钙离子拮抗剂治疗高血压病患者过程中细胞内外钙调素水平的变化

从分子水平研究钙离子拮抗剂治疗高血压病的机制,用反转录聚合酶链反应法测定淋巴细胞内钙调素（ＣａＭ）基因的ｍＲＮＡ转录水平以及用ＲＩＡ法测定细胞外（即血清）ＣａＭ浓度,借以观察在用钙离子拮抗剂治疗高血压的过程中,细胞内外ＣａＭ水平的改变,发现随着正规服用钙拮抗剂治疗时间的延长,高血压患者淋巴细胞内ＣａＭ基因ｍＲＮＡ的转录水平亦受到抑制,服用钙拮抗剂时间长于３个月者ｍＲＮＡ的转录水平显著降低（Ｐ〈０．     

重组人钙调素的表达及其McAb的制备与精子CaM定位

用基因重组技术构建人钙调素基因Ⅲ（ｈＣａＭⅢｃＤＮＡ）表达载体ｐＢＶ／ｈＣａＭⅢ,并在大肠杆菌ＤＨ５α中经热诱导获得可溶性ＣａＭ蛋白的高效表达．将纯化的重组ｈＣａＭ与异型双功能剂ＳＰＤＰ及鼠血清白蛋白（ＭＳＡ）交联,免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠,用常规细胞融合技术制备单克隆抗体（ＭｃＡｂ）,得到３株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞．间接ＥＬＩＳＡ和斑点免疫结果证实,三种单克隆抗体均与自制的ｒｈＣａＭ和ＣａＭ标准品起特异反应．用免疫组化法对精子中ＣａＭ定位,发现ＣａＭ主要分布于精子头颈部,不育组ＣａＭ＋精子率（（４５．０±７．５）％）显著低于生育组（（６８．５±１０．５）％）．     

缺氧对脑星状细胞GAPDH和β—Actin基因表达的影响

目的：样本ＲＮＡ加样量的差异是影响Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交ＲＮＡ分析和反转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）半定量分析的重要因素。因５－磷酸甘油醛脱氢酶（ＧＡＰＤＨ）和β肌动蛋白（β－ａｃｔｉｎ）ｍＲＮＡ水平一般相对恒定,常用于基因表达研究时样本加样量的校正。但有报道表明某些因素对ＧＡＰＤＨ和β－ａｃｔｉｎ的ｍＲＮＡ水平有一定影响。脑星状细胞（ＡＣ）是近年来神经科学的研究热点之一,有关其基因的研究得到广泛的重视     

钙拮抗剂对肾性高血压肾脏细胞Ca^2＋超负荷的影响

将３０例大鼠随机分为正常对照组、手术组及手术后用药组手术组及手术后用药组通过钳夹大鼠双肾动脉制成肾血管性高血压动物模型，其中术后用药组给予钙拮抗剂，测定其肾小管细胞内Ｃａ２＋浓度，结果分别为：正常组ｘ＝（１．７２７±１．４２９）×１０－７ｍｏｌ／Ｌ（ｎ＝６），手术组ｘ＝（４２．８３１±２０．０８２）×１０－７ｍｏｌ／Ｌ（ｎ＝６），用药组ｘ＝（１８．５７５±７．０４５）×１０－７ｍｏｌ／Ｌ（ｎ＝６），统计分析Ｆ＝１４．０８，Ｐ＝０．０００４，在α＝０．０５水准，三组细胞内Ｃａ２＋浓度总的差别有统计学意义（Ｐ＜０．０１），两两比较：正常组与手术组Ｑ＝７．４６（Ｐ＜０．０１），正常组与用药组Ｑ＝３．５６（Ｐ〈０．０５），手术组与用药组Ｑ＝４．４（Ｐ＜０．０５），表明钙拮抗剂能部分阻止细胞内Ｃａ２＋浓度超负荷。     

哮喘患者肺泡巨噬细胞中IL－6mRNA表达的研究

应用逆转录酶链反应及索氏转移杂交技术分析过敏性支气管哮喘患者（激素治疗组９例，非激素治疗组１２例）及正常对照组（１０例）肺泡巨噬细胞（ａｌｖｅｏｌａｒｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ，ＡＭ）中白细胞介素一６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－６，ＩＬ－６）的ｍＲＮＡ表达。ＩＬ－６／β－ａｃｔｉｎ比值表示。结果发现未用激素治疗的哮喘患者ＡＭ的ＩＬ－６／μ－ａｃｔｉｎ为０．６６±０．３２，显著高于正常对照者（０．３４±０．１３，Ｐ＜０．０１）及激素治疗组（０．４１±０．１５，Ｐ＜０．０５）。提示表达ＩＬ－６的ＡＭ在哮喘的发病机理中可能具有重要的作用，而皮质激素治疗哮喘的机制之一可能与其抑制ＡＭ表达及产生ＩＬ－６的能力有关。     

酸枣仁皂甙A──新型的钙调蛋白天然拮抗剂

报导了具有宁心、安神等功效的中药酸枣仁的主要成分之一——酸枣仁皂甙Ａ， 它是钙调蛋白（ＣａＭ）的一种新型天然拮抗剂，以不含氮而区别于其它天然拮抗剂。酸 枣仁皂甙Ａ能有效地抑制ＣａＭ活化的环腺苷酸磷酸二酯酶（ＰＤＥ）的活力，其ＩＣ５０值 为 １５μｍｏｌ／Ｌ，是目前已发现的拮抗能力较强的一种 ＣａＭ天然拮抗剂。动力学研究表 明，酸枣仁皂甙Ａ对ＣａＭ活化ＰＤＥ活力的抑制是按非竞争性抑制方式进行的。     

VP—16诱导的鼻咽癌细胞亚系多药耐受表型的研究

经ＶＰ－１６大剂量短暂冲击加递增低浓度诱导方法建立了鼻咽癌耐药细胞亚纱ＬＣＥ／ＶＥ,用ＲＴ－ＰＣＲ和ＰＣＭ免疫荧光法检测了耐药基因ＭＲＰ和ｍｄｒ１在ｍＲＮＡ水平和蛋白质水平的表达,并用ＭＴＴ法测定了ＬＣＥ／ＶＰ对９种化疗药物的敏感试验,结果发现ＬＣＥ／ＶＰ细胞几ｍｄｒ１在ｍＲＮＡ水平均有表达,且前明显高于后,蛋白质水平的表达情况与ｍＲＮＡ水平相一致,ＬＣＥ／ＶＰ对９种化疗药物中的６种药物敏感程     

当归注射液对兔主动脉平滑肌细胞中增殖细胞核抗原表达的影响

目的：观察当归注射液对平滑肌细胞（ Ｓ Ｍ Ｃ） 中增殖细胞核抗原（ Ｐ Ｃ Ｎ Ａ） 表达的影响。方法：用免疫组织化学 Ｌ Ｓ Ａ Ｂ 法检测培养的兔主动脉 Ｓ Ｍ Ｃ 中 Ｐ Ｃ Ｎ Ａ 的表达,同时测定培养液中超氧化物歧化酶（ Ｓ Ｏ Ｄ） 、脂质过氧化物（ Ｌ Ｐ Ｏ） 、前列环素（ Ｐ Ｇ Ｉ２） 及环磷酸腺苷（ｃ Ａ Ｍ Ｐ） 的含量。结果：当归注射液能增加 Ｓ Ｏ Ｄ 活性,降低 Ｌ Ｐ Ｏ 和升高 Ｐ Ｇ Ｉ２ 、ｃ Ａ Ｍ Ｐ 水平,抑制 Ｓ Ｍ Ｃ 中 Ｐ Ｃ Ｎ Ａ 的表达（ Ｐ＜ ００５ ～００１） 。结论：当归有抑制 Ｓ Ｍ Ｃ 增殖的作用。     

NO诱导血管平滑肌细胞凋亡中Ca~(2 )的作用

探讨了ＮＯ诱导血管平滑肌细胞凋亡与细胞内游离Ｃａ２＋之间的关系．通过粘附式细胞仪和Ｃａ２＋ 荧光探针Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ,检测分析了ＮＯ在供体ＳＮＡＰ的作用下,血管平滑肌细胞中游离Ｃａ２＋浓度的变化; 又通过ＳＮＡＰ与维拉帕米、ＥＧＴＡ、肝素钠、普鲁卡因共同孵育的方法,观测了Ｃａ２＋浓度变化在细胞凋亡中 的作用．得出ＳＮＡＰ能使细胞中游离Ｃａ２＋浓度升高,而胞外Ｃａ２＋内流在其中起主要作用;并且阻断胞外 Ｃａ２＋内流能够抑制ＳＮＡＰ所诱导的血管平滑肌细胞的凋亡．提示了胞内Ｃａ２＋浓度升高可能是ＳＮＡＰ诱导血管 平滑肌细胞凋亡的一条途径．     

异丙嗪对下丘脑细胞内游离钙浓度的影响

目的：观察异丙嗪（ｐｒｏｍｅｔｈａｚｉｎｅ,ＰＭＺ）对下丘脑细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）的影响。方法：以酶法制备家兔下丘脑细胞悬液,运用钙指示剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ作为细胞内游离钙的荧光探针测定下丘脑细胞［Ｃａ２＋］ｉ。结果：１）ＰＭＺ（０４６ｍｍｏｌ／Ｌ）使下丘脑［Ｃａ２＋］ｉ显著升高,且在一定的剂量范围内呈量效关系。２）事先向细胞悬液中加入钙通道阻滞剂维拉帕米可明显抑制ＰＭＺ诱导的［Ｃａ２＋］ｉ升高,但不能完全阻断ＰＭＺ的这种作用。结论：上述结果提示ＰＭＺ可引起下丘脑［Ｃａ２＋］ｉ升高,钙通道开放导致细胞外钙内流是ＰＭＺ引起下丘脑［Ｃａ２＋］ｉ升高的机制之一。     

The universality and biological significance of signal molecules with intracellular-extracellular compatible functions

Generally, cell signal molecules are classified into the extracellular signal molecules (the first messengers) and the intracellular signal ones (the second messengers). Cyclic adenosine monophosphate (CAMP), calcium ions and calmodulin (CaM) are the traditional intracellular messengers, but they are also present in extracellular matrix (ECM). Some of them have been discovered to act as the first messengers through cell surface receptors. Other second messengers, such as cyclic guanosine monophosphate (cGMP), cyclic adenosine diphosphate ribose (cADPR) and annexin, are also found existing outside animal and plant cells. The existence of these messengers with intracellular-extracellular compatible functions in cells may be a regular biological phenomenon. These compatible messengers might be the communication factors between intracellular and extracellular regions or among the cell populations, and are also important in regulating cell development procedure.     

金标银染技术在表达文库筛选中的应用

以胶体多标记钙调素作为探针再辅以银染法（金标银染技术）,自玉米ｃＣＮＡ表达文库中筛迁钙调素结合蛋白。该探针保持钙调素的活性,特异性地与钙调素结合蛋白相结合,在胶体金标记的基础上进行银染,灵敏度获得显著提高（达ｎｇ级）。应用这一方法对玉米ＣＮＤＡ表达文库进行筛选获得了一个与探针特异结合的阳性克隆。以生物素标记的钙调素对该克隆表达的融合蛋白进行结合实验,结果表明该克隆编码的蛋白为一个钙调素结合蛋白。本     

氯沙坦联合ACEI治疗糖尿病肾病高血压的临床应用

目的　评价血管紧张素Ⅰ转换酶抑制剂 (ACEI)和血管紧张素Ⅱ受体 1拮抗剂 (ATla)联合治疗糖尿病肾病 (DN)伴高血压的临床价值 .方法　观察两组糖尿病肾病伴高血压患者 ,比较联合应用氯沙坦和ACEI(治疗组 )与单独使用大剂量ACEI(对照组 )在降低血压和尿白蛋白排泄 (UAE)、影响糖代谢和肾功能以及不良反应等方面的差异 .结果　治疗 8周后两组尿蛋白、UAE、血压均明显下降 ,治疗组下降幅度大于对照组 ,副作用出现率低 (P <0 .0 5 ) ,控制血糖所需的胰岛素剂量、血肌酐等变化和组间差异不显著 (P >0 .0 5 ) .结论　ATla和ACEI是治疗DN的有效药物 ,联合应用更有利于保护肾脏 ,可能是临床治疗方案的一种选择 .     

钙调素拮抗剂对荷瘤小鼠主要器官钙调素（CaM）水平的影响

本文采用磷酸二酯酶（ＰＤＥ）法,测定了小檗胺衍生物ＥＢＢ对荷Ｓ１８０瘤小鼠的主要器官和瘤体ＣａＭ含量的影响。实验结果表明,ＥＢＢ具有使荷瘤后小鼠脑、肺、肝、脾、肾五个主要器官ＣａＭ由不正常趋向正常的能力,而已知抗肿瘤药物丝裂霉素和环磷酰胺单独使用时此种能力较弱,但这两种抗肿瘤药物与ＥＢＢ联合作用时,能使荷瘤鼠诸器官的ＣａＭ水平趋向正常。结果提示,专一性强的ＣａＭ拮抗剂在抑制肿瘤的同时可能还具有维护     

肾小球疾病患儿环孢霉素亲合素基因表达及临床意义探讨

探讨肾小球疾病患儿急性期与恢复期血白细胞中环孢霉素亲合素基因（ＣｙＰｍＲＮＡ）的表达,同时研究其ＣｙＰ与２４ｈ尿蛋白定量、尿素氮、肌酐之间关系,以及探讨ＣｙＰ在肾小球疾病中的临床意义。通过逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）测定肾小球疾病患儿血白细胞中ＣｙＰｍＲＮＡ的表达及血尿素氮、肌酐、２４ｈ尿蛋白定量。肾小球疾病急性期血白细胞中ＣｙＰｍＲＮＡ的水平明显高于恢复期与对照组,同时发现肾小球疾病患儿血白细胞中ＣｙＰｍＲＮＡ表达的水平与ＣｓＡ血浓度呈负相关,与２４ｈ尿蛋白定量呈正相关,与尿素氮及肌酐间无相关关系。监测肾小球疾病患儿血白细胞中ＣｙＰ基因的表达,可反映肾小球疾病的发作、缓解与转归及指导ＣｓＡ的治疗     

基于数据挖掘分析GABPA基因在肾上腺皮质癌的表达及预后意义

利用Oncomine数据库、cBioportal数据库、GEPIA数据库探索GABPA基因在肾上腺皮质癌（Adrenocortical carcinoma,ACC）及正常肾组织中的表达情况、GABPA基因突变情况及其对肾上腺皮质癌患者预后的影响。结果显示,与正常肾组织相比,GABPA mRNA在ACC组织中呈高表达。该基因编码的蛋白质在ACC组织中没有发生突变。预后分析表明,GABPA mRNA高表达组患者的无疾病进展生存时间显著低于GABPA mRNA低表达组。利用String-DB数据库分析与GABPA基因相互作用的蛋白质,包括NRF1、TFAM、TFB1M、TFB2M、GABPB1、GABPB2、PPRC1、PPARGC1A、HCFC1、SSBP1。本研究通过数据挖掘迅速获取分析肾上腺皮质癌组织GABPA基因表达的相关信息,为深入研究GABPA基因在肾上腺皮质癌发生发展中的作用机制奠定基础。     

细胞分裂素在mRNA和蛋白质水平上同时促进rbcS基因的表达

将紫萍半叶状体首先在不含细胞分裂素的培养液上于黑暗条件下培养10d，然后转移到长日照条件下、分别在含有或不含6—苄基嘌呤的新鲜培养液上培养．对半叶状体在培养过程中干重、叶绿素和可溶性蛋白含量方面的变化进行了分析，并且用Northern　blot的方法拉测了rbcS mRNA水平的变化，用SDS—PAGE分离和考马氏亮蓝染色的方法检测了其编码蛋白(1，5—二磷酸核酮糖羧化酶／加氧酶的小亚基，SSU)水平的变化．结果表明，6—苄基嘌吟显著地促进了半叶状体干重、叶绿素和可溶性蛋白含量、rbcS基因mRNA及其编码蛋白SSU水平的增加．由于在没有外源细胞分裂素的情况下，rbcS基因mRNA水平的增加并不能引起SSU水平的增加，所以认为细胞分裂素对该基因表达的促进作用同时发生在mRNA和蛋白质水平上．     

Physiological responses of osteoblasts to cyclic stretching and the change of intracellular calcium concentration

The development of bone tissues is regulated by mechanical stimulation.Cyclic stretching was applied to the osteoblasts that were delivered from rat calvarie,The results showed that stretching at 500με increased the cell proliferation while loading at 1000με and 1500με inhabited cell growth ,Loading also increased the adhesive force between cells and substrate as well as spreading areas of osteobalsts.Furthermore,the fluorescence probe Fluo-3/AM was used to investigate the effect of stretching stimulation on the intracellular calcium concentration of osteoblasts.The intracellular calcium concentration of osteoblasts that were stretched at 500 με for 5 min was 92.9% higher than the control ,After being treated with the panax ontoginseng saponins,the streteched osteoblasts still expressed 28.6% higher intracellular calcium concentration than that of the control ,which proved that both the influx of extracellualr calcium and the release of intracellular calcium store were involved in the increase of intracellular calcium concentration when osteoblasts responded to the cyclic stretching And the influx of extracellular calcium through transmembrance channel played a main role.     

Calmodulin modulation of ion channels and receptors?

：Ion channels and receptors are the structural basis for neural signaling and transmission. Recently, the function of ion channels and receptors has been demonstrated to be modulated by many intracellular and extracellular chemicals and signaling molecules. Increasing evidence indicates that the complexity and plasticity of the function of central nervous system is determined by the modulation of ion channels and receptors. Among various mechanisms, Ca 2+ signaling pathways play important roles in neuronal activity and some pathological changes. Ca 2+ influx through ion channels and receptors can modulate its further influx in a feedback way or modulate other ion channels and receptors. The common feature of the modulation is that Ca 2+ /calmodulin (CaM) is the universal mediator. CaM maintains the coordination among ion channels/receptors and intracellular Ca 2+ homeostasis by feedback modulation of ion channels/receptors activity. This review focuses on the modulating processes of ion channels and receptors mediated by CaM, and further elucidates the mechanisms of Ca 2+ signaling.