原球茎为转化受体的农杆菌介导石斛遗传转化

以携带双元载体pCAMBIA1305.1的农杆菌菌株EHA105转化石斛种子萌发形成的原球茎,通过GUS瞬时表达检测对受体状态、农杆菌活化条件、共培养时间等转化影响因子进行了优化;共培养4 d的原球茎接种到含有30 mg/L潮霉素(Hyg)和500 mg/L头孢噻肟钠的愈伤组织诱导与增殖培养基上以获得潮霉素抗性的愈伤组织,抗性愈伤组织在含Hyg 50 mg/L的再生培养基上再生植株,抗性株经GUS组织化学、PCR和PCR-southem blot检测证明为转化株。     

金钗石斛茎段诱导原球茎增殖的研究

以金钗石斛茎段诱导出健壮的原球茎为材料,研究培养基中不同激素组合及不同有机物质对原球茎增殖的影响.结果发现以MS 2mg/L6-BA 0.5mg/LNAA的增殖效果最好,50d后统计,其增殖倍数在6倍以上;在添加不同有机物质的研究中,发现10%椰汁有利于金钗石斛原球茎的增殖,而10%香蕉汁则有利于原球茎的分化.     

液体悬浮培养诱导金钗石斛原球茎增殖的研究

以金钗石斛原球茎为实验材料,通过液体悬浮培养,研究金钗石斛原球茎的增殖和多糖成份积累进行了研究。结果表明:金钗石斛在B5培养基+1.0mg.L-1NAA,蔗糖浓度为3%,10%香蕉提取物上清液的液体培养基中增殖最佳,可溶性多糖成分累积相对较高。     

铁皮石斛原球茎生长分化及生根壮苗研究

目的:筛选适宜铁皮石斛原球茎生长分化及生根壮苗的培养基,提高继代扩繁系数和组培苗的质量.方法:在相同的培养条件下,把相同发育阶段的原球茎接种于含不同激素比例的培养基中生长;把丛生芽接种于蔗糖浓度不同的培养基中生长;把相同高度的幼苗接种于含不同附加物的培养基中生长;对结果所产生的不同生长状况进行综合分析.结果:原球茎的增殖以1/2MS添加BA2.0mg/L NAA0.5mg/L或BA3.0mg/L NAA0.5mg/L的激素比例为佳;原球茎分化以1/2MS添加BA2.0mg/L NAA0.2mg/L或BA3.0mg/L NAA0.2mg/L的激素比例为佳;丛生芽的生长中以30%蔗糖浓度的培养基为佳;生根壮苗中最佳的附加物为香蕉.     

拟南芥多效性基因CPR5转化水稻中花11的研究

 利用根癌农杆菌介导法将拟南芥多效性基因CPR5转化水稻中花11,同时优化了其再生体系和遗传转化体系。结果表明：相比27 ℃、暗培养,32 ℃、持续光照培养可使诱导率提高到100 %,且缩短了诱导周期;〖JP2〗预分化培养后,在附加5 mg/L 6 BA和1 mg/L NAA的分化培养基上分化率和再生率可分别达到100 %和90.50 %。同时探索了较高转化频率的条件为 A600≈ 0.05~0.1的农杆菌菌液浸染5 min,共培养时间为3 d,同时添加1张用AAI培养液浸湿的无菌滤纸。对部分转化植株进行PCR、Southern blot和半定量RT PCR检测,结果表明AtCPR5基因已经整合到水稻基因组中,在所试验的转化植株中均为单拷贝,但表达程度存在差异。     

超声波辅助的发根农杆菌对黄瓜的遗传转化

由于超声波处理可在外植体上产生许多微小伤口,从而提高农杆菌与外植体之间的接触面积,提高农杆菌对外植体的转化频率。用野生型发根农杆菌（Agrobacterium rhizogenes)A4菌株感染黄瓜（Cucumis sativus L.) 无菌苗的子叶和下胚轴,建立了黄瓜的发根遗传转化体系。同时,对超声波处理时间、外植体放置方向、预培养时间、外植体类型、乙酰丁香酮的添加与否等影响因素进行了研究。结果表明,采用外植体在添加0．5mg/L NAA和2mg/L 6-BA的MS培养基上预培养4d,超声波处理2s,共培养3d,在预培养共培养期间子叶上表皮向下可以取得最佳的转化效果,发根诱导率为94．7％。乙酰丁香酮对发根诱导频率影响不明显。冠瘿碱检测表明,发根确定能合成农杆碱。     

流苏石斛原球茎诱导初步探究

通过植物组织培养技术对流苏石斛种子、茎段诱导原球茎因子进行初步探究.实验表明:以种子为诱导材料,在MS基本培养基中添加6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L的诱导效果较好,诱导率达84.9%;以茎段为诱导材料时,在MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.5 mg/L+TDZ0.4 mg/L的培养基上诱导率高达93%,以添加100g/L的马铃薯汁能更好地提高原球茎的诱导率,诱导率高达95.2%.     

根癌农杆菌介导的骏枣愈伤组织遗传转化体系的研究

采用农杆菌介导法,对骏枣愈伤组织遗传转化体系进行研究.结果表明：进行遗传转化的合适条件为：愈伤诱导培养基MS＋6-BA 0.4 mg/L＋2,4-D 1.2 mg/L;浸染之前对愈伤组织进行6d的避光培养可提高愈伤组织在共培养过程中的成活率;愈伤组织在OD600=0.4～0.6的农杆菌菌液中浸染10 min,农杆菌LBA4404的生长情况最好;在28℃黑暗条件下共培养放置16 d对转化最适宜;头孢霉素的抑菌浓度为250 mg/L;卡那霉素的筛选浓度为125 mg/L.经PCR检测,初步证明外源目的基因已整合到骏枣基因组中,初步实现了农杆菌介导的骏枣愈伤组织遗传转化,与以骏枣茎叶外植体建立的遗传转化体系相比,以骏枣愈伤组织为外植体共培养时间长,有利于转化.     

农杆菌介导转化豆科牧草百脉根影响因子

对农杆菌介导转化豆科牧草百脉根的相关影响因子进行了实验研究,结果表明:在百脉根农杆菌转化体系中,以农杆菌AGL1菌株、子叶转化受体、3 d共培养时间以及25 mg/L卡那霉素筛选质量浓度为最佳转化条件.研究还发现,头孢霉素对农杆菌AGL1菌株的抑制作用要强于羧苄霉素.     

黑节铁皮石斛原球茎诱导、再分化以及腋芽萌发和生根的初步研究

对黑节铁皮石斛的原球茎诱导、再分化以及腋芽萌发和生根进行了初步的研究,以期为黑节铁皮石斛的人工繁殖提供理论指导。采用植物组织培养和单因子试验的方法,获得了黑节铁皮石斛带芽茎段最佳的消毒方式为70%酒精处理30s后再用0.1%HgCl2处理20min。黑节铁皮石斛带芽茎段原球茎诱导的最佳培养基为MS＋KT1mg/L＋NAA0.1mg/L。黑节铁皮石斛带芽茎段原球茎再分化的最佳培养基为MS＋KT2mg/L＋NAA0.5mg/L。黑节铁皮石斛带芽茎段腋芽萌发的最佳培养基为MS＋KT2mg/L＋NAA0.5mg/L。黑节铁皮石斛带芽茎段生根的最佳培养基为1/2MS＋NAA0.5mg/L。这些实验结果为黑节铁皮石斛试管苗的工厂化生产奠定了技术基础。     

金钗石斛兰组培苗的生根培养和移栽

以1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的NAA、IBA和6-BA,配置16种培养基进行试验,筛选最适宜于金钗石斛兰生根的培养基.结果显示:1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA及1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.2 mg/L IBA培养基最适宜于金钗石斛兰生根,生根率达100%,而且根系生长健壮.将金钗石斛兰生根组培苗移栽于6种不同的基质中,结果表明,以棕榈外壳作为移栽基质最佳,移栽成活率达100%,且幼苗生长良好.     

观赏与食用两用型羽衣甘蓝的组培快繁试验

研究了观赏与食用型羽衣甘蓝的组培快繁技术,结果表明:适宜的起始分化培养基为MS BA0.7mg/L NAA0.1mg/L 30g/L蔗糖,25d可分化出小苗,分化率达93%;适宜的增殖培养基为MS BA2mg/L NAA0.02mg/L 30g/L蔗糖,繁殖系数为4.5;适宜的生根培养基为MS NAA0.2mg/L IBA0.8mg/L 20g/L蔗糖,10d左右可长出3~4条新根,生根率90%,移栽成活率达90%以上。     

食用百合卷丹离体培养再生体系的建立

选取食用百合卷丹的鳞片作为外植体,以MS为基本培养基,添加6-BA和NAA的不同植物激素组合,分组进行不定芽诱导、继代增殖和诱导生根培养。结果表明,鳞茎的中层鳞片具有较强的不定芽分化能力,6-BA 0.5mg/L＋NAA 0.1mg/L的激素组合适宜于鳞片的不定芽分化和继代增殖,而最利于诱导生根的激素组合为NAA 1.0mg/L＋6-BA 0.1mg/L。组培苗经过60天左右培养可在培养基中直接产生小鳞茎。     

蒜头果组织培养再生系统的初步研究

以蒜头果（Malania oleifera）种子萌发获得的无菌苗进行离体培养的初步研究．结果表明：MS＋6-BA1．5mg／L＋NAA0．1mg/L激素组合能够较好地诱导芽的初始分化和增殖；适宜的继代增殖培养基为MS＋6-BA1．0mg/L＋NAA0．2mg/L；采用1／2MS＋IBA0．5mg/L为生根培养基，生根率为45．0％；移栽到河沙的生根苗成活率为52．5％．     

生物柴油植物麻疯树综合繁殖技术研究

研究发现,麻疯树种子在播种前进行剥壳处理,有利于种子萌发。播种以覆土1 cm左右的浅播为宜,适宜的发芽温度为30℃。采用组织培养技术繁育时,愈伤组织诱导培养基以MS＋1%琼脂＋3%蔗糖＋6-BA 3.0 mg/L＋NAA 0.9 mg/L效果最佳,不定芽分化培养基以MS＋1%琼脂＋3%蔗糖＋6-BA 3.0 mg/L＋NAA 0.3 mg/L较适宜,而1/2MS＋NAA 1.0 mg/L培养基生根效果较佳。采用扦插技术繁育时,插条越长生根率越高,短插条扦插时,结合200 mg/L的NAA进行促生根处理也能取得较好的效果。     

不同种类、浓度的激素配合使用对银斑百里香种子无菌苗生长的影响

以银斑百里香种子为实验材料,研究了不同浓度的萘乙酸（NAA）和2,4二氯苯氧乙酸（2,4-D）与6-苄基氨基嘌呤（6-BA）配合使用对银斑百里香无菌苗生长的影响.结果表明：NAA在0.15 mg/L和2,4-D在0.45 mg/L时是银斑百里香种子萌发成无菌苗的最适宜浓度;MS培养基＋ NAA（0.15 mg/L） ＋6-BA（0.6 mg/L）和MS ＋2,4-D（0.45 mg/L） ＋6-BA（0.6 mg/L）的培养基中银斑百里香无菌苗生长最佳.     

安祖花的组织培养及快速繁殖研究

以安祖花的叶、叶柄和茎段为外植体在不同培养基上进行诱导愈伤组织和不定芽的发生．筛选出了诱导愈伤组织培养基MS 6—BA1．0mg／L 2，4—D0．5mg／L，不定芽分化及增殖培养基MS 6-BA1．0mg／L IBA0.1mg／L，不断的继代培养，增殖及分化率都很高，将产生的不定芽切割下来转接到1／2MS NAA0．5mg／L的培养基中生根壮苗，生根良好的试管苗移栽后，经过精心的管理。2个月后统计结果。成活率高达96％。     

红叶石楠的组织培养技术研究

将红叶石楠的茎尖、腋芽及叶片分别栽入各种比例不同的MS和WMP培养基中，实验结果表明MS 6-BA1mg／L 6-KT 2mg／L NAA0．3mg／L Vc5mg／L培养基诱导率最高，可达60％，再将这些诱导出的丛生芽转入MS 6-BA 2mg／L NAA0．2mg／L的分化及增殖培养基上，可获得大量的丛生芽。     

水鳖蕨幼叶的离体快速繁殖

 通过组织培养技术可以从水鳖蕨[Sinephropteris delavayi (Franch.)Mickel]的幼叶诱导出完整植株.研究结果表明,1/2MS+6-BA3.0mg/L(单位下同)+NAA0.5(蔗糖3%)适合于诱导绿色小球(GGB);适合于绿色小球的增殖培养基是1/2MS+6-BA2.0(蔗糖2%)+NAA0.2;适合于芽生长的培养基是1/2MS+NAA0.3;1/2MS(蔗糖2%不加任何外源激素)培养基适合于诱导生根,生根率可达100%.