酶解-超声法破碎大肠杆菌提纯包含体

大肠杆菌的破碎方法对包含体的纯度有较大影响.采用酶解和超声波相结合的方式进行了大肠杆菌的破碎实验研究,考察了溶菌酶用量、酶解温度、超声处理功率和时间等因素对菌体破碎程度的影响,通过测定破碎液的A650,A280,A260 nm来反映细胞的破碎程度和胞内蛋白及核酸物质的释放情况.在优化的条件下,每克湿菌体添加2 mg溶菌酶,30 ℃酶解60 min、500 W超声破碎50次后,经分离洗涤可获得纯度达57%的包含体.本方法可获得纯度更高的包含体,利于重组蛋白的进一步纯化.     

耐人寻味的课堂提问

问题是语文课堂教学的心脏。在平时的教学活动中,只要我们以学生的发展为根,深入了解学生的实际情况,不断地钻研教材和课程标准,精心设计出每一个问题,一定会开启学生思维的闸门,帮助孩子养成勤于思考的习惯。     

抗癌药物L-天冬酰胺酶摇瓶发酵研究

对大肠杆菌 Ｌ－ 天冬酰胺酶的摇瓶发酵进行了研究。在最适条件下发酵 １２ｈ，可使产酶达到６０ｕ／ｍ ｌ。在培养基中添加 ００１％ 硫酸亚铁和 ２％ 的 Ｗ 试剂可分别提高产酶能力 １５％ 和２８％ 。该发酵过程是一个耗氧很大的过程。     

温度对日本三角涡虫种群增长及抗氧化酶活力的影响

应用种群累积培养法,就培养液温度对日本三角涡虫种群增长及体内3种抗氧化酶活力的影响进行了探讨.结果表明,5℃和35℃下的涡虫不能长期生存.30 d时25℃实验组种群密度最高、20℃实验组次之;第9 d后15℃-30℃实验组涡虫种群瞬时增长率随时间的推移均呈现逐渐下降的趋势.另外,10℃-20℃实验组涡虫SOD活力较其他实验组低,而15℃实验组涡虫CAT活力却较其他实验组高;GSH-PX活力受培养液温度的影响明显且波动较大,随着培养液温度的升高其活力总体呈现增加趋势.涡虫的SOD、CAT和GSH-PX 3种抗氧化酶对培养液温度变化的响应存在差异的机制值得进一步探讨.     

糖化酶的分批发酵动力学研究

用国内常规糖化酶生产菌株黑曲霉ＵＶ－１１,利用５升全自动发酵罐培养,在以淀粉为碳源,ＮＨ４Ｃｌ为氮源的合成培养基中,３３℃,ｐＨ４．５条件下进行分批发酵,菌体比生长速率为０．０２～０．０３１／ｈ时,糖化酶的比生产速率可达最大,为１５００～１８００ｕ／ｇ．ｈ,酶活力为２１９０ｕ／ｍｌ。     

活菌制剂HL－08菌的液体发酵培养

本文报告了活菌制剂ＨＬ－０８菌的液体培养研究。对培养基的营养成分作了筛选，并通过正交实验对成分的配比进行了优化，可使茵体浓度达１７．７×１０９个／ｍｌ。对ＨＬ－０８菌的培养条件也作了试验，当装液量为２５ｍｌ，培养温度为３４－３５℃，培养基起始ｐＨ为６．５－７．０，接种量为８－１０×１０６个／ｍｌ时，可获得理想的结果。另外，还对发酵过程进行了测定，确定了摇瓶发酵周期（４８小时），也为大规模培养ＨＬ－０８菌提供了可靠的基础数据。     

流加葡萄糖对L-天冬酰胺酶发酵的影响及其动力学特性

着重讨论了葡萄糖对Ｌ－天冬酰胺酶发酵过程的影响,并对其发酵动力学特性进行了分析。采用自动流加葡萄糖控制发酵ｐＨ的工艺,可使Ｌ－天冬酰胺酶活力达到６４ｕ／ｍｌ,比添加葡萄糖的摇瓶发酵提高了１４６％。流加葡萄糖控制ｐＨ的Ｌ－天冬酰胺酶发酵是生长相关的;维持２～５ｍｇ／ｍｌ和１．２～１．４ｍｇ／ｍｌ的葡萄糖浓度,可分别使比生长速率和比产酶速率达到０．８１／ｈ和１２００ｕ／ｇ．ｈ。     

氧载体对L-天冬酰胺酶发酵过程影响的研究

以抗癌药物L－天冬酰胺酶生产为应用背景,针对发酵过程中存在的严重耗氧问题,研究了氧载体对发酵过程的影响。通过对几种氧载体的筛选,认为正十二烷最适合该发酵过程。随后以产物L－天冬酰胺酶活性、菌体浓度以及溶氧水平为主要指标,考察了氧载体在发酵过程中的作用,实验表明,发酵基质中5％正十二烷的添加量为最佳浓度,这种氧载体的加入,明显地提高了发酵介质中的溶氧水平,改善了供氧条件,增加了菌体浓度,提高了L－天冬酰胺酶发酵水平,在优化条件下,可使发酵液最终酶活提高21％左右。     

pH对L-天冬酰胺酶发酵的影响及其控制

pH对大肠杆菌L-天冬酰胺酶的产生有很大的影响.通过对不同缓冲体系试验和对摇瓶发酵过程pH变化的分析,了解摇瓶发酵过程中pH对L-天冬酰胺酶合成的影响.采用流加磷酸自控L-天冬酰胺酶发酵过程的pH,可延长发酵周期,有效地防止菌体的过早自溶,大大促进L-天冬酰胺酶的合成,较分批发酵提高产酶83%,达到110 u/mL.发酵动力学特性分析表明,该发酵方式L-天冬酰胺酶的合成与菌体生长不相关,控制比生长速率μ为0.15～0.30 h-1,均有利于L-天冬酰胺酶的合成,可使比产酶速率的最大值Qpmax达到3 922 u/(g h).     

关注细节使语文教学出彩

教育是一堆细节,细节成就了我们的语文课堂,重视细节会使我们的语文课堂更精彩。教学细节突出的是教学的理念:尊重学生、理解学生,有效保护学生的学习积极性,让学生学会在合作探究中学习,让学生成为学习的主人。正是这些教学细节才使我们的语文课堂教学中闪动着灵动的智慧,洋溢着人性的光辉。