酶为模式酶,进行固定化酶研究.探讨了木瓜蛋白酶的最佳固定化条件,并在优化条件下制备出了高活性、性能好的固定化酶且证明其催化活性与游离酶相比不受显著影响.以酪蛋白为底物,研究了固定化酶的酶学性质和动力学参数.结果表明:固定化酶的最适反应温度80℃,最适反应pH值为7.5,Km值4.25,酶活回收率为55.2%.固定化酶在热稳定性、pH稳定性和操作稳定性上较游离酶均得到了较大幅度的提高.     

330弱碱性树脂固定化漆酶的酶学性质研究

为进一步拓展漆酶在污染物处理领域中的应用,通过330弱碱性树脂作为固定化载体,用戊二醛交联固定化漆酶,并对树脂固定化漆酶的酶学性质进行研究,研究结果表明:固定化漆酶在60℃体现了最佳活性,对温度的承受能力有所提高;固定化漆酶的最适pH在pH=3处,更耐酸碱性;固定化漆酶在放置30 d后,相对于初始酶活仍然保持了50%左右的酶活,循环使用10次后,相对酶活仍能保持初始酶活的45%左右。     

豆腐渣喂猪五不可

<正> 一、不可直接生喂。豆腐渣中含有一种抗胰蛋白酶,它能阻碍猪体内胰蛋白酶对豆类蛋白质的消化吸收,影响长膘。如果在喂猪前将豆渣加热煮沸15分钟,可破坏抗胰     

高产超氧化物歧化梅芽孢杆菌C328菌株产酶培养基的研究

研究了芽孢杆菌(Bacillus cereus)C328 SOD(Superoxide dismutase)生产菌株在发酵培养过程中培养基种类、碳氮比以及补充碳氮源对产酶的影响.结果表明,C328菌株发酵产酶率与培养基种类、复配碳氮比有密切关系.培养基浓度为10%时,对菌株生长及产酶有明显的促进作用,超过13%则抑制SOD酶产生.筛选出最佳产酶发酵农副产品培养基和优化配比组合产酶培养基.     

壳聚糖酶、纤维素酶降解壳聚糖的研究

研究了壳聚糖酶和纤维素酶催化降解壳聚糖,讨论了温度、pH等因素对壳聚糖降解的影响,并得到最佳的反应条件.研究了壳聚糖酶和纤维素酶的热稳定性,以及pH对酶的稳定性的影响.讨论了底物浓度和酶浓度对壳聚糖降解的影响,适当增加底物浓度和酶的浓度,能够加速壳聚糖的降解.