红花黄色素抗凝血作用及对血小板聚集影响的研究

目的研究红花黄色素抗凝血作用及对血小板聚集的影响。方法大鼠心脏采血,取血浆检测凝血酶原时间(PT),凝血酶时间(TT),活化部分凝血活酶时间(APTT),血浆纤维蛋白原(Fib)含量;家兔颈动脉采血,取富血小板血浆(PRP)及穷血小板血浆(PPP),描记聚集曲线,计算聚集百分率,最大聚集百分率及药物的聚集抑制百分率。结果红花黄色素明显延长大鼠血浆凝血酶时间、凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间,明显降低大鼠血浆纤维蛋白原含量,显著抑制由二磷酸腺苷引起的家兔血小板聚集。结论红花黄色素具有抗凝血作用。     

长毛对虾酸性磷酸酶不可逆失活过程中的底物保护研究

根据酶活性不可逆改变的动力学方法，研究了长毛对虾（Ｐｅｎａｅｕｓｐｅｎｉｃｉｌａｔｕｓ）酸性磷酸酶在变性剂胍，脲作用下的不可逆失活．结果表明，酶在不同变性剂中的失活行为不尽相同．测得该酶在１．２ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍，３ｍｏｌ／Ｌ脲中的ｋ０／ｋ０′分别为５．０和４．３．ｋ０＞ｋ０′的事实说明游离酶比酶底物复合物具有更大的失活速度常数，底物的结合对酶的失活有明显的保护作用．酶底物复合物较大的抗失活能力也从一侧面证实了活性中心的柔曲性理论．     

芽孢杆菌超氧化物歧化酶的热和pH稳定性研究

研究了从质芽孢杆菌中提取的Ｆｅ－ＳＯＤ纯酶的热和ＰＨ稳定性。结果表明,在２５℃、３５℃下保温２０－９５ｍｉｎ酶活略出现增高,４５℃保温５０ｍｉｎ和８０ｍｉｎ其酶活分别为原酶的８１．０％和７０．０％;ＰＨ为６－１０时酶活稳定。     

纤维素酶曲的浅盘生产研究

本试验以里氏木霉Ｔｒ－Ｈ为出发菌株,对其浅盘培养条件及酶活测定方法进行优化,结果,当接种量为０．３％,初始ＰＨ值２．０,料层厚度２．５ｃｍ时,２８℃培养１６０小时,５０℃浸提,酶活从原来的２８０ｍｇＧ／ｇ．ｈ提高到６００ｍＧ／ｇ．ｈ;扣盘使酶活下降。     

凝血酶抑制剂抑制动力学研究

由Ｓ－２５４菌株产生的膜血酶抑制剂是一种多组分的肽类化合物，其中Ｒ－Ｔｈｒ－Ｔｈｒ－ａｒｇｉｎｉｎａｌ组分的活力最强。在３７℃、ｐＨ＝７．４的Ｔｒｉｓ缓冲液中，该抑制剂对凝血酶的抑制作用与抑制刑的浓度关系密切。在抑制剂浓度较小的情况下，抑制剂与酶的结合呈直线关系，随着抑制刑浓度的提高，残留活力曲线则出现漂移。根据Ｄｉｘｏｎ图和Ｌｉｎｅｗｅａｖｅｒ－Ｂｕｒｋ图的研究，该抑制剂对凝血酶的结合与底物呈竞争性抑制，抑制常数Ｋｉ＝２．０×１０－７ｍｏｌ／Ｌ。     

碱性脂肪酶的发酵及提取工艺

对圆弧青霉ＰＧ３７发酵产酶工艺及脂肪酶提取工艺等进行了系统的研究。实验结果表明,２０ｍ３发酵罐在通风量为０．３～０．８Ｖ／Ｖ／ｍｉｎ、搅拌转速为１８０ｒ／ｍｉｎ、发酵温度为２８℃、培养过程中流加棉籽油以控制发酵醪ｐＨ值为６．５～７．０的条件下,发酵８４ｈ左右,成熟发酵醪酶活为４５２０Ｕ／ｍＬ。发酵液经过滤、超滤浓缩、硫铵沉淀、造粒等过程制得颗粒碱性脂肪酶成品,酶的提取总收率在７０％以上,颗粒酶活力单位为５．０×１０４Ｕ／ｇ。     

硫酸铵盐析在蕲蛇毒凝血酶样酶分离中的应用

探讨了硫酸铵沉降对蕲蛇毒中凝血酶样酶的初步分离效果的影响 ,确定出最佳处理条件 :2 .0 %的蕲蛇毒在pH 5 .0及 4 5 %饱和度的硫酸铵溶液中盐析沉降蕲蛇毒中非凝血酶样酶杂蛋白 ,上清液即为所分离的凝血酶样酶组分     

固定化细胞合成L—苯丙氨酸的酶活及稳定性

研究了固定化酶ＰＡＬ合成Ｌ－苯丙氨酸过程中的酶活力与酶稳定性情况，找出了维持酶活的最佳保存条件，考察了不同氨基供体、肉桂酸、ｐＨ值及酶的不同固定化量等因素对酶反应过程的影响，确定其适宜反应条件为肉桂酸１．５％～２．０％，醋酸铵２～４ｍｏｌＬ－１，ｐＨ８．５～１０，温度３０℃，细胞固定化量为０．１ｇ湿细胞／ｇ固定化颗粒     

长白白眉蝮蛇蛇毒类凝血酶制品的生化分析

对长白白眉蝮蛇蛇毒类凝血酶的理化及酶学性质进行系统研究． 结果表明， 该酶为一分子量为３８ ０００， 等电点为４５０ 并对温度有很高稳定性的糖蛋白， 该酶的最适ｐ Ｈ 值为８０，其活力可被 Ｄ Ｆ Ｐ 和 Ｐ Ｍ Ｓ Ｆ抑制．     

正常血浆与正常全血在凝血过程中物理性能的差异

针对用旋转粘度计在恒定低切变率下测定抗凝血样复钙后的切应力随时间而变化的曲线,研究凝血状态检测和抗凝血药物的方法,提出了一种血液流变学理论模型,把血样看作非线性Maxwell流体,其物理性能(弹性模量和粘度等)都随凝血过程中结构的演化而变化.应用理论模型拟合实验结果,找出正常血浆与正常全血在低切变率下凝血过程中物理性能的差异.结果表明,正常血浆较正常全血的凝血过程慢,其粘度和屈服应力明显小,其凝固体的弹性却稍大.     

响应面法优化Anoxybacillus sp.YIM 342产耐高温α-淀粉酶发酵条件

 利用响应面法对Anoxybacillus sp.YIM 342产耐高温α-淀粉酶的液体发酵培养条件进行优化.在单因素试验的基础上,首先应用Plackett-Burman实验设计筛选在发酵过程中对产酶量影响较大的因素,然后利用中心组合设计确定对产酶量影响较大因素的最佳水平.筛选结果表明,淀粉和CaCl₂ 的浓度以及发酵时间对产酶量有显著的影响;最佳发酵条件为:淀粉11.73 g/L,CaCl₂ 0.65 g/L,发酵时间为37.27 h,胰蛋白胨5 g/L,MgSO₄ 0.5 g/L,起始pH值6.5,转速200 r/min,温度55℃,在此条件下产酶量达到了62.71 U/mL,较初始产酶量提高了3.25倍.     

蕲蛇蛇毒中凝血酶样酶的分离纯化与特性

蕲蛇粗毒经DEAE -SephadexA - 5 0、POROS 5 0HS及TSKG30 0 0SW分离纯化 ,得到 1个具有凝血酶活力的峰 .该峰经SDS -PAGE和PAGE检测均为一条带 ,分子量约 2 8.0kDa ,加DTT处理后 ,拆分为约 14.8kDa的亚基 .其凝血酶活力为 14.7NIHu/mg ,精氨酸酯酶活力为 2 1.98TAMEμmol/mg·min .该组分具有激活因子ⅩⅢ的活性 ,但没有明显的出血反应 .肝素不影响该组分的凝血酶和精氨酸酯酶活性 ,EDTA、PMSF、DFP则会产生不可逆抑制作用 ,表明该组分属于金属蛋白 .     

海洋细菌11211的生长条件及其几丁质酶研究

从南海海水中分离到产几丁质酶的弧菌（Ｖｉｂｒｉｏ ｓｐ．）,研究了菌株１１２１１的生长条件和产酶条件。１１２１１菌生长需要Ｎａ＾＋,海水的其他成分对菌生长也有影响。胶体几丁质可诱导几丁质酶产生。在几丁质培养基中１１２１１菌的产酶高峰为生长的第７天。经硫酸铵沉淀,Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００、ＤＥＡＥ－纤维素及几丁质柱层析,酶被纯化了１８倍。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析,酶的相对分子质量约为３００００。该     

一株α-淀粉酶生产菌的分离鉴定及其产酶条件优化

平板水解圈法从土壤中分离产淀粉酶菌株。通过碘比色法测定产淀粉酶分离菌株的酶活,筛选出一株产酶量较高的菌株,鉴定其种类,并对其产酶条件优化及酶学性质进行研究。通过革兰氏染色、生化鉴定和16SrDNA序列比对鉴定该菌的种类;从pH、温度、碳源、氮源等方面进行产酶条件优化。菌种经16S rDNA PCR序列分析比对,为枯草芽孢杆菌,因此将分离到的菌株命名为Bacillus subtislis-Y9;菌株最佳培养基配方为：淀粉6g,酵母膏13g,氯化钠5g,添加1.0%的吐温于1000mL蒸馏水中;最佳培养条件为：初始pH值为7.5;培养温度为37℃,培养时间36h。在上述培养基和优化培养条件下菌株发酵液的α-淀粉酶酶活达到7.1U/mL,约为出发菌种的5.5倍。酶学研究显示,α-淀粉酶的最适反应温度为40～60℃,反应体系pH值为6.6,并需添加0.5%CaCl2。     

Adenohypophyseal degradation of thyrotropin releasing hormone regulated by thyroid hormones

Thyrotropin Releasing Hormone (TRH; pyroGlu-His-Pro-NH2) is important in the regulation of adenohypophyseal hormone secretion and also serves neurotropic functions in extra-hypothalamic brain areas, indicating that it is involved in neurotransmission and other forms of cellular communication. This hypothesis is strengthened by the observation that TRH is hydrolysed at the pyroGlu-His bond by a particulate enzyme located in the synaptosomal and adenohypophyseal plasma membrane. Furthermore, this enzyme has been identified as a heterogeneously distributed ectoenzyme which has a high degree of substrate specificity like the TRH-degrading serum enzyme studied previously. In the rat, the activity of the TRH-degrading serum enzyme has been shown to be influenced by the thyroid status of the animals; here I report that the activity of the membrane-bound TRH-degrading enzyme of the anterior pituitary is stringently controlled by thyroid hormones, but that the activity of the brain enzyme is not.     

水稻对白叶枯病菌抗性与活性氧关系的研究

以 3种水稻白叶枯病菌和 4个抗、感水稻品种为样品 ,研究了水稻对白叶枯病菌抗性与白叶枯病菌细胞保护酶以及氧自由基的关系。研究结果表明 :接种 15d的水稻SOD、POD显示活性 ,而CAT无活性 ;用水稻叶片酶解液培养 3种病原菌 ,菌体显示SOD和CAT活性 ,但未测出POD活性。抗、感水稻对白叶枯病菌的影响不同 ,感病水稻使病原菌SOD和CAT活性升高 ,抗病水稻使白叶枯病菌SOD、CAT活性降低。而抗、感水稻对白叶枯病菌氧自由基的影响 ,正好与对酶的影响相反。     

低温脂肪酶产生菌筛选与鉴定、产酶条件及酶学性质研究

 昆明东站一家屠宰厂冷库中筛选到14株产脂肪酶低温菌株.选取1株胞外低温脂肪酶高产菌,进行显微形态及生理生化特征、16S rRNA基因序列分析,将其初步鉴定为Yersinia enterocolitica的一株菌,命名为KM1.对该菌发酵产酶条件研究,发现其最佳产酶发酵条件为:培养温度13℃,pH7.2,摇瓶培养时间54h.在最佳产酶发酵条件下酶活由1.8U/mL提高到3.1U/mL,提高了72%.对该菌脂肪酶的酶学性质研究表明:在0℃时仍具有最高酶活的20%,最适反应温度37℃,最适反应pH为9.0.在25℃以下,pH7.2～10范围内均能保持良好的稳定性.该酶在有机溶剂中较稳定,即使在50%的甲醇中仍能保持60%以上的活性,该酶的最适底物为C₈的酯化物,且对C₄～C₁₂的酯化物均有较好的催化能力.     

Apolipoprotein L-I is the trypanosome lytic factor of human serum

Human sleeping sickness in east Africa is caused by the parasite Trypanosoma brucei rhodesiense. The basis of this pathology is the resistance of these parasites to lysis by normal human serum (NHS). Resistance to NHS is conferred by a gene that encodes a truncated form of the variant surface glycoprotein termed serum resistance associated protein (SRA). We show that SRA is a lysosomal protein, and that the amino-terminal alpha-helix of SRA is responsible for resistance to NHS. This domain interacts strongly with a carboxy-terminal alpha-helix of the human-specific serum protein apolipoprotein L-I (apoL-I). Depleting NHS of apoL-I, by incubation with SRA or anti-apoL-I, led to the complete loss of trypanolytic activity. Addition of native or recombinant apoL-I either to apoL-I-depleted NHS or to fetal calf serum induced lysis of NHS-sensitive, but not NHS-resistant, trypanosomes. Confocal microscopy demonstrated that apoL-I is taken up through the endocytic pathway into the lysosome. We propose that apoL-I is the trypanosome lytic factor of NHS, and that SRA confers resistance to lysis by interaction with apoL-I in the lysosome.     

酶辅助超声波法提取连翘叶总黄酮工艺

采用酶辅助超声波法提取连翘叶总黄酮,在超声波条件固定的情况下,研究了酶解时间、酶解液pH值、酶解温度和酶用量对连翘叶总黄酮的影响。获得的优化条件为:酶解时间1.5 h,酶解温度40℃,酶量3 mg/g,最适pH值为5.0。在此条件下测定的连翘叶总黄酮含量为(26.53±0.68)%。试验结果表明:酶辅助超声波法提取连翘叶总黄酮是一种行之有效的方法。