白斑综合症病毒对斑节对虾亲虾的感染及垂直传播的初步研究

白斑综合症病毒(WSSV)对斑节对虾(Penaeus monodan)亲虾的致病力强,其致病性特征与对未成熟个体的致病性特征相同;经WSSV感染的斑节对虾亲虾的死亡率为100％．感染了WSSV的亲虾的PCR检测结果均呈阳性,组织切片观察可见到明显的组织病变,电镜观察发现病变组织(包括卵巢)的细胞内有大量病毒粒子;原位杂交结果证明,患白斑综合症的斑节对虾亲虾的卵巢中不仅卵母细胞感染上病毒,卵细胞也感染上了病毒．这些结果表明,WSSV在斑节对虾中具备垂直传播的条件．     

PCR检测试剂诊断对虾白点病毒

对虾白点病(whitespotdisease,WSSV)目前急需准确、快速的病毒诊断技术．PCR诊断方法是目前已知的最佳选择．但PCR技术在使用上存在着某些问题,例如专一性、灵敏度、假阳性、假阴性及定量等,是选择PCR做为病毒诊断试剂时,必须慎重考虑的问题．市面上已有商品化的虾白点病毒诊断试剂供养殖者选用．IQ2000系统采用已经过证实的白点病毒核酸序列作为PCR的反映标的,具专一性强、灵敏度高、可同时进行定性及定量检测、包含了内控制组及阳性标准品、可有效地排除假阴性及假阳性的问题等特点,无论在学术研究及实际养殖上都可证明其功效．以IQ2000为基础所发展出来的虾白点病毒安全指标,可提供养殖户作为虾白点病毒防治的参考依据．     

定量PCR技术在食源性致病微生物检测中的应用

食源性疾病发病率的提高及食品安全问题对人们健康造成的危害,引起世界范围内加强对食品安全、卫生及质量的关注。通过聚合酶链反应(PCR)技术在食源性致病微生物检测中的应用,提高了检测的有效性,PCR技术的发展也经历了多个发展阶段,即常规PCR检测、多重PCR检测、荧光定量PCR检测阶段。本文主要对荧光定量PCR检测技术进行分析,探讨定量PCR技术在食源性致病微生物检测中的应用。     

气相色谱-正构烷烃多内标法分离和检测苯系物

建立气相色谱-正构烷烃多内标法准确检测苯系物的新方法,研究苯系物色谱分离多个内标物选择的依据,优化实验条件.样品经二硫化碳解吸30min,毛细管气相色谱火焰离子化检测器检测,保留时间定性,正构烷烃辅助定性,以正庚烷为内标定量.苯、甲苯和二甲苯的线性范围分别为0.017 5~0.701 2mg/mL、0.017 3~0.693 5mg/mL和0.017 2~0.688 9mg/mL;相关系数分别为0.999 6、0.999 7和0.999 9(以正庚烷为内标).苯、甲苯和二甲苯的最低检测限分别为0.14μg/mL、2.49μg/mL、1.45μg/mL;相对标准偏差分别为0.9%~1.0%、0.1%~3.8%和0.2%~1.5%之间.试验结果表明该方法可消除复杂基体的干扰,定性定量准确,简便快速、实用性强,可用于室内空气、胶水和油漆等多种样品中苯系物的监测.     

中国对虾暴发性流行病杆状病毒的提取纯化及病原性实验

通过病毒纯化技术及电镜检测 ,发现患病的中国对虾体内有带囊膜的杆状病毒 .该病毒粒子大小为 (3 0 0～ 4 0 0 )nm× (1 60～ 1 80 )nm ,囊膜 2 0～4 0nm ,无包涵体 .人工回接实验表明 ,病虾的肝胰脏、中肠、胃、心肌组织内均分布有大量的病毒粒子 ,该病毒粒子在形态、大小、囊膜的有无及包涵体的有无等诸方面均与感染前部分纯化的病毒粒子一致 .根据柯氏法则 ,患病的中国对虾是由杆状病毒的侵袭所致 .     

鲁米诺化学发光法测定食品中的亚硫酸盐

提出了运用化学发光法测定食品中亚硫酸盐的新方法,对影响化学发光的诸因素进行了实验和探讨,得出较佳检测条件:方法的定量限为4.6 mg/kg,亚硫酸盐质量浓度在1.0~10.0 mg/L与发光强度增强值(ΔI)呈良好的线性关系,R2为0.993 4.对6类样品进行了测定并做加标回收试验,平均RSD 3.05%,平均回收率93.0%,可用于食品中亚硫酸盐的定量与定性检测.     

EGCG棕榈酸酯体外抗HCV作用的研究

为探讨表没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯(EGCG-P)抗丙型肝炎病毒(HCV)的作用,本研究采用cck-8法检测EGCG-P对Huh7.5.1细胞系的毒性作用,丙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒检测HCV滴度,通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)选择合适的病毒感染复数(MOI),进而研究药物抗病毒的作用效果。结果:EGCG-P浓度为0~50mg/L时对Huh7.5.1细胞无毒害作用,且抗病毒作用显著;当其浓度为25mg/L时病毒表达量为阳性对照的1/6,可见EGCG-P能高效抑制HCV的增殖。     

对虾白斑症病毒体内外感染的研究

WSSV可经注射、投喂或共居感染克氏螯虾和日本沼虾，病毒感染的组织匀浆物注射后发病很快，但蔗糖介质纯化的WSSV注射后发病较慢，Ficoll-400介质纯化的WSSV注射后发病时间介于前二者之间。中国对虾细胞内WSSV一般每个囊膜只含一个核衣壳，但此毒种经克氏螯虾反复增殖后，多粒包埋的病毒粒子明显增多。从病虾的每克鳃可提出约0．66mg的WSSV。含WSSV的血淋巴或组织匀浆液感染8种昆虫细胞后，传代2次仍未观察到病毒在其中复制。     

PCR法制备地高辛标记探针斑点杂交检测白斑综合症病毒（WSSV）

用PCR法成功制备了DIG标记探针,探针长度为547bp,探针的产量为21．6mg/μL。此探针与随机引物合成探针检测样品灵敏度相近。用此探针核酸斑点杂交法检测了54尾中国对虾。结果表明：此探针在对白斑综合症病毒的检测、对虾暴发性流行病的诊断等方面具有很高的应用价值。     

杆状病毒SpltMNPV病毒粒子中存在泛素复合物

通过间接免疫荧光分析,发现在斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus,Splt MNPV)感染的Sl-zsu-1细胞的细胞质中存在大量的泛素或泛素复合物.Western印迹分析表明,在SpltMNPV多角体源病毒粒子与芽生型病毒粒子中均存在相对分子质量为30×103～65×103的泛素复合物.推测SpltMNPV在出芽或组装的过程中由感染细胞的胞质中获得泛素复合物.     

对虾一种新病毒病的细胞超微病变及其诊断

应用电镜超薄切片技术，研究ＬＮＢＶ引起的对虾细胞超微病理变化的结果表明，ＬＮＢＶ的靶细胞依次为淋巴样细胞、表皮细胞、肌样细胞和组织细胞．病虾主要症状是甲壳上有呈放射状或菊花状白斑．在病理切片上可见巨大细胞核，依病程发展，有的核无结构化，有的有各种异物积聚，有的遍布囊泡，有的密集着大量ＬＮＢＶ粒子，并造成核固缩或者核膜极度扩张、破裂而崩解．这些病理过程、病变特点和具有特殊构型的ＬＮＢＶ粒子的存在，可作为该病毒病的特征性诊断指标．膜性系统广泛髓样变性和肌原原纤维排列紊乱和肌节断裂，在其他杆状病毒病不多见，可作为诊断该病毒病的重要辅助性指标．而细菌继发感染对评估预后和指导捕捞是有价值的．文中讨论了ＬＮＢＶ作用机制．     

斑节对虾白斑症的发病历程

目的：探讨对虾白斑症的病程及病症特点,方法：对健康斑节对虾进行人工感染,同时用套式ＰＣＲ检测感染后斑节对虾血液中病毒核酸的相对含量,结果：斑节对虾感染白斑症病毒后,依次表现出厌食,不活动、体色变红、甲壳出现白斑,反应迟钝直至侧卧死亡,濒死对虾的典型症状为空胃、红体、甲壳白斑、甲壳下水肿及甲壳易剥离;感染对虾出现拒食后,其血液中白斑症病毒（ＷＳＳＶ）ＤＮＡ的相对含量急剧增加。结论甲过同步不肿和甲壳易     

由TMV 54×10~3蛋白基因构建的转基因番茄及其对TMV的抗性

通过土壤农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）的介导,将烟草花叶病毒（ＴＭＶ）的５４×１０３蛋白ｃＤＮＡ转入番茄植物中,得到了转基因植株．这些植株抗卡那霉素,具有胭脂碱合成酶的活性．ＤＮＡ的ＰＣＲ扩增及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ　ｂｌｏｔ分析表明,５４×１０３蛋白基因已整合到番茄基因组上．攻毒实验表明,未转基因的对照组接种病毒２周后即出现花叶,并且随着时间的推移,花叶症状更加典型．而转基因的植物接种病毒后一直到开花结果都未见发病,即没有花叶出现．     

南中国斑节对虾养殖中控制白斑综合症病的理论和策略

White spot syndrome virus (WSSV) is the causative agent of white spot syndrome (WSS) of cultured penaeid shrimps. WSS breaks out and prevails in cultured penaeid shrimps in many countries and regions of the world, especially in southeast Asia. WSSV is the virus most severe damaging to the cultured penaeid shrimps in the world. At the present time, the control of the outbreaks of WSSV will recover and develop the penaeid shrimp cultures in China and even in the world.     

中国对虾慢性亚硝酸盐和氨中毒的组织病理学研究

采用投喂鲜蛤肉、吸底、换入适量的沙滤水等常规的饲养方法,使试验水体的亚硝酸盐含量逐渐上升,氨浓度也高出洁净海水数倍,从而造成对虾中毒。结果表明：高浓度的亚硝酸盐和氨使得试验虾肝胰腺、胃、中肠和鳃等组织产生异常变化,出现从细胞肿胀到空泡化、坏死等一系列的组织病理学变化。     

Recombination: Multiply infected spleen cells in HIV patients

The genome of the human immunodeficiency virus is highly prone to recombination, although it is not obvious whether recombinants arise infrequently or whether they are constantly being spawned but escape identification because of the massive and rapid turnover of virus particles. Here we use fluorescence in situ hybridization to estimate the number of proviruses harboured by individual splenocytes from two HIV patients, and determine the extent of recombination by sequencing amplified DNA from these cells. We find an average of three or four proviruses per cell and evidence for huge numbers of recombinants and extensive genetic variation. Although this creates problems for phylogenetic analyses, which ignore recombination effects, the intracellular variation may help to broaden immune recognition.     

芋的脱毒快繁及栽培研究

通过对山东省芋种植区的主要栽培品种进行的病毒病害调查，根据国内外有关报道和受侵染叶片病症，及生物学方法检测，确认了侵染芋的主要病毒种类。利用梯度热处理和茎尖脱毒技术获得脱毒苗，经过检测，脱毒效果良好，然后进行组织培养。通过试验种植，脱毒苗子芋数、单芋重均高于未脱毒的对照组。     

虾类维生素E营养研究新进展

维生素E是虾类不可缺少的脂溶性维生素,在虾类生长过程中起着重要作用.约近90年的研究,维生素E的化学结构、组织分布与代谢机制已经为人们所了解.本文综述和评论了维生素E营养在虾类繁殖、生长、抗氧化功能,以及需要量的最新研究进展,并对其未来研究进行了展望.     

Occurrence, Development and Histochemical Characteristics of Lymphocystis in Cultured Japanese Flounder （Paralichthys olivaceus）

Occurrence and development of lymphocystis cells in flounder Paralichthys olivaceus, and some his-tochemical features are studied using light and electron microscopy and histochemical methods. Fibrob-lasts engulf virus particles forming phagocytosis vacuole in the cytoplasm. The infected cells proliferate and turn round and hypertrophied; basophilic inclusion bodies, Feulgen-positive, are present in the cyto-plasm, and a hyaline capsule, containing acid ploysaccharide and protein, appears outside cell mem-brane. The mature lymphocystis cells possess numerous virus particles (200～220nm in diameter with a central core 120～140nm) and high electron-dense inclusions with budding virious at the surface in the cytoplasm, and show margination of chromatin. Moderate electron density particles (70～80nm in diame-ter) fill out perinuclear cistema and arrange in crystalloid arrays in nucleus, liberated into the cytoplasm by rupture of nuclear membrane. No virus particles are observed in nucleus. Therefore, inclusion bodies are the sites of virus assembly and maturity, while replication processes of lymphocystis virus are involved in both nuclear and cytoplasmic phases. Besides, strongly basophilic link-like structures are present be-tween adjacent cells or through connective tissue, and virus particles are observed in somewhere of the capsule, thus where may be the spread route of virus from one cell to another or to the environment. The senile lymphocystis cells release virus bv the runture of cells.