钙延缓黄瓜子叶衰老及其对RNase与活性氧清除有关酶活性的反应

在黄瓜子叶衰老期间外源 Ca~(2+)延缓内源结合 Ca~(2+)和总 Ca~(2+)含量的降低.Ca~(2+)处理5d的子叶,各亚细胞结构部分 RNase 活力均有明显的抑制效应,但不同亚细胞组分的反应程度不尽相同,线粒体对外源 Ca~(2+)处理最敏感,叶绿体则较迟钝,1mMCa~(2+)处理的子叶,SOD 活力高于对照47%.10mMCa~(2+)处理的子叶仅是对照的48%,Ca~(2+)对衰老过程中 SOD 活力作用可能与体内 Ca·CaM 系统有关.子叶衰老过程中过氧化物酶和过氧化氯酶活力均受到 Ca~(2+)的刺激.但 Ca~(2+)对过氧化氢酶活力刺激效应比过氧物酶小得多.上述结果表明,Ca~(2+)的作用可能与体内自由基清除有关的酶有关;外源 Ca~(2+)对暗诱导黄瓜子叶过氧化物酶作用通过释放胞壁以离子键结合的酶来完成.     

Ca~(2+)和CaM在IAA诱导小麦芽鞘伸长中的作用

应用 Ca~(2+)抑制剂和 CaM(钙调素)拮抗剂,对 Ca~(2+)和 CaM 在 IAA诱导小麦芽鞘伸长中的作用进行了研究.结果表明,小于0.5 mmol/L Ca~(2+)可明显促进小麦芽鞘切段伸长,并能加强 IAA 对伸长的促进,1mmol/L 以上Ca~(2+)则有抑制伸长的作用.Ca~(2+)通道抑制剂 Co~(2+)和 La~(3+)、CaM 拮抗剂CPZ(氯丙嗪)明显抑制芽鞘切段伸长,也降低 IAA 促进伸长的效应.因而,可以认为 Ca~(2+)介入 IAA 诱导细胞的伸长过程,Ca~(2+)通过 CaM 发挥其生理功能.     

金属离子竞争结合钙调素的电化学行为研究

为了探讨金属离子与Ca~(2+)对钙调素(CaM)的竞争结合作用,在pH值为6.5含2mmol/L[Fe(CN)6]3-/4-的0.15 mol/L的NaCl溶液中,用交流阻抗法研究了金属离子如Ca~(2+),Cd~(2+),Al~(3+),Fe~(3+)结合及竞争结合钙调素的电化学行为。结果表明:金属离子与CaM的结合能力可以通过溶液中[Fe(CN)_6]~(3-/4-)在钙调素自组装膜修饰金电极上的电化学反应电阻的变化来判断,Ca~(2+),Cd~(2+)和Al ~(3+)都能与CaM结合,Fe~(3+)不能与CaM结合,且Ca~(2+)与CaM结合能力要比Al 3+强;Ca~(2+)在CaM上的结合位点与Cd~(2+)相同,与Al~(3+)不同。交流阻抗法为研究金属离子与CaM的竞争结合行为提供了一个新方法。     

黄瓜组织培养与蛋白含量及抗氧化酶活性的变化

通过对黄瓜子叶组织培养,研究了黄瓜子叶外植体龄对愈伤组织诱导的影响及体内可溶性蛋白含量,CAT,POD,SOD几个生理指标的变化及其与愈伤组织诱导的关系.结果表明:接种在MS(MS+6-BA(1 mg/L)+AgNO3(2 mg/L))培养的3～5 d子叶外植体的愈伤组织诱导能力最强.子叶的抗氧化酶活性及蛋白含量与诱导愈伤组织能力之间存在明显相关性,CAT和SOD与愈伤组织诱导呈负相关,POD和蛋白含量与愈伤组织诱导呈正相关.     

钾和菊酸诱导的离体黄瓜子叶生根与吲哚乙酸氧化酶和质膜H~＋－泵ATP酶之间的关系

本文研究了钾和菊酸诱导的离体黄瓜子叶生根中吲哚乙酸氧化酶活性的变化和钒酸钠（质膜Ｈ＋－泵ＡＴＰ酶专一性抑制剂）对钾与菊酸诱导生根的影响。试验结果表明：①ＫＣｌ和菊酸钠促进生根的最适浓度分别为１３．４ｍｍｏｌ／Ｌ和０．６ｍｍｏｌ／Ｌ．②钾和菊酸诱导的离体黄瓜子叶生根过程中毫克干重子叶的ＩＡＡ氧化酶活性逐天增加，而毫克鲜重子叶的ＩＡＡ氧化酶活性第三天达到高峰，之后趋于恒定。③１０─３００μｍｏｌ／Ｌ的钒酸钠明显抑制钾和菊酸诱导的离体黄瓜子叶的生根。可能钾和菊酸对于离体黄瓜子叶生根的促进作用与质膜Ｈ~＋－泵ＡＴＰ酶密切相关。     

瓜叶菊组织培养和植株再生的研究

瓜叶菊(Cincraria Cruenta Masson)叶培养在Ms添加NAA和BA的培养基上,诱导出愈伤组织开分化出小叶,降低NAA含量同时提高BA含量,愈伤组织中分化出绿色芽。将芽转移利1/2Ms加0—5mg/2NAA的生根培养基上,10天可诱导出根,45天后可移栽成活。 不同的NAA含量影响不定根的发生类型。微量的BA抑制根的形成。滤纸桥有利于愈伤组织、芽及根的生长。     

一氧化氮可能参与细胞外钙调素诱导蚕豆气孔关闭的过程

细胞外钙调素(CaM)被发现能够调节蚕豆及拟南芥气孔运动,而且G蛋白、H_2O_2及Ca~(2 )参与这一过程．从接受刺激到引起气孔关闭保卫细胞要经历复杂的信号转导,因此细胞外CaM调控气孔运动的信号转导途径还需要深入探讨．研究中以蚕豆下表皮条为材料,用表皮条生物分析和荧光显微技术研究了一氧化氮(NO)在细胞外CaM促进气孔关闭过程中的作用．结果表明:细胞外CaM能诱导保卫细胞内NO升高,一氧化氮合酶(NOS)抑制剂N~G-氮-L-精氨酸-甲酯(L-NAME)和NO清除剂2-苯-4,4,5,5-四甲基咪唑-1-氧-3-氧化物(PTIO)抑制了这一过程,而硝酸还原酶(NR)抑制剂NaN_3则没有抑制作用;L-NAME和PTIO也抑制细胞外CaM诱导的气孔关闭过程,而NaN_3不能抑制这一过程．说明细胞外CaM主要通过NOS途径诱导NO合成,从而诱导气孔关闭．质膜Ca~(2 )通道抑制剂及Ca~(2 )螯合剂处理实验结果表明,细胞外CaM对保卫细胞内NO的诱导过程依赖Ca~(2 )内流．文中结果为NO参与细胞外CaM调节气孔运动的过程提供了直接证据．     

NAA对薄壳山核桃扦插生根过程中内源激素含量变化的影响

采用当年生薄壳山核桃休眠枝为插穗,分别进行不同NAA浓度处理的硬枝扦插试验,研究薄壳山核桃硬枝插穗在扦插生根过程中内源激素的变化。结果表明:1500 mg/L NAA处理插穗的生根效果最佳,生根率可达79.6%;2通过外源激素处理,IAA、ZR、GA、ABA 4种内源激素在插穗不定根形成过程中含量发生相应改变,从而影响插穗的生长;3在不定根形成初期,即NAA处理后30 d左右,与对照组相比,各处理组插穗的IAA和ZR含量处于较高水平,GA和ABA含量处于较低水平;4薄壳山核桃插穗愈伤组织的形成、不定根的产生和伸长生长等都主要受IAA/ZR调控。     

杂种鹅掌楸扦插生根过程中内源激素的变化

以杂种鹅掌楸为材料,应用酶联免疫吸附测专法(ELISA),研究杂种鹅掌楸插条在扦插生根过程中内源激素含量的变化。结果表明：在不定根发生过程中．5种内源激素在插穗基部和叶内含量总体呈上升趋势,少数下降。各种内源激素在叶内的含量远远高于插穗基部。外源激素(300mg／kgNAA和100mg／kgIBA)处理提高了iPAs和IAA在插穗基部和叶内的含量．却降低了ZRs和ABA的含量,对GA1/3的作用有些不稳定。杂种鹅掌楸插穗内IAA的含量很低．而插穗和叶内ABA的含量却很高,这对不定根的发生很不利。     

IAA,IBA,NAA和2,4—D对槐树试管苗生根的影响

ＩＡＡ和ＩＢＡ诱导槐树试管苗形成的不定根细而长，直接来源于茎，根系发达．ＮＡＡ诱导试管苗基部先形成愈伤组织，然后由愈伤组织上产生不定根，其根短而粗．ＮＡＡ诱导的生根率最高，但其根生长缓慢，表面常愈伤组织化．２，４－Ｄ促进苗基部产生大量的愈伤组织，对生根有抑制作用     

钙离子拮抗剂治疗高血压病患者过程中细胞内外钙调素水平的变化

从分子水平研究钙离子拮抗剂治疗高血压病的机制。用反转录聚合酶链反应法测定淋巴细胞内钙调素（ＣａＭ）基因的ｍＲＮＡ转录水平以及用ＲＩＡ法测定细胞外（即血清）ＣａＭ浓度,借以观察在用钙离子拮抗剂治疗高血压的过程中,细胞内外ＣａＭ水平的改变。发现随着正规服用钙拮抗剂治疗时间的延长,高血压患者淋巴细胞内ＣａＭ基因ｍＲＮＡ的转录水平亦受到抑制。服用钙拮抗剂时间长于３个月者,ｍＲＮＡ的转录水平显著降低（Ｐ＜０．０１）,而治疗时间在１个月之内者,ＣａＭ基因的转录水平无明显变化（Ｐ＞０．０５）。对于细胞外ＣａＭ的水平,在服用钙拮抗剂治疗时间＜１个月者,血清ＣａＭ浓度下降,而长期服用钙拮抗剂的患者则相对增高,但均无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。在用钙拮抗剂治疗高血压的过程中,细胞内和细胞外ＣａＭ的水平均发生变化。用钙离子拮抗剂治疗高血压病长于３个月者,细胞内ＣａＭ基因的ｍＲＮＡ转录水平明显受到抑制,而细胞外ＣａＭ浓度则无论服用钙离子拮抗剂时间长短,变化均不显著     

番茄高效再生体系的建立

以砧木1号番茄的子叶和下胚轴为外植体进行离体组织培养,研究了IAA和6-BA及NAA和6-BA不同激素配比对外植体诱导不定芽及生根的影响。结果表明:培养基MS+0.2mg/L IAA+1.0mg/L 6-BA为诱导子叶外植体愈伤组织和不定芽的最适培养基,而MS+0.5mg/L IAA+1.0mg/L 6-BA为诱导下胚轴外植体愈伤组织和不定芽的最适培养基;诱导不定芽生根的最佳培养基为MS+0.1mg/L IAA。     

PEG处理下葡萄试管苗脯氨酸及内源ABA含量变化的研究

用不同浓度的PEG处理全球红葡萄生根试管苗，造成一定程度的水分亏缺，观察葡萄试管苗在水分胁迫下的生理反应。结果表明：PEG处理导致葡萄试管苗脯氨酸的积累和内源ABA的迅速增加。6％PEG胁迫处理66h时脯氨酸含量达到高峰，72h又有所下降；而3％PEG胁迫处理脯氨酸含量仍保持持续上升趋势。内源ABA在12h内达到第一个峰值，含量为对照的两倍多，并维持比对照略高的水平；而6％PEG胁迫处理植株在48h时ABA再次积累，含量比对照高100多倍。     

离体黄瓜子叶生根试法的应用

应用离体黄瓜子叶生根试法对十一种天然及合成的化合物进行了生根活性的测定，实验结果表明：吲哚乙酸和乙烯释放物质乙烯利显著促进离体黄瓜子叶的生根，而激动素、赤霉素及脱落酸则抑制离体黄瓜子叶生根；植物生长延缓剂中的多效唑、矮壮素、丁酰肼显著促进生根；含氮化合物硫酸铵、精胶和精氨酸对离体黄瓜子叶生根也有明显的促进作用．上述结果与用绿豆和菜豆下胚轴生根试法等则得的结果一致，进一步完善了这一新的生根测定方法．     

蒙古黄芪的组织培养研究

对蒙古黄芪无菌苗的不同外植体(叶片、子叶、下胚轴)进行组织培养研究.结果表明:该三种外植体分别在MS BA2.0mg/L NAA2.0mg/L、LS BA2.0mg/L NAA0.1mg/L、MS BA2.0mg/L NAA2.0mg/L 培养基上的愈伤组织诱导率很高;在这三种外植体中,子叶和下胚轴所诱导的愈伤组织在继代培养基上能分化出芽;试管苗在1/2MS NAA5.0mg/L培养基上生根效果好.     

不同因子对“金丰一号”金银花生根的影响

研究了基本培养基,IBA,活性炭和蔗糖对“金丰一号”金银花生根的影响,结果表明:基本培养基为1/2 MS时,生根效果较佳;IBA 3 mg·L-1,时,试管苗生长较好,生根也快;从节约成本出发,蔗糖的浓度为15 g·L-1对生根较为有利.即适于生根的培养基为1/2 MS+IBA 3 mg·L-1+0.2 g·L-1活性...     

观赏羽扇豆生根过程中内源IAA和ABA含量变化

采用酶联免疫方法（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）,对观赏羽扇豆品种尖塔（Minaretie）和奖品（Russell Prize）组培苗生根过程中内源吲哚乙酸（3-Indolyl-acetic acid,IAA）和脱落酸（Abscisic acid,ABA）含量进行了测定,总结IAA和ABA含量与组培生根的相关性,为其微体快繁和工厂化生产提供理论依据。结果表明：（1）IAA含量变化为单峰曲线,呈现“升高-降低-升高”的变化趋势;（2）ABA含量在不定根形成期呈下降并达到最低;（3）IAA含量与生根指数正相关,ABA含量与生根指数负相关,二者协同影响生根。     

ABA与Ca~(2+)-CaM对草莓叶片抗氧化防护酶系统影响

用外源植物激素脱落酸ABA(abscisic acid,ABA)处理草莓叶片,草莓体细胞的抗氧化防护酶活性升高,表明ABA作为植物信号分子可以诱导草莓这一对干旱较为敏感的植物的逆境响应.Fluridone处理未能抑制草莓细胞对外源ABA的响应.进一步研究表明,钙调素(Calmodulin,CaM)作为Ca2+传感蛋白,介导了草莓叶片细胞ABA的下游信号事件.     

钙调素拮抗剂对荷瘤小鼠主要器官钙调素（CaM）水平的影响

本文采用磷酸二酯酶（ＰＤＥ）法,测定了小檗胺衍生物ＥＢＢ对荷Ｓ１８０瘤小鼠的主要器官和瘤体ＣａＭ含量的影响。实验结果表明,ＥＢＢ具有使荷瘤后小鼠脑、肺、肝、脾、肾五个主要器官ＣａＭ由不正常趋向正常的能力,而已知抗肿瘤药物丝裂霉素和环磷酰胺单独使用时此种能力较弱,但这两种抗肿瘤药物与ＥＢＢ联合作用时,能使荷瘤鼠诸器官的ＣａＭ水平趋向正常。结果提示,专一性强的ＣａＭ拮抗剂在抑制肿瘤的同时可能还具有维护     

Abscisic acid controls calcium-dependent egress and development in Toxoplasma gondii

Calcium controls a number of critical events, including motility, secretion, cell invasion and egress by apicomplexan parasites. Compared to animal and plant cells, the molecular mechanisms that govern calcium signalling in parasites are poorly understood. Here we show that the production of the phytohormone abscisic acid (ABA) controls calcium signalling within the apicomplexan parasite Toxoplasma gondii, an opportunistic human pathogen. In plants, ABA controls a number of important events, including environmental stress responses, embryo development and seed dormancy. ABA induces production of the second-messenger cyclic ADP ribose (cADPR), which controls release of intracellular calcium stores in plants. cADPR also controls intracellular calcium release in the protozoan parasite T. gondii; however, previous studies have not revealed the molecular basis of this pathway. We found that addition of exogenous ABA induced formation of cADPR in T. gondii, stimulated calcium-dependent protein secretion, and induced parasite egress from the infected host cell in a density-dependent manner. Production of endogenous ABA within the parasite was confirmed by purification (using high-performance liquid chromatography) and analysis (by gas chromatography-mass spectrometry). Selective disruption of ABA synthesis by the inhibitor fluridone delayed egress and induced development of the slow-growing, dormant cyst stage of the parasite. Thus, ABA-mediated calcium signalling controls the decision between lytic and chronic stage growth, a developmental switch that is central in pathogenesis and transmission. The pathway for ABA production was probably acquired with an algal endosymbiont that was retained as a non-photosynthetic plastid known as the apicoplast. The plant-like nature of this pathway may be exploited therapeutically, as shown by the ability of a specific inhibitor of ABA synthesis to prevent toxoplasmosis in the mouse model.