马铃薯蛋白酶抑制因子特性的研究

本文研究了马铃薯蛋白酶抑制因子的稳定性及其对胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的抑制能力,结果表明：该抑制因子对胰蛋白酶活性的抑制作用较弱,最大抑制程度为６５％;对胰凝乳蛋白酶活性的抑制作用较强,抑制程度最高可达９５％以上,并且,它对ｐＨ及温度的变化均具有较强的稳定性．     

大黄三种有效成分对胰蛋白酶活性及结构的影响

大黄素、大黄酸、大黄酚对胰蛋白酶活性均有一定程度的抑制作用.当有效成分浓度为2.5 mg·L~(-1)时,长濑法测定表明它们对胰蛋白酶的抑制率分别为38.0%、48.2%及35.4%.紫外吸收光谱、荧光光谱和圆二色谱研究表明三种有效成分影响胰蛋白酶酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸残基的微环境,改变了胰蛋白酶结构.圆二色谱计算发现,大黄素、大黄酸、大黄酚分别使胰蛋白酶二级结构中口α-螺旋含量减少了2.8%、3.2%和2.5%,β-折叠含量增加了1.6%、2.O%和1.4%.     

曲酸与胰蛋白酶相互作用的光谱学研究

研究了曲酸对胰蛋白酶活性的影响,以及曲酸处理后胰蛋白酶紫外光谱、荧光淬灭光谱、同步荧光光谱和三维荧光光谱的变化．结果显示曲酸对胰蛋白酶具有激活作用;二者相互作用后,曲酸可以使胰蛋白酶的紫外吸收强度增强,但却使得蛋白内源荧光强度下降;Stern-Volmer作图显示曲酸对胰蛋白酶的荧光淬灭为静态淬灭作用;用同步荧光光谱和三维荧光光谱探讨了曲酸对胰蛋白酶构象的影响．     

苦荞胰蛋白酶抑制剂提取方法的研究

分别用磷酸缓冲液、０．２ｍｏｌ／Ｌ硫酸、０．４ｍｏｌ／Ｌ三氯乙酸以及水提法从苦荞种子中提取胰蛋白酶抑制剂,对四种提取方法所得产物的抑制活性及柱层析纯化结果比较表明：以磷酸缓冲溶液为提取介质,经热变性、盐析及ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱层析分离后苦荞胰蛋白酶抑制剂的活性和得率较高,是较为理想的提取方法。     

葡聚糖-卵粘蛋白亲和超滤载体的制备及应用

为探讨葡聚糖-卵粘蛋白亲和超滤载体的制备机理及应用效果,首先用相对分子质量为200万的葡聚糖,经环氧氯丙烷活化,以卵粘蛋白为配基合成水溶性载体,然后用该载体对胰蛋白酶进行亲和超滤纯化并进行相关的紫外、红外光谱分析.结果表明:载体的活化历程为双分子亲核取代反应(SN2);合成的载体对胰蛋白酶的吸附符合Langmuir吸附...     

离子液体双水相中单宁酸与胰蛋白酶的相互作用研究

运用荧光光谱和紫外光谱,研究在离子液体双水相体系中单宁酸与胰蛋白酶的相互作用.结果表明,TA对TP产生荧光猝灭作用,且属于静态猝灭过程.计算得到在298 K和310 K下的结合常数分别为1.771×105 L·mol-1和1.216×105 L·mol-1,结合位点数分别为1.3和1.2.热力学参数表明TA与TP之间的相互作用力类型为疏水作用.     

菜豆豆荚发育过程中抗营养因子的动态变化

凝集素、皂苷、植酸和胰蛋白酶抑制剂是菜豆中主要的抗营养因子。以矮生和蔓生两种生长习性的菜豆豆荚为材料,测定了其6个发育时期抗营养因子的变化规律。结果表明:两个品种的豆荚发育期,植物凝集素含量及胰蛋白酶抑制剂活性均呈上升趋势,在21~28 d达到峰值。矮生及蔓生菜豆凝集素含量分别从0.35 mg/g和0.36 mg/g上升到0.92 mg/g和0.54 mg/g,胰蛋白酶抑制剂活性分别从0.18 TIU/g和0.50 TIU/g上升到5.02 TIU/g和4.68 TIU/g;而皂苷和植酸含量均呈下降趋势,矮生和蔓生菜豆皂苷含量分别从55.21 mg/g和43.33 mg/g下降到18.90 mg/g和11.79 mg/g;植酸含量分别从15.07 mg/g和14.57 mg/g下降到14.33 mg/g和12.19 mg/g。综合形态发育及抗营养因子的变化规律发现,花后14~21 d豆荚趋于成熟,抗营养因子含量较低,食用较佳;花后28 d籽粒发育饱满,抗营养因子含量较高,食用此时期豆荚及籽粒时应充分烹饪,降低抗营养因子的影响,提高营养价值。     

萨尔瓦多型银合欢种子胰蛋白酶抑制剂的分离纯化与性质研究

本研究从萨尔瓦多型银合欢(Leucaena leucocephala cv.Salvador)种子中分离纯化出一种新的胰蛋白酶抑制剂,即萨尔瓦多型银合欢种子胰蛋白抑制剂(Trypsin Inhibitor from Leucaena leucocephala cv.Salvador seeds,LlsTI).成熟的种子经粉碎,生理盐水浸提之后,经CM-Sepharose阳离子交换层析得到LlsTI纯品.该胰蛋白抑制剂为19.8kDa的单体蛋白.其N末端测序结果为KGSYLRDVRG,而其内部则含有一段KTAPLVVGFLK的序列,与已知的蛋白酶抑制剂序列都不同,表明LlsTI为一种新的胰蛋白酶抑制剂,同时也含有一部分与已知Kunitz型抑制剂相保守的碱基.LlsTI对胰蛋白酶的摩尔抑制比近似为1∶1.其对于胰蛋白酶属竞争性抑制剂,其Ki值为2.77×10-10 M.LlsTI对胰蛋白酶的抑制活力表现出对高温和pH变化较高的耐受性.但其活性受100mM DTT影响.本研究对LlsTI对其它丝氨酸类蛋白酶的抑制作用也做了测定,其中只有胰蛋白酶的活性受到了抑制.根据圆二色谱的分析结果,LlsTI是一种αβ蛋白,其二级结构在室温下的水和缓冲液Tris-HCl(pH7.5)中组成相似.     

胰酶双水相萃取技术初探

采用双水相萃取法分离纯化胰酶中的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶,通过正交实验选择效果最佳的组合.实验表明,采用19%PEG6000和12%(NH4)2SO4萃取胰蛋白酶的效果最佳;采用16%的PGE2000和12%的(NH4)2SO4萃取胰淀粉酶的效果最佳;采用30%PGE4000和17.5%的NaH2PO4萃取胰脂肪酶的效果最佳.     

胰蛋白酶抑制剂的药用功能

胰蛋白酶抑制剂是具有抑制胰蛋白酶作用的一类物质.该类物质的来源不同,其活性和作用的酶也不同.基于对近几年国内外相关文献的分析,综述了其多种临床应用功能,说明胰蛋白酶抑制剂是人类重要的药物资源.