抗体合成过程中的影印假设

决定抗体的基因是有限的,抗原的种类是无限的,以有限的基因决定无限种类的抗体,从理论上讲是不可能完成的,但事实上确实完成了.抗原种类不同的主要原因可能是由于抗原是由不同抗原决定簇或相同抗原决定簇不同排列组合决定.这就应该存在组成抗体的氨基酸排列顺序相同,但空间结构不同的抗体.这种信息应该影印在B细胞的糖蛋白上,所以也应该存在人类尚未发现的、区别于中心法则的另一条途径———影印途径.     

抗原化抗体及其应用

抗原化抗体是在抗体分子可变区的互补决定区中插入外源蛋白寡肽的人工构建抗体，综述了抗原化抗体的性质，构建方法，应用及展望。     

抗原化抗体及其应用

抗原化抗体是指在抗体分子可变区的互补决定区中插入外源蛋白寡肽的人工构建抗体 综述了抗原化抗体的性质、构建方法、应用及展望     

植物表达抗体的研究进展

利用转基因植物生产抗体是一个新兴的生物技术领域。这种技术将编码全抗体或抗体片段的基因导入植物，从而在植物中产生全抗体或抗体片段，获得的抗体能功能性地识别抗原并结合抗原。目前已有农杆菌介导转移法和基因枪法等多种转化技术用于将抗体基因导入植物细胞。利用植物表达抗体的一大优势是能大规模廉价生产免疫治疗用抗体。此外，植物抗体也可用于植物自身抗病，并能调节植物细胞代谢。本文主要就植物生产抗体的方法、抗体的表达及应用作一综述。     

胃黏膜细胞DNA倍体分析及细胞膜Fas表达研究进展

Fas是主要存在于细胞膜上的一种能诱导细胞凋亡的糖蛋白．而DNA倍体分析可反映细胞增殖状态．检测DNA倍体和Fas抗原有望在胃癌的早期诊断、治疗、预后、监测、复发等方面发挥重要作用．     

抗体在植物中的表达及应用前景

抗体是动物机体在外源物质(抗原)的刺激下由免疫系统及淋巴细胞产生,并能与抗原特异结合的免疫球蛋白。抗体作为机体自然免疫系统的一部分,具有特异性结合抗原、中和病毒以及与血清中一种被称为“补体”的蛋白质协同完成免疫应答反应等生物学功能,可用于治疗和诊断。抗原抗体的关系类似钥匙与锁的关系,一把锁只有相应的钥匙可以打开。正是由于抗体的高度特异性、亲和性及其性能的多样性,使抗体成为一种具有特殊用途的蛋白。成熟的抗体由抗体的重链和轻链双链组成,而结合抗原的单链抗体及催化抗体的设计进一步     

SLE患者血清ENA抗体的检测及临床意义

系统性红斑狼疮(Systemic Lupus erythematosus, SLE)是一种病因不明的自身免疫病,病人体内由于B淋巴细胞多克隆激活而产生多种自身抗体,这些抗体能与细胞核或胞浆内的许多成分反应,对SLE的诊断有重要意义,如抗ds—DNA抗体,抗组蛋白抗体,抗Sm抗体等。由Halman等(1959)首先报导某些SLE患者血清中有一种自身抗体,能和细胞核的盐水可溶性成分反应,命名为可提取核抗原(extractable nuclear antigen, ENA)抗体。后经学者研究,发现ENA含多种抗原成分,如Sm、RNP、SSA、SSB、ScL—70、Jo—1、Ku、HSP—90等,其相应抗体对风湿病的诊断和鉴别诊断有重要价值,如抗Sm抗体对SLE特异性较高,高滴度RNP抗体对混合性结缔组织病(MCTD)特异性较高,SSA及SSB抗体是干燥综合征(SS)特异性抗体。研究较多的是Sm和RNP抗体。 1 ENA抗原的分子特性 ENA属非组蛋白核蛋白,因其大多数是酸性蛋白,所以又称酸性核蛋白。ENA常从兔或小牛胸腺、猪胸腺、Hela细胞、Wi1—2细     

DNA疫苗经基因枪介导的免疫研究

将基因枪介导的DNA疫苗用于小鼠腹部免疫,并用免疫组化法检测gD抗原在接种部位的表达,利用ELISA检测血清中的抗gD抗体,并采用病毒攻击检测DNA疫苗对动物的保护效果。结果表明,基因枪可有效地将DNA质粒运送至小鼠皮肤组织,DNA疫苗携带的抗原保护基因gD2糖蛋白能在真皮和肌肉组织中高效表达。同时,免疫小鼠体内产生高滴度的中和抗体,能有效抵抗HSV2病毒的攻击。     

利用多克隆抗体检测纺锤体蛋白基因INAIAP在肝癌细胞中的表达

为探究纺锤体蛋白INMAP的功能及其在细胞恶性增殖中发挥的作用,制备INMAP多克隆抗体。利用0.1 mmol/L IPTG于16℃诱导His-INMAP融合蛋白进行原核表达,SDS-PAGE及免疫印迹检测蛋白表达。4.0 mol/L尿素处理包涵体获得可溶性融合蛋白,镍亲和柱分离纯化融合蛋白抗原并检测蛋白浓度及纯度。以所获抗原免疫4只Balb/c小鼠,收集心脏抗血清。以纯化前、后的原核表达产物作为抗原,检测INMAP多克隆抗体的特异性。通过免疫印迹分析INMAP在正常肝细胞系L-02及5个肝癌细胞系(PLC、Hep G2、SUN449、SMMC-7721和BEL-7402)中的表达差异。结果显示,His-INMAP融合蛋白主要以包涵体形式存在,经4.0 mol/L尿素处理可获得可溶性目的蛋白,且纯化后的抗原纯度较高(94.1%)。INMAP多克隆抗体能与INMAP抗原特异结合。INMAP在6种肝细胞中具有多态性,除PLC外,在其他肝癌细胞中其基因表达水平显著下调。本研究制备的INMAP多克隆抗体特异性高,为INMAP基因功能的进一步研究奠定了基础。     

金鱼Caspase-8多克隆抗体的制备

为研究环境压力对金鱼细胞凋亡外在途径的影响,设计特异性引物扩增Caspase-8基因片段(编码第305—763位氨基酸),然后进行原核表达,并通过动物免疫实验制备Caspase-8多克隆抗体,检测其效价、金鱼不同组织表达水平和相关蛋白互作.结果表明：制备的Caspase-8多克隆抗体与抗原结合的最大稀释倍数为1∶256 000,显示出良好的免疫原性;Caspase-8在金鱼不同组织中有不同程度表达;Caspase-8与E3泛素连接酶cullin3存在相互作用.综上,制备的Caspase-8多克隆抗体有望应用于金鱼细胞凋亡蛋白Caspase-8表达水平及相关蛋白互作的研究中.     

利用多克隆抗体检测纺锤体蛋白基因INMAP在肝癌细胞中的表达

 为探究纺锤体蛋白INMAP 的功能及其在细胞恶性增殖中发挥的作用,制备INMAP 多克隆抗体.利用0.1 mmol/L IPTG于16℃诱导His-INMAP 融合蛋白进行原核表达,SDS-PAGE 及免疫印迹检测蛋白表达.4.0 mol/L 尿素处理包涵体获得可溶性融合蛋白,镍亲和柱分离纯化融合蛋白抗原并检测蛋白浓度及纯度.以所获抗原免疫4 只Balb/c 小鼠,收集心脏抗血清.以纯化前、后的原核表达产物作为抗原,检测INMAP 多克隆抗体的特异性.通过免疫印迹分析INMAP 在正常肝细胞系L-02 及5个肝癌细胞系(PLC、HepG2、SUN449、SMMC-7721 和BEL-7402)中的表达差异.结果显示,His-INMAP 融合蛋白主要以包涵体形式存在,经4.0 mol/L 尿素处理可获得可溶性目的蛋白,且纯化后的抗原纯度较高(94.1%).INMAP 多克隆抗体能与INMAP 抗原特异结合.INMAP 在6 种肝细胞中具有多态性,除PLC 外,在其他肝癌细胞中其基因表达水平显著下调.本研究制备的INMAP 多克隆抗体特异性高,为INMAP 基因功能的进一步研究奠定了基础.     

抗人胃腺癌细胞株AGS单克隆抗体的制备和初步鉴定

用人胃癌细胞株AGS作为抗原免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术制备抗人胃癌细胞mAb,应用间接ELISA法进行筛选,显微操作法进行亚克隆并用琼脂糖双向免疫扩散法鉴定亚类,免疫化学法检测特异性,获得l株分泌抗AGS细胞株的mAb的杂交瘤(命名为1B4).该杂瘤分泌的mAb与人宫颈癌细胞株Hela、肝癌细胞株HepG2和正常胎儿肺细胞均为阴性反应,而与AGS细胞呈阳性反应.结果表明,该mAb对AGS细胞株具有一定的特异性,可为胃癌相关抗原的筛选研究提供一定的帮助.     

重组人源性抗HBsAg Fab抗体的特性分析

通过噬菌体展示技术从含高滴度抗乙肝表面抗原(HBsAg)抗体的人外周血淋巴细胞获得抗HBsAg Fab抗体的轻、重链基因．将Fab的轻、重链基因分别整合到巴斯德毕赤酵母(Pichua pastons)GS115菌株的染色体上，成功构建了高效分泌表达抗HBsAg Fab抗体的酵母工程菌．对酵母表达的重组Fab抗体进行了纯化，并对其相对分子质量、糖基化以及抗原结合能力等特性进行了分析，结果显示重组酵母分泌表达的重组人源性抗HBsAg Fab是一个相对分子质量为50000左右的低糖基化糖蛋白，1mg重组Fab抗体相当于40u的抗乙肝表面抗原抗体(20U／mg)．表明重组Fab抗体具有较强的结合HBsAg的能力．     

血小板相关抗体及膜糖蛋白检测在免疫性血小板减少症患者诊断中的价值

目的探讨血小板表面血小板相关抗体(血小板相关免疫球蛋白)及血小板膜糖蛋白在免疫性血小板减少症中的诊断及预后评价应用价值.方法采用流式细胞术(FCM)测定了70例血小板减少症患者及20名正常人血小板表面血小板相关免疫球蛋白(PAIgG)及血小板膜糖蛋白(CD61,CD41,GPIIb/IIIa).结果初治30例特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者中血小板相关抗体PAIgG在血小板表面阳性百分率均高于正常对照组(P<0.01),血小板膜糖蛋白均低于正常对照组(P<0.01);20例经激素治疗的ITP患者PAIgG与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.01),血小板膜糖蛋白与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.01);继发性血小板减少症患者(慢性再生障碍性贫血、白血病、类风湿关节炎)血小板相关抗体在血小板表面阳性百分率均高于正常对照组(P<0.01),血小板膜糖蛋白均低于正常对照组(P<0.01);20例治疗有效患者治疗后血小板相关抗体较治疗前下降(P<0.01),血小板膜糖蛋白上升,其差异有统计学意义(P<0.01).结论 FCM用于免疫性血小板减少症患者的血小板相关抗体及血小板膜糖蛋白检测,具有灵敏、快速、简便的特点,是适用于临床诊断的新方法,对免疫性血小板减少症的诊断及疗效观察有较好的实用价值.     

左氧氟沙星人工抗原的制备及其抗体鉴定

用N-羟基琥珀酰亚胺法把左氧氟沙星与载体蛋白牛血清白蛋白偶联制备免疫抗原,用氯甲酸异丁酯法将左氧氟沙星与鸡卵清蛋白偶联,制备包被检测抗原,采用紫外扫描法对合成的抗原进行鉴定.用免疫抗原免疫大白兔获得抗左氧氟沙星多克隆抗体血清,经间接ELISA试验检测特异性抗体效价,测得效价达1:212以上.通过紫外扫描及间接ELISA试验,结果表明,制备的抗原和抗体获得成功.     

硬骨鱼IgM结构和功能及其体液免疫应答

经典免疫学理论有2个基本模式阐述抗体免疫反应的发展和功能:（1）亲和力成熟依赖于机体本身的和通过突变形成的高亲和力抗体的抗原驱动选择过程；（2）抗体的生物效应功能是由抗体的类型所决定的.最近研究发现硬骨鱼的免疫系统通过调控结合抗原的亲和力大小来改变分泌的IgM抗体同质异构体结构的比例，从而影响其抗体在血清中的半衰期.这种独特性质的发现是对经典免疫学理论的补充和扩展.文章概述了硬骨鱼IgM抗体结构和功能的亲和力驱动调节，并介绍维持体液免疫记忆的长寿命浆细胞和记忆性B细胞的性质以及抗体分泌细胞（如原浆细胞、浆细胞）在体液免疫应答中的作用.了解硬骨鱼IgM结构和功能的关系，以及不同分化阶段B细胞维持体液免疫反应的机制，将有利于探索构建硬骨鱼免疫评价体系，并为高效的渔用疫苗开发和疫苗效果精确性评价奠定理论基础.     

烟草悬浮细胞细胞核及核骨架中存在有肌动蛋白和肌球蛋白的证据

自烟草悬浮培养细胞中分离出细胞核,提取核总蛋白后,用DNase Ⅰ消化去除核酸和2M NaCl抽提后制备成细胞核骨架.以抗β-actin的抗体作一抗,辣根过氧化物酶标记(HRP)的羊抗兔抗体作二抗进行免疫印迹.结果证实,在细胞质、细胞核与核骨架中均存在与肌动蛋白抗体呈阳性反应的抗原.以抗myosin Ⅰβ抗体作一抗,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔抗体作二抗进行免疫印迹.也证实了细胞核中存在与肌球蛋白抗体呈阳性反应的抗原.上述结果证明,肌动蛋白和肌球蛋白是烟草悬浮细胞细胞核及核骨架的组成成分.来源于老鼠纤维原细胞细胞核中的肌球蛋白Ⅰ存在于烟草细胞核中也表明细胞核中的肌动蛋白和肌球蛋白在生物进化过程中是相当保守的.     

抗人乳腺癌糖蛋白单克隆抗体的研究

以人乳腺癌组织提取的糖蛋白免疫后的BALB/C小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系SP2/0细胞融合,经筛选及克隆化培养,建立了1株稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株GP-1D_8。 McAb GP-1D_8与乳腺癌组织产生强阳性反应;与正常乳腺及一些其它肿瘤组织为阴性反应;与甲状腺癌及正常结肠组织出现弱交叉反应。 经Sepharcyl-S200 HR分子筛分离的抗原分子,分子量为66kd,与Western blot测出的分子量相符。抗原分子含糖量为16％。其抗原决定簇为一段耐70℃温度的多肽。与前人报导的乳癌相关抗原有区别,可能是一种新的乳腺癌相关抗原。     

用实验动物制备多克隆抗体Ⅱ.关于佐剂的评价

佐剂可以增强免疫反应。理想的佐剂能够激发多种实验动物维持较高的抗体滴度 (即使使用少量抗原 ) ,可用于大部分抗原 ,容易制备 ,便于注射 ,少量即可奏效 ,免疫毒性低 ,对研究者没有危害。遗憾的是目前还没有完全符合上述标准的佐剂。选择佐剂原则上由研究者执行 ,但应首先考虑被免疫的实验动物福利。接种混合液 (抗原 /佐剂 )应无菌制备以防污染。检测所用抗原是否需要佐剂 ,还是本身就具有佐剂的性能也是相当重要的。当用整个菌体、全细胞或其它特殊抗原 (如细胞碎片和细菌细胞壁 )时 ,通常不必使用佐剂 ,但使用可溶性抗原 (蛋白质、肽类…     

RH株弓形虫抗原及高效价多克隆抗体的制备

通过制备和分析弓形虫抗原蛋白，并以此抗原制备高效价的兔抗弓形虫多克隆抗体，为弓形虫的免疫检测和诊断提供有效的方法和途径，同时也为基因工程产物的鉴定提供方便有效的检测手段．速殖子主要来源于感染后72～74h获得的腹水，通过常规方法制备和提纯弓形虫可溶性抗原，采用SDS-AGE方法分析抗原蛋白的分子量．以抗原和福氏佐剂制备成完全和不完全福氏佐剂通过脊柱两旁皮下多点免疫的途径免疫新西兰大白兔，制备兔抗弓形体多克隆抗体，间接ELISA法检测血清中抗体的效价．经过观察所获得的虫体阶段主要处在宿主细胞巨噬细胞内而尚未逸出阶段，通过对结果的分析，所制备的弓形体抗原的分子量主要集中在17～156ku之间，与文献报道有差异，兔抗弓形体抗体效价在60000以上．该研究结果将为弓形体的蛋白质研究，免疫诊断、预防及有效治疗奠定基础．