不对称还原苯乙酮酸甲酯的生物转化菌种选育及条件优化

选用酵母菌、乳酸菌、粪链球菌、假丝酵母等4个种属共15株菌株,研究其对苯乙酮酸甲酯的不对称还原催化特性.以具有R(-)-扁桃酸甲酯较高转化活力的菌株S.cNo.1、S.cNo.3、S.cNo.9作为出发菌株,采用紫外与微波复合诱变的方法,筛选获得S.c3.5.16突变株.考察培养温度、pH值对该突变株转化活力的影响,结果表明,S.c3.5.16菌株的R(-)-扁桃酸甲酯生物转化最适反应条件为培养基pH6.5、温度38℃,苯乙酮酸甲酯转化为扁桃酸甲酯的得率达到99.3%,R(-)-扁桃酸的光学纯度达到95.5%e.e..     

海参内脏酶解制备海参肽工艺

以蛋白水解度和酶解液中海参肽相对分子质量的分布作为指标,考察不同蛋白酶的酶解效果,筛选水解海参内脏的最适合蛋白酶,并通过单因素实验和正交实验优化酶解工艺.实验结果表明:胰蛋白酶的水解效果最佳,可用于水解海参内脏制备海参肽;在底物质量分数为1.0%,加酶量为0.375 1 mkat·g^-1,pH值为8.0,酶解温度为37 ℃,水解时间为5 h的最优酶解条件下,海参内脏的水解度可达到48.90%,酶解液中的多肽(2 000~5 000 u)质量分数为52.68%,寡肽(含氨基酸)(≤2 000 u)质量分数为47.25%.     

江蓠藻膳食纤维的降血糖及抗氧化作用

观察江蓠藻膳食纤维对糖尿病小鼠的血糖,以及血清中某些抗氧化指标的效应,探讨其降血糖的可能作用机理.结果表明,江蓠藻膳食纤维能显著降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖值,且以中剂量(0.4 g.kg-1)江蓠藻膳食纤维的降血糖作用最佳.此外,江蓠藻膳食纤维可降低四氧嘧啶糖尿病小鼠血清中的丙二醛(MDA)浓度,提高超氧化物歧化酶(SOD)活性,改善糖尿病小鼠的氧化应激水平.     

红藻伊谷草制备高强度琼脂的工艺优化

通过单因素实验和正交试验,考察伊谷草制备高强度琼脂工艺的重要影响因素,获得优化的伊谷草制备超高强度琼脂的工艺条件,即碱(NaOH)质量分数为10.0%,处理温度为80℃,处理时间为2.0h,提胶时间为3.0h.在此工艺条件下伊谷草琼脂的提取率可达13.87%,产品琼脂的凝胶强度可达1 428g.cm-2(Gel质量分数为1.5%,20℃),超过国家标准对于超高强度琼脂的要求.     

微生物转化苯乙酮酸合成R-(-)- 扁桃酸

考察了酵母菌株FD11b不对称还原苯乙酮酸生产R-(-)-扁桃酸的重复使用性能.菌株FD11b在持续6批次(14 d)的还原反应中,一直保持着较高的催化还原活性,且目标产物R-(-)-扁桃酸的对映体过量值(e.e.值)均高于96.5%.在30 L发酵罐上进行Fed-Batch放大试验,当菌体浓度(细胞干重,以下同)为12.5 g/L,底物苯乙酮酸浓度控制在20~30 mmol/L时,还原反应49 h,产物浓度可达125 mmol/L,产物得率为96.1%,e.e.值为98.5%.     

手性药物扁桃酸的理化特性测定

采用pH值电位滴定法测定了扁桃酸的离解常数,采用高效液相色谱法考察了扁桃酸在不同溶剂中的溶解度曲线和在苯-水体系中于不同pH值条件时的分配率,建立了热苯萃取和冷却结晶的扁桃酸纯化工艺.研究结果显示,扁桃酸的离解常数pKa值为5.28;扁桃酸在水和苯中的溶解度曲线可分别表示为:S=38.756e0.0354t和S=0.2746e0.0649t;扁桃酸在水和苯中的溶解度差值曲线可分别表示为:ΔS/S1=0.1196t-2.712和ΔS/S1=0.3688e0.0723t;苯是最适合用于冷却结晶的溶剂;热苯萃取扁桃酸的苯水比例可选为1∶1;降低pH值有利于扁桃酸在苯中的分配.     

调经益母胶囊中盐酸水苏碱的HPLC测定

建立一种调经益母胶囊中盐酸水苏碱含量的离子交换高压液相色谱(HPLC)测定方法.色谱条件:色谱柱为Hypersil SCX(250mm×4.6mm,5μm);流动相为12mmol.L-1磷酸二氢钾溶液(含体积分数为0.02%三乙胺和体积分数为0.2%冰乙酸);检测波长为192nm;流速为1.0mL.min-1;柱温为30℃.实验结果表明:盐酸水苏碱在0.162 8～0.814 0μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 95),平均加样回收率为97.31%,峰面积积分值的相对标准偏差为0.88%(n=6).     

固定化细胞海藻酸钙凝胶内的扩散特性

采用浸入法,测定葡萄糖、苯乙酮酸和扁桃酸等3种物质在固定化酵母细胞海藻酸钙凝胶内的有效扩散系数.实验结果表明,相同条件下,葡萄糖的有效扩散系数De随着海藻酸钠浓度的提高而下降,优化的海藻酸钠质量分数为0.02.葡萄糖的有效扩散系数大于扁桃酸和苯乙酮酸.初始包埋量为54.4 g.L-1的固定化酵母细胞经增殖8 h后,扁桃酸在胶珠内的有效扩散系数为0.36×10-4cm2.min-1,明显小于未增殖或未包埋细胞.     

醇沉-萃取法提取(2S,5S)-2,5-己二醇

利用醇沉-萃取法,从生物转化发酵液中提取(2S,5S)-2,5-己二醇,并考察醇沉、萃取和结晶的工艺条件.结果表明,醇沉时,加入的乙醇与浓缩发酵液的最佳体积比为2∶1,pH值对醇沉效果影响显著,强碱和强酸条件下可使大部分杂质析出.经乙酸乙酯连续5次萃取,醇沉浓缩液中2,5-己二醇的萃取率达75.0%.通过优化后的工艺进行分离纯化,发酵液中2,5-己二醇总提取率为49.2%,纯度≥98.0%,(2S,5S)-2,5-己二醇的光学纯度值在提纯前后均为94.5%.