木聚糖降解菌的筛选和木聚糖酶性质的研究

筛选两株生长快、产木聚糖酶活力高的菌种；黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ，ＡＮ０１）、链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｓｐ．Ｓｔｒ７Ｂ），酶活力分别达１２８ｍｇ／Ｌ·ｍｉｎ和１７６ｍｇ／Ｌ·ｍｉｎ；酶反应最适温度分别为６０℃与５０℃；最适ｐＨ值为５．０和６．０，并分别在ｐＨ２．２～５．０，５．８～６．４酶活性稳定；在６０℃条件下保温１．５ｈ，酶活力分别剩余２０．５％，８８．５％，其中ＡＮ０１株原酶液在９０℃保温１０ｍｉｎ，活力仍剩余１４．５％．Ｃｕ２＋对酶活表现出极强抑制，Ｆｅ２＋，Ｍｇ２＋，Ｃａ２＋等离子则有促进作用；用纸层析法探讨了不同培养时间各种产物产生的情况．     

内孢霉酵母糖化酶产酶条件及酶学特性的研究

本研究对Ｅｎｄｏｍｙｃｏｐｓｉｓｆｉｂｕｌｉｇｅｒａ（内孢霉酵母）糖化酶发酵进行培养基的选择，并对产酶时间、接种量、装量和初始ｐＨ值诸因素进行探讨，获得最佳产酶条件．该糖化酶以可溶性淀粉为底物，最适ｐＨ为５．２，最适温度４０℃；在５０℃以下较稳定，有较宽的ｐＨ稳定范围（ｐＨ３．０－７．０）；米氏常数Ｋｍ＝１２．８４ｍｇ·ｍｌ－１．     

激光复合诱变黑曲霉原生质体选育热稳定菊粉酶高产菌

以菊粉酶产生菌黑曲霉ＡＳ－４原生质体为对象,经激光和亚硝基胍复合诱变,从大量突变株中最终选育出高产热稳定的菊粉酶产生菌ＡＬ－１５４．在以菊芋提取液为碳源、玉米浆加０．３％酵母膏为氮源的基本培养基中,菊粉酶活力达１４６．３ｕ／ｍＬ,比出发株提高近３倍．其产酶最适营养条件为：起始ｐＨ４．５～５．０,２８～３０℃,３６ｈ时产酶量达最高．酶作用最适条件为ｐＨ５．０,６０℃;该酶遗传性能稳定,热稳定性强,６０℃保温处理２ｈ,其酶活性不变,６５℃保温３０ｍｉｎ,仍保留９８％的初始酶活     

绿色木霉固态发酵产纤维素酶条件及酶性质的研究

对绿色木霉 Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ　ｖｉｒｉｄｅ９４０５固态发酵产纤维素酶的条件及酶的性质进行了研究。结果表明,最适产酶条件为：秸秆粉与麸皮的比 ７：３;玉米秸秆粉培养基含水量２５０％;花生皮粉培养基含水量１５０％;ｐＨ４．０～４．５;温度３０℃;周期７２ｈ。在玉米秸秆粉固体培养基上,所产纤维素酶ＣＭＣ活力为１３８６ｕ／ｇ,ＦＰＡ活力为２１７ｕ／ｇ,棉花糖化力为３２５ｕ／ｇ。必作用的最适条件为ｐＨ４． ５～５． ０,温度 ５０℃;在 ４５℃以下, ｐＨ３． ５～６． ０之间比较稳定,室温放置半年,酶活保存率在９０％以上。     

黑曲霉单宁酶的纯化及部分性质研究

黑曲霉在五倍子单宁的诱导下产生单宁酶。通过（ＮＨ４）２ＳＯ４分形沉淀,ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换层析,Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１５０凝胶过滤,从黑曲霉的发酵液和菌丝中纯化得到凝胶电泳均一的单宁酶。酶作用的最适温度为３０℃,最适ｐＨ值为５．５,在温度１０－３０℃和ｐＨ４－６之间保持稳定,金属离子对单宁酶没有的激活作用,Ｆｅ＾２＋和Ｍｎ＾２＋则对酶有抑制作用。     

克鲁维酵母y－85菊粉酶水解菊粉的研究及其中试

克鲁维酵母（Ｋｌｕｖｅｒｏｍｙｃｅｓｓｐ．）Ｙ－８５在菊粉提取液培养基中生长产菊粉酶，其细胞和胞外的菊粉酶活力分别约占菊粉酶总活力的７６％和２４％．试验中以酶发酵液作酶液．该酶的Ｓ／Ｉ值为１５．２．酶液在５０，５５和６０℃下保温１ｈ，活力分别残留１００％，９６％和６５％；在８℃下放置７ｄ，１４ｄ，酶活力分别残留９８％和９６％．在ｐＨ３．６～７．０内，酶活性十分稳定．５ｍｍｏｌＬ－半胱氨酸和Ｆｅ＋２分别可使酶活力提高１０．４％和４１．２％．ｙ－８５菊粉酶水解菊粉的适宜条件是：底物为总糖浓度１０％～１５％菊粉提取液，ｐＨ５．０，温度为５５℃，酶用量为底物每克糖加酶８００ｕ（以蔗糖为底物测酶活力）或２６．３ｕ（以菊糖为底物测酶活力）、搅拌酶解６ｈ．在上述条件上，底物降解率最高可达９８．５％．酶解液中，果糖占总还原糖量的８５％．用１１００Ｌ罐进行酶解中试，５批试验，底物降解率平均达９４．２％．     

黑曲霉 A3 木聚糖酶的纯化和性质

黑曲霉Ａ３（ＡｓｐｅｒｇｉｌｕｓｎｉｇｅｒＡ３）为高产木聚糖酶菌株。该菌所产生的木聚糖粗酶经硫酸铵、乙醇沉淀,ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００和ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０分离纯化后,获得３个组分,分别称为Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３。它们的最适反应温度和ｐＨ依次为４０、５０、５０℃和３５、４５、５０。     

糖化酶的分批发酵动力学研究

用国内常规糖化酶生产菌株黑曲霉ＵＶ－１１,利用５升全自动发酵罐培养,在以淀粉为碳源,ＮＨ４Ｃｌ为氮源的合成培养基中,３３℃,ｐＨ４．５条件下进行分批发酵,菌体比生长速率为０．０２～０．０３１／ｈ时,糖化酶的比生产速率可达最大,为１５００～１８００ｕ／ｇ．ｈ,酶活力为２１９０ｕ／ｍｌ。     

黑曲霉胞外葡萄糖淀粉酶的纯化及特性

黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ７２８）的粗酶液，经硫酸铵沉淀，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５柱凝胶过滤脱盐，ＤＥＡＥ－Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ离子交换柱层析和ＳｅｐｈａｃｒｙＳ－１００凝胶层析纯化，经ＰＡＧＥ鉴定为一条带ＳＤＳ凝胶电泳测定分子量为７００００．金属离子Ｆｅ３＋对该酶有一定的抑制作用，该酶的等电点为３．７，最适ｐＨ为４，最适温度为６０℃．Ｅ２８０１％为１５．７２，Ｋｍ值为０．１１２×１０－３ｍ．     

K_(123)菌株普鲁兰酶(Pullulanase)的合成及其酶性质的研究

研究了一株从白酒发酵现场分离得到的Ｋ１２３菌株普鲁兰酶的合成及其部分酶性质．结果是Ｋ１２３菌株的异淀粉酶在培养液中的大量积累发生在稳定期后期,菌的最适生长温度为３５℃,产酶的最适温度则为３０℃;菌的最适生长ｐＨ和产酶的最适ｐＨ均在７．０～７．５;产酶的最佳碳源为可溶性淀粉,有效碳源是糯米淀粉、糊精、支链淀粉、玉米面、茁霉多糖、麦芽糖,而葡萄糖则抑制产酶;产酶的最佳氮源是蛋白胨、酪素水解物,无机氮源则使得Ｋ１２３菌株的产酶量略低于有机氮源．通气量对菌体的生长影响较大,但菌体的生长达稳定期后,通气量的改变对菌的产酶影响不大．Ｋ１２３菌株所产的异淀粉酶水解茁霉多糖的产物为麦芽三糖,不水解动物淀粉,是普鲁兰酶（ｐｕｌｕｌａｎａｓｅ）．该酶反应的最适温度为５０℃,最适ｐＨ５．８,受Ｃａ２＋,Ｍｎ２＋等离子激活,受Ｃｕ２＋,Ｚｎ２＋等离子抑制;该酶的热稳定性较差,５０℃以上迅速失活;ｐＨ稳定性较好,中性,微酸性条件下,冰箱中可长期保存．该酶应用于固态白酒发酵可提高出酒率平均４％以上．     

棒曲霉UA—2木聚糖酶的蔗渣固态发酵

棒曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｕｓｃｌａｖａｔｕｓ）ＵＡ－２固态发酵蔗渣产木聚酶的培养基为每克蔗渣加营养液５ｍｌ，初始ｐＨ８．５．营养液的适宜组成为每升含：ＮＨ４ＮＯ３１０ｇ、Ｋ２ＨＰＯ４６ｇ、ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０．７５ｇ、ＣａＣｌ２０．７５ｇ、ＦｅＳＯ４·７Ｈ２Ｏ１１．２５ｍｇ、ＭｎＳＯ４·Ｈ２Ｏ３．７５ｍｇ、ＺｎＳＯ４３．０ｍｇ、ＣｏＣｌ２４．５ｍｇ．在上述培养基中接入其湿重１０％（Ｗ／Ｗ）的新鲜的ＵＡ－２种子曲，２８℃培养１０８ｈ，其木聚糖酶，滤纸降解酶和羧甲基纤维素酶的活力分别为２６９５．６、２８．５和４２．７ｕ／ｇ蔗渣．酶反应的最适ｐＨ５．０，最适温度５０℃；在ｐＨ４．０～１１．０内酶活性十分稳定．５０℃保温１ｈ，酶活剩余５５％，８℃下放置２３ｄ，活力几乎不变．磷酸盐，半胱氨酸对酶有激活作用，ＥＤＴＡ和对氯汞本甲酸对酶有抑制作用     

紫外诱变原生质体选育碱性蛋白酶高产菌株的研究──1出发菌株的筛选及产酶条件的研究

从土壤中筛选到一株嗜碱性地衣芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）５３－Ａ６．，该菌株能在ｐＨ１０以上６０℃的环境中良好生长，４５℃ｐＨ９～１２的条件下均可产生活力较高的碱性蛋白酶。酶反应的最适条件：６０℃，ｐＨ１０～１１，在ｐＨ８．５～１１之间较稳定。６０℃保温１ｈ剩余酶活在２０％以上。     

豇豆幼叶多胺氧化酶的分离纯化

依次经粗提、φ为３５ ％ ～６０％ 硫酸铵分步沉淀、φ为７０ ％ 丙酮沉淀、ＤＥＡＥＣｅｌｌｕｌｏｓｅ柱层析、Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ Ｃｌ４Ｂ柱层析和羟基磷灰石柱层析等步骤后首次从豇豆幼叶得到电泳均一的、亚基相对分子质量约为７０ ０００ 的多胺氧化酶． 纯化倍数为４７３３, 产率为１３１ ％ ． 该酶在０１ ｍｏｌ／ＬＰＢＳ（ｐＨ７０ ～７５） 中较为稳定, 冷冻（ － １５ ℃） 贮存则可保持２０ ｄ 内不失活     

黑曲霉AJ1958菊粉酶的产生和性质

从菊芋根际土壤中分离出一株菊粉酶（ＩｎｕｌｉｎａｓｅＥ．Ｃ．３．２．１．７）产生菌，经物理和化学诱变得高酶活黑曲霉突变株ＡＪ１９５８．该菌株在培养基（０．０７ｇ／ｍＬ菊芋提取液１０００ｍＬ，豆饼粉５ｇ，麸皮５ｇ，ＫＣＩ０．７ｇ，ＦｅＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０．０１ｇ，ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０．５ｇ，ＰＨ５．０）中，于３０℃振荡培养３ｄ，酶活力可达６４μｍｏｌ·ｍｉｎ－１．酶水解反应的最适ＰＨ为３．０～４．０，最适温度为６０℃，在ＰＨ２．５～５．５的范围内和７５℃以下较稳定．适宜条件下，１０ｈ内０．０５ｇ／ｍＬ的菊粉溶液中之底物几乎１００％被酶水解．产物糖中果糖质量分数为９３％，葡萄糖质量分数为５．６％．该突变株产生的菊粉酶具有较满意的水解性和热稳定性．     

环糊精葡萄糖基转移酶在壳聚糖上的固定化

以甲醛作为活化剂将环糊精葡萄糖基移酶（ＣＧＴａｓｅ，ＥＣ，３．２，２．１９）固定在壳聚糖上。发现ＣＧＴａｓｅ经固定化后，最适温度没有改变，最适ｐＨ从６．０移到５．０，热稳定性及ｐＨ稳定性都有所提高，在ｐＨ８．５和５０℃下，经过４次分批反应，固定化酶保留约６６％活力，柱式连续反应的半衰期大约为６天。     

菊芋的酶降解及其综合利用

菊芋富含菊粉,菊粉经菊粉酶一步酶解,可生产高果糖浆．报道了菊芋发酵生产菊粉酶、高果糖浆、酒精等研究结果,国内外研究进展以及酶解产物的综合利用．经诱变选育出的高产突变株ＡＬ１５４ 菊粉酶的活力达１４６ ．３ μ／ｍＬ,比出发株提高近３ 倍,菊粉酶酶解菊芋提取液的最适工艺条件为：ｐＨ５ ．０ ,６０ ℃,底物总糖浓度１０％ ～２０ ％ ,酶用量３ ．０ μ／ｇ菊糖,酶解时间１０ ｈ ,底物降解率达９７ ．２ ％ ,酶解产物中果糖占总糖的８６ ．１ ％ ．     

克鲁维酵母Y－85菊粉酶的研究

菊粉酶产生菌株─—克鲁维酵母Ｙ－８５在１５Ｌ罐中进行产酶发酵，培养２４ｈ，发酵液中菊粉酶的总活力可达１０３２ｕ／ｍｌ，其中胞壁酶活７６８ｕ／ｍｌ，占总酶活的７４％。用含半胱氨酸的缓冲液提取胞壁酶，酶的回收率达８８％，比活力可达１００８ｕ／ｍｇ．酶作用于菊糖的最适ｐＨ为４．５，最适温度为５０℃，在５０℃以下和ｐＨ４～８稳定，金属离子Ａｇ￣＋、Ｈｇ￣（２＋）对酶有强烈的抑制作用，ＰＣＭＢ对酶也有明显的抑制作用。该酶可水解菊糖，棉子糖和蔗糖等多种底物，能快速将菊芋抽提液中的菊糖水解成果糖，适合用于以菊芋为原料的高果糖浆生产。     

紫外诱变原生质体选育碱性蛋白酶高产菌株的研究…

从土壤中筛选到一株嗜碱性地衣芽孢杆菌５３－Ａ６．，该菌株能在ｐＨ１０以上６０℃的环境中良好生长，４５℃ｐＨ９￣１２的条件下均可产生活力较高的碱性蛋白酶，酶反应的最适条件：６０℃，ｐＨ１０￣１１，在ｐＨ８．５￣１１之间较稳定。６０℃保温１ｈ剩余酶活在２０％以上。     

里氏木霉制备木聚糖酶的产酶历程

以玉米芯木聚糖为原料,里氏木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｓｅｉ）ＲｕｔＣ３０为菌种,采用改进的Ｍａｎｄｅｌｓ配方制备木聚糖酶,产酶历程与制备纤维素酶时有较大差异。具体表现在产酶周期短,ｐＨ值基本无下降的趋势,酶液中可溶性蛋白质浓度较低。底物浓度为７ｇ／Ｌ时,木聚糖酶活力达１２５６ＩＵ／ｍＬ,比活力、酶得率及酶产率分别为８１９０ＩＵ／ｍｇ蛋白质、１７９４３ＩＵ／ｇ木聚糖和４１８６．７ＩＵ／Ｌ·ｄ。产酶最终ｐＨ应控制在６～７较为适宜,酶活力最高。ｐＨ超过７．０,酶可能失活。酶解结果表明,木聚糖酶对木聚糖干粉具有很高的降解效率,当每克底物的酶用量为０．１克木聚糖干粉产的酶液量时,酶解得率一般可达９０％左右。     

木霉4131菌株纤维素酶的分离纯化和部分性质研究

绿色木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ Ｖｉｒｉｄｅ）突变菌株４１３１＾［１］产生的纤维素酶经过ｓｅｐｈａｄｅｘＧ－７５和ＤＥＡＥ－ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ａ－２５两种层析分离,分离得到具有内切α－葡聚糖酶（ＣＭＣａｓｅ）活性的纯组分,提纯后酶的比活力提高到原来的２６．２倍;回收率为３２．８％,分子量为５６９００,等电点为４．０,最适反应温度为５５℃,最适ｐＨ为４．５,金属离子Ｋ＾＋,Ｎａ＾＋,Ｍｇ＾２＋对其