栝楼的组织培养研究

本文对栝楼的快速繁殖,愈伤组织的诱导与再分化,不定根尖分化出不定芽进行了初步研究。结果表明:栝楼的腋芽在MS 6-BA 0.5mg/L培养基上可以快速繁殖。无根苗转移至MS NAA 0.2mg/L培养基上可以100%生根;栝楼茎段很容易诱导出愈伤组织,在MS NAA 1.0mg/L 6-BA 0.5mg/L培养基形成的愈伤组织通过继代培养35d后,形成茁壮的绿苗; 将栝楼长约1cm的不定根尖培养在MS 6-BA5-7mg/L的培养基上,均可以诱导出大量的不定芽。     

两个菊花品种再生体系的建立

以小菊品种56号和大菊品种28号无菌苗的幼嫩叶片和茎段为材料,通过器官分化或器官直接发生途径,建立了两个品种的再生体系.以MS为基本培养基添加不同质量分数的6-BA和NAA,通过一定时间诱导,幼嫩叶片和茎段可以通过不同方式产生不定芽.初步结果表明,适合56号茎段愈伤生长并诱导不定芽产生的培养基为:MS 6-BA 0.5mg/L NAA 0.05mg/L;适合28号茎段愈伤生长并诱导不定芽的培养基为:MS 6-BA 0.5mg/L NAA 0.1mg/L;56号叶片直接诱导不定芽的培养基为:MS 6-BA1-3mg/L NAA 0.1-0.5mg/L.     

香根草愈伤组织的诱导和快速繁殖

为了寻找大批量快速繁殖香根草的有效办法,以香根草的茎段、茎节为实验材料进行愈伤组织的诱导和快速繁殖的实验.用不同浓度的6-BA、IAA、2,4-D对其不同的外植体进行试验.结果表明:在愈伤组织诱导实验中,MS培养基附加6-BA 0.5mg/L 2,4-D 2.0mg/L的激素组合对茎段愈伤组织诱导效果最佳;将产生的愈伤组织团转入分化培养基中,诱导不定芽,其最适分化培养基为MS附加6-BA 3.5mg/L IAA 0.2mg/L;再生苗在MS培养基附加6-BA 3.0mg/L IAA 0.5mg/L的培养基上,进行生根培养效果较好.可见,茎段和茎节均可作为外植体.考虑到茎段数量较大,易取材,且效果明显优于茎节,认为茎段是香根草组培快繁的理想外植体.     

三种芦荟的组培快繁研究

库拉索芦荟（Aloe vera L.)、中国芦荟[A.vera L.var.chinensis(Haw.)Berg.]、上农大叶芦荟（A.vera L.var SAC Gu.)三种芦荟的茎段和顶芽外植体在MS附加BA3－4mg/L的培养基上培养,产生大量不定芽,不定芽长大后,在MS附加IBA1－2mg/L NAA 0.2mg/L的培养基上生根并形成完整植株。生根试管苗经练苗后移入沙床,生长良好。     

玉米茎尖培养研究(I) --胚状体和丛生芽发生的扫描电镜观察

扫描电镜观察结果显示,所用六个基因型的玉米茎尖分生组织在添加500mg/L水解溶蛋白和9.0～13.5μmol/L6～BA的改良MS培养基上培养四周,茎尖可产生由腋芽和不定芽组成的密集的丛生芽.在含有4.5μmol/L 6～BA和1.0～2.0μmoL/L 2.4-D的培养基上,茎尖分生组织产生"层状"伸展的愈伤组织.将愈伤组织转移到发育培养基上,愈伤组织表面可观察到大量的胚状体出现,胚状体继续发育成丛生芽.激素浓度和种类不同明显影响茎尖产生胚状体和丛生芽的数量,基因型不同的茎尖,其产生胚状体或丛生芽的能力也呈现出明显的差异.     

不同激素配比对驱蚊草茎段组织培养的影响

为给驱蚊草进行大规模的商业化生产打下技术基础,本实验以驱蚊草茎段为外植体,在添加不同种类、浓度植物激素处理组合的培养基上进行培养.然后利用生物统计学方法对所得数据进行处理,确定适合外植体不定芽诱导的最适培养基.实验结果如下:以驱蚊草幼嫩茎段为外植体时,茎段不定芽诱导的最适培养基为:MS+NAA1.0mg/L+BA1.0mg/L,15天之后开始形成不定芽,诱导率达75.12%.     

酸浆的组织培养与植株再生

以酸浆的叶片、叶柄、茎段、子叶、胚轴、胚根为外植体进行离体培养,结果表明:叶柄为酸浆不定芽分化的最佳外植体类型;IAA为诱导叶柄不定芽分化较适合的生长素类型;不定芽分化的最佳培养基为MS 2.0 mg/L 6-BA 0.5 mg/L IAA;丛生芽增殖的最佳培养基为MS 2.0 mg/L 6-BA 0.05 mg/L IAA,增殖系数达5.0;最优的生根培养基为1/2 MS,生根率达91.7%.     

旱柳体外培养与直接分化再生系统的建立

给出了旱柳体外培养的方法:9月份至12月份采集1~2 a生枝条上带腋芽的茎段,经过筛选确定MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA为最佳诱导培养基,平均每个芽点产生的不定芽数量为3.5个,20 d后苗高为1.8 cm;不定芽在MS+0.1 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA培养基中继代增殖及生长较好,为适宜的增殖培养基;在形成的不定芽中有些不定芽起源于单株苗的切口基部,因此,初步建立了旱柳的直接分化再生系统,可为旱柳的遗传转化等研究奠定基础.经过壮苗处理的幼苗在MS+0.2 mg/L NAA培养基上的生根率达100%,且生根量多,幼苗生长健壮.生根苗移栽至V(草炭土)V(河沙)为3 1的混合基质中,60 d后成活率为90%左右.     

南丰蜜橘组织培养及植株再生

以南丰蜜橘种子无菌苗的子叶、上胚轴、茎端、下胚轴为材料,在不同激素配比的MS基本培养基上进行外植体筛选和诱导不定芽分化、继代及生根培养,确定了诱导植株再生的最佳外植体和最适条件:(1)诱导不定芽分化最好外植体为上胚轴,不定芽分化率达90%;(2)继代培养中最适激素配比为MS+0.8 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.5 mg/LD-泛酸钙;(3)生根最适合培养基为MS/2+0.1 mg/L NAA.     

蝴蝶兰的离体培养与快繁技术研究

将蝴蝶兰花梗腋芽作为外植体,接种于添加不同浓度激素配比的MS培养基上进行离体培养。实验结果表明,不管是已开花的花梗还是未开花的花梗,其腋芽均能诱导产生不定芽,其适宜的培养基配方为MS 6-BA 5.0mg/L;利用诱导产生的不定芽的茎尖进行茎尖培养,可得到大量的原球茎状体,其适宜的培养基为MS 6-BA 3.0mg/L 10％椰乳 5％马铃薯,其诱导率为65％;原球茎状体进行增殖培养的适宜培养基为KC 5％椰乳 10％马铃薯,其增殖倍数为24.2。     

麻疯树根高效再生体系的建立及不定芽起源研究

为了克服现有麻疯树快繁技术的不足,分别以麻疯树胚根和子叶外植体诱导的不定根为外植体诱导不定芽.麻疯树子叶不定根诱导的最佳培养方式为:MS+5 mg/L IBA上培养4天,然后转至MS0培养基上生根.诱导生根率和生根数分别达到93.33%和6.54个/外植体.子叶不定根诱导不定芽的最佳培养基是MS+3.0 mg/L 6-BA+3 mg/L IAA,诱导率达到83.33%.麻疯树胚根的最佳不定芽诱导培养基为MS+0.2 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IBA,分化率达67.80%,平均出芽数为3.25个/外植体.对麻疯树胚根再生的各阶段进行了石蜡切片观察,明确了不定芽起源于根的薄壁细胞层.与现有技术相比,本方法具有周期短、再生效率高的特点.     

金钗石斛转基因体系的建立

以金钗石斛种子为外植体建立组织培养体系,在含1.5 mg/L 6-BA MS培养基中添加0.5 mg/L NAA和2%蔗糖有效地诱导原球茎,诱导率达91.67%;添加0.25 mg/L NAA和3%蔗糖则更适于原球茎分化形成不定芽;添加0.1 mg/L NAA和2%蔗糖适宜于不定根的诱导. 同时建立了根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)转化金钗石斛的方法和体系:使用根癌农杆菌EHA105侵染30 min,共培养3 d时,金钗石斛根段、根尖和组培幼苗的转化率最高,而含腋芽的茎节则需要共培养5 d. 本文所建立的组培体系与转基因体系将为探讨金钗石斛的基因功能和调控机制等生物学问题,及建立稳定转化的再生植株提供技术手段.     

"北京3号"地黄愈伤组织的诱导与分化

以“北京3号”地黄为材料研究不同消毒时间对无菌苗形成的影响及不同激素浓度配比对愈伤组织形成与分化的影响．实验表明：对块根进行消毒的最佳时间为75％乙醇30s，0．1％升汞10min．叶片在MS附加6-BA0．5mg／L、NAA0．3mg／L培养基上，愈伤组织诱导率可达95％；在MS附加NAA0．1mg／L，6-BA3．0mg／L的培养基上不定芽的分化率达48．3％．     

Regenerating plants from cryopreserved adventitious buds of haploids in rice

A large number of adventitious buds were induced fromin vitro cultured young inflorescences of haploids of rice. Having been subcultured on solidified subculture media at 26°C for 7 days, the adventitious buds were loaded into 1.8 mL plastic cryotubes with cryoprotectant and kept on ice for 45–60 min. After cooled at a rate of 1.0°C/min down to −40°C, the samples, were kept in liquid nitrogen. The adventitious buds which have been cryopreserved for about 30 days were thawed rapidly in 38–40°C water and then plated on solidified MS medium containing 3% sucrose, 0.5 mg/L NAA and 2.0 mg/L kinetin. After plated, 23%–32% of adventitious buds resumed growth and 15%–22% regenerated plantlets. The results of this work indicated that the adventitious buds derived fromin vitro cultured young inflorescences is a critical factor for the success and subculturing adventitious buds on MS medium containing 3% sucrose and 4% sorbitol or 20% potato extract is essential to the procedure. The effective cryoprotectant is 10% DMSO (dimethyl sulfoximide)+0.5 mol/L sorbitol. Supported by the Natural Science Foundation of Hubei Province Zhang Zhihong: born in 1963, Lecturer     

北柴胡愈伤组织及不定根诱导研究

以从田间采集的北柴胡和用当年产种子所得的实生苗为实验材料,比较了外植体种类、大小和采样时期等因素对愈伤组织诱导的作用;以从大田栽培北柴胡的带侧芽茎段及根愈伤组织为材料,研究了不同培养基和激素对不定根诱导的影响.结果表明,诱导愈伤组织的适宜起始材料是幼嫩根段;长度1.0 cm左右的根外植体有利于愈伤组织的诱导和生长;4月上旬采样有利于愈伤组织的诱导和生长;在添加IBA 0.5 mg/L的1/2MS培养基中,带侧芽茎段不定根的诱导率可达97.3％,生根效果也最好;在B5培养基中加入二苯基脲双磺酸钙1.0mg/L后,不定根诱导率达到94.2％,根粗壮且生长快.     

香龙血树和紫铁的组织培养与快速繁殖

香龙血树（Dracaena fragrans Ker-Gawl.)带腋茎茎段接种到MS＋BA 5mg/L（单位下同）＋IAA0．2培养基中诱导形成愈伤组织并在愈伤组织上发生不定芽的分化。紫铁（Cordy-line fruticosa var.“Compacta”）顶芽接种到MS＋BA2的培养基中可被大量扩增。两种植物的诱导芽接种到MS＋IAA0．2－0．4的培养基中,可直接发生不定根,所形成的试管苗移植后,生长正常,成活率90％－100％。     

沙枣微繁的初步研究

沙枣茎段在MS+NAA(0.2mg/L,单位下同)+ZEA(1)培养基上首先诱导形成愈伤组织,然后转接到MS+ZEA(0.2)+BA(2)培养基上经4次继代产生大量不定芽。沙枣的茎段也可以扦插在MS+BA(0.5)或MS+NAA(0.1)+BA(0.5)培养基上直接获得大量不定芽。以上两种途径获得的不定芽均可以在MS_0培养基上生根而培育成小苗,而通过后一种途径获得的不定芽具有很好的遗传稳定性。为进一步做遗传转化及耐盐筛选工作提供材料。     

光皮桦离体培养形态建成过程中内源激素含量的变化

通过应用ELISA法测定了光皮桦在芽增殖培养基(改良MS 4.5 mg/L BA 0.01 mg/L NAA)和生根培养基(改良WH 3.0 mg/L IBA 1.5 mg/L NAA)上形态建成过程中内源激素的变化,阐明外源激素和内源激素的影响对离体培养形态建成过程中所起的调控作用。结果表明:在形态建成过程中,外源激素的添加使光皮桦某些内源激素发生了变化,从而对芽和根的形态建成起调控作用;内源激素ZR、ABA、IAA、iPA的增加对芽的形成、发育起到促进作用;内源激素IAA、ABAi、PA的增加对根的形成、发育起到促进作用。     

西红花球茎组织培养的研究

以球茎切块为外植体，MS为基本培养基，0．5mg·L^-1 6-BA和2mg·L^-1 2，4-D为激素，在（20±2）℃，黑暗环境下培养，可以获得98％的愈伤组织诱导率．愈伤转入MS＋5．0mg·L^-1 6-BA＋5．0mg·L^-1 NAA培养基中，可诱导丛生芽的产生，将丛生芽切成单个不定芽后转移到MS＋4．0mg·L^-1 6-BA＋0．5mg·L^-1 NAA的培养基中，光照条件下可诱导新生小球茎的产生．