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本报道对一个衰老下调基因的鉴定．从绿色和正在衰老的紫萍叶状体组织中分别提取总RNA，然后使用一个oligo—dT引物进行逆转录合成cDNA.cDNA用oligo—dT和简并引物进行PCR扩增，然后进行琼脂糖凝胶电泳．电泳后发现，一条cDNA带存在于由绿色组织而不存在于由正在衰老的组织所得到的样品中．将这一cDNA回收，克隆进T—vector并且进行了测序．Northern blot分析表明，该cDNA对应基因的表达受衰老调节而减少．根据第一个cDNA序列设计了一个特异性引物，进行RT-PCR扩增，并且克隆到另外一个部分cDNA．测序结果表明，第二个克隆具有与第一个cDNA相重叠的40bp的片段．将第一个cDNA序列与删去40bp重叠区的第二个cDNA序列连接，我们得到一个322个核苷酸的cDNA3'端部分序列．用BLASTN程序将该序列翻译后与NCBI non—redundant database中已知的蛋白进行比较，结果表明所克隆的cDNA代表的基因与光呼吸途径的丝氨酸-乙醛酸氨基转移酶编码基因有很高的相似性． 相似文献
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细胞分裂素在mRNA和蛋白质水平上同时促进rbcS基因的表达 总被引：1，自引：0，他引：1
将紫萍半叶状体首先在不含细胞分裂素的培养液上于黑暗条件下培养10d，然后转移到长日照条件下、分别在含有或不含6—苄基嘌呤的新鲜培养液上培养．对半叶状体在培养过程中干重、叶绿素和可溶性蛋白含量方面的变化进行了分析，并且用Northern blot的方法拉测了rbcS mRNA水平的变化，用SDS—PAGE分离和考马氏亮蓝染色的方法检测了其编码蛋白(1，5—二磷酸核酮糖羧化酶／加氧酶的小亚基，SSU)水平的变化．结果表明，6—苄基嘌吟显著地促进了半叶状体干重、叶绿素和可溶性蛋白含量、rbcS基因mRNA及其编码蛋白SSU水平的增加．由于在没有外源细胞分裂素的情况下，rbcS基因mRNA水平的增加并不能引起SSU水平的增加，所以认为细胞分裂素对该基因表达的促进作用同时发生在mRNA和蛋白质水平上． 相似文献
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