测定蛋白质与胆酸盐结合量的方法

介绍一种应用高效液相色谱仪连接示差折射率检测仪测定牛血清白蛋白与脱氧胆酸钠的结合量的简便方法．该法通过凝胶过滤实现脱氧胆酸与蛋白质的结合平衡和脱氧胆酸的分离，根据示差折射率检测仪的读数定量脱氧胆酸钠．应用该法精确测定脱氧胆酸钠与牛血清蛋白结合等温线与已报道的采用其他方法测定的结合等温线相似     

蕲蛇蛇毒中凝血酶样酶的分离纯化与特性

蕲蛇粗毒经DEAE -SephadexA - 5 0、POROS 5 0HS及TSKG30 0 0SW分离纯化 ,得到 1个具有凝血酶活力的峰 .该峰经SDS -PAGE和PAGE检测均为一条带 ,分子量约 2 8.0kDa ,加DTT处理后 ,拆分为约 14.8kDa的亚基 .其凝血酶活力为 14.7NIHu/mg ,精氨酸酯酶活力为 2 1.98TAMEμmol/mg·min .该组分具有激活因子ⅩⅢ的活性 ,但没有明显的出血反应 .肝素不影响该组分的凝血酶和精氨酸酯酶活性 ,EDTA、PMSF、DFP则会产生不可逆抑制作用 ,表明该组分属于金属蛋白 .     

抗生素的毛细管电泳分离

通过对电极缓冲体系、pH值、乙腈添加浓度、N -甲基吗啡啉添加浓度及温度、电压的优化选择 ,用毛细管电泳方法分离土霉素、金霉素、多西环素、四环素、氯霉素 5种抗生素 .应用胺类修饰剂N -甲基吗啡啉作为添加剂 ,提高了抗生素的分离效果 .实验结果表明 ,此方法操作简单快速、成本低、定量准确 (R <0 .9917)、灵敏度高 ,检测极限分别为 0 .0 118,0 .0 2 36 ,0 .0 118,0 .0 118,0 .0 0 0 4ng .     

应用比浊法测定凝血酶样酶活性

传统常用目测法观察血浆凝固时间来测定凝血酶样酶的活性,因无法微观地检测凝固过程的起始而导致灵敏度低．应用比浊法检测凝血酶样酶活性,以东菱克栓酶为标准凝血酶样酶,在血浆凝固过程中,浊度随时间基本呈直线变化直至浊度变化最终趋于恒定,表明此时血浆已完全凝固．酶活与浊度一时间变化曲线的直线斜率之间存在严格的线性关系．线性范围为０．０５～０．６５ｕ／ｍＬ．结果表明,比浊法是一种改进的凝血酶样酶测活方法．     

一步洗脱离子交换色谱法分离纯化蛋黄中IgY

报道了一步洗脱离子交换色谱法分离纯化蛋黄水溶性组分 (WSF)中IgY的新方法 .通过将含IgY的WSF用pH7.0磷酸盐缓冲液 (PBS)调整至盐浓度为 0 .0 75mol L ,上样到DEAEToyoprarl6 50M阴离子交换色谱柱 ,用 0 .15mol LpH7.0PBS洗脱、收集 ,再经SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳检验为单一组分 .分离方法简单、分离纯化效果好 ,总蛋白回收率达 93%以上     

蛇毒蛋白质毛细管高效液相色谱分离

利用高分离效能、高灵敏度的毛细管高效液相色谱法, 实现皮摩尔级微量蛇毒蛋白质的组分分离同时利用自行充填的毛细管高效液相色谱柱替代昂贵的原装柱, 既能较好分离复杂的蛇毒蛋白质, 又可满足不同的分离纯化要求     

一种改进的小分子多肽SDS-PAGE方法

提出了一种改进的SDS -PAGE方法 .采用 0 .46mol/LTris - 0 .0 47mol/Lglycine (pH 9.5 7) + 1.0g/LSDS连续缓冲体系 ,分离胶T =15 % (C =3 % )和浓缩胶T =4% (C=3% ) 时在 3.5～ 6 8.0kD分子量范围内具有良好的线性关系 ,相关系数r =0 .94.该法操作简便分离效果好 ,使用常用的电泳试剂 ,适合于蛋白质酶解产物和一些疾病等的小分子多肽分析