人肿瘤坏死因子受体Ⅰ（hTNFR Ⅰ）基因死亡域在大肠杆菌中？…

将人肿瘤坏死因子受体Ⅰ（ｈＴＮＦＲＩ）死亡域基因克隆在氯霉素乙酰转移酶的后面，构建成重组表达质粒ｐＬＴ１０ＣＡＴＬＤｄ。该融合蛋白基因转化大肠杆菌后发酵。ＩＰＴＧ诱导２ｈ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定ＣＡＴＬＤｄ蛋白质的分子质量为３９ｋｕ，Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹实验进一步作了鉴定。     

钙对杂交水稻离体叶片衰老的影响

以叶绿素和蛋白质的质量分数下降作为衰老的生理指标,研究了Ｃａ２＋和Ｃａ２＋的螯合剂ＥＤＴＡ对杂交水稻离体叶片衰老的作用．结果表明,Ｃａ２＋能延缓杂交水稻离体叶片中叶绿素和蛋白质的质量分数的下降,提高超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）、抗坏血酸过氧化物酶（ＡｓＡ－ＰＯＤ）和谷胱甘肽还原酶（ＧＲ）的酶活性;增加抗坏血酸（ＡｓＡ）和谷胱甘肽（ＧＳＨ）的的质量分数;降低膜脂过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）的质量摩尔浓度．１～２０ｍｍｏｌ／ＬＥＤＴＡ降低叶片中叶绿素和可溶性蛋白质的质量分数;降低ＡｓＡ－ＰＯＤ和ＣＡＴ的酶活性;降低ＡｓＡ、ＧＳＨ的质量分数;提高ＳＯＤ酶活性,但对ＧＲ酶活性的影响不大．外加Ｃａ２＋可使ＥＤＴＡ的抑制作用减轻．     

大肠杆菌二硫键异构酶DsbA和脯氨酸异构酶PPIaseA双顺反子表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达

用ＰＣＲ方法获得大肠杆菌二硫键异构酶ＤｓｂＡ的编码基因ｄｓｂＡ和大肠杆菌脯氨酸异构酶ＰＰＩａｓｅＡ的编码基因ｒｏｔ,并将ＤｓｂＡ和ｒｏｔ以双顺反子形式克隆至含有Ｐｔａｃ启动子的表达载体ｐＫＫ２３３－２中。在ＩＰＴＧ的诱导下,ＤｓｂＡ和ＰＰＩａｓｅＡ获得了表达。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和薄层扫描分析表明：ＤｓｂＡ、ＰＰＩａｓｅＡ的表达水平分别为占菌体裂解上清液总蛋白质的４．３２％和４．０６％。     

GHRP—scu—PA—32K突变体的构建,表达及纯化产物的部分性 …

在ｓｃｕ－ＰＡ３２Ｋ的ｃＤＮＡ分子基础上经定点突变,在Ｎ端紧接Ｌｅｕ＾１以前引入编码ＧＨＲＰ四肽的寡核苷酸序列（ＧＧＴＣＡＴＡＧＧＣＣＴ）,构建了ＧＨＲＰ－ｓｃｕ－ＰＡ－３２Ｋ的突变体ｃＤＮＡ。将它克隆到表达载体ｐＣＭ－β－ｄｈｆｒ共转染ＣＨＯ／ＤＨＦＲ＾－细胞。筛选到的稳定表达株在无 清培养基的表达量为５８０ＩＲ／（１０＾６细胞．２４ｈ）。经锌离子螯合亲和柱纯化的产物,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示为一蛋     

乙炔二锂（C2Li2）异构体反应的分子轨道研究

基于量子化学从头计算法（ＣＣＳＤ（Ｔ）、ＱＣＩＳＤ（Ｔ））以及二阶微扰法（ＭＰ２），研究了乙炔二锂分子的平面桥式与线性式之间的异构化途径．６－３１１Ｇ（ｄ）基态被用于几何优化和反应途径的确定，而６－３１Ｇ（３ｄｆ）基态被用于单点式计算．其有关结构优先及成键特征的结果与用Ｍφｌｅｒ－Ｐｌｅｓｓｅｔ微扰方法所得一致．在ＭＰ２／６－３１１Ｇ（ｄ）理论水平上给出了质－权坐标的最小能量途径．在本研究的最高理论水平［ＱＣＩＳＤ（Ｔ，ＦＵＬＬ）／６－３１Ｇ（３ｄｆ）∥ＱＣＩＳＤ（Ｔ，ＦＵＬＬ）／６－３１１Ｇ（ｄ）］上，发现平面型分子的异构化势垒（１０．０ｋｃａｌ／ｍｏｌ）要比线型Ｃ２Ｌｉ２（１．３ｋｃａｌ／ｍｏｌ）的大得多     

小麦——冰草异源衍生系淀粉理化特性的研究

利用ＲＶＡ－３Ｄ（Ｎｅｗｐｏｒｔ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｅｙ．Ｌｔｄ．Ｎａｒｒａｂｅｅｎ,Ａｕｓｔｒａｌｉａ）、ＴＡ－ＸＴ２（Ｓｔａｂｌｅ Ｍｉｃｒｏ Ｓｙｓｔｅｍｓ,Ｇｏｄａｌｍｉｎｇ,Ｓｕｒｒｅｙ,Ｅｎｇｌａｎｄ）、ＤＳＣ２０（Ｍｅｔｔｌｅｒ Ｎａｅｎｉｋｏｎ－Ｕａｅｎｉｋｏｎ－ｕｓｔｅｒ,Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）等分析仪,对已被ＧＩＳＨ检测过的３５份小麦－冰草属间杂种衍生系及其亲本Ｆｕｋｕ     

人胰岛素样生长因子—Ⅰ的基因克隆,融合表达及产物纯化

利用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）方法,以ＩＧＦ－ＩｃＤＮＡ为模板,扩增ＩＧＦ－Ｉ的基因。在序列测定确证后,将其定向克隆到载体ｐＥｘＳｅｃＩ上,构建了ＩＧＦ－Ｉ融合表达载体ｐＥｘＩＧＦ,经ＩＰＴＧ诱导表达后,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明：含有重组表达质粒的菌株可表达出约３２．５８％的２６ＫＤ融合蛋白,且主要以可溶性形式存在。经ＩｇＧ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ亲和层析一步纯化后,可获得纯度约９０％的融合蛋白,经Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ分析,免疫学活性呈阳性反应。     

光合细菌Chromatium vinosum可溶性氢酶小亚基基因的克隆

光合细菌Ｃ．ｖｉｎｏｓｕｍ可溶性氢酶由５２ｋＤａ和２１．５ｋＤａ两个亚基组成。该酶大亚基Ｎ－末端氨基酸序列为：ＳＲＴＩＴＩＥＰＶＴＲＸＥＧＨＡＲ,小亚基Ｎ末端氨基酸序列为：ＳＴＱＰＫＩＴＶＡＴＸＬＤＧ。根据大、小亚基Ｎ－末端氨基酸序列设计两套引物,Ｐｒｉｍｅｒ１：５’ｇＡＴ（ｇＴｇＡＴ（ｇ／Ｃ）ｇＴｇＡＴ（ｇ／Ｃ）ｇＴ（ｇ／Ａ）Ｃｇ３’和Ｐｒｉｍｅｒ２：５’ＡｇＣ ＡＣ（Ｃ／ｇ）ＣＡｇＣＣ（Ｃ／ｇ     

人Cu,Zn-SOD在酵母系统中的表达

甲醇酵母（Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ）是一种理想的真核蛋白高水平表达系统。将人Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ基因克隆到酵母整合型质粒载体ｐＰＩＣ３．５Ｋ，经转化ｈｉｓ４缺陷型酵母ＧＳ１１５，用ＭＤ培养基及ＰＣＲ方法筛选阳性转化子，并用含Ｇ４１８的ＹＰＤ培养基筛选多拷贝转化子，经甲醇诱导表达，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和蛋白质印迹杂交结果证实了表达产物为重组的人Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ，经计算机扫描分析，表达量占酵母可溶性     

T7启动子促发下的人尿激酶原在大肠杆菌中的高效表达

将人工全化学合成的尿激酶原（ｐｒｏ－ｕｒｏｋｉｎａｓｅ）ｃＤＮＡ克隆到表达载体ｐＥＴ３ｄ中，转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）ＬｙｓＳ，经ＩＰＴＧ诱导，获得了占菌体总蛋白１８％的高表达。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ鉴定，表达产物主要为单链尿激酶，并且在菌体内基本以无活性的包涵体形式存在。经体外变复性，从ＩＬ培养基中可获得３０００００单位的活性尿激酶原。     

THE RISE AND DECLINE OF THE UNITED STATES SHIPPING AND SHIPBUILDING INDUSTRIES

ＴＨＥＲＩＳＥＡＮＤＤＥＣＬＩＮＥＯＦＴＨＥＵＮＩＴＥＤＳＴＡＴＥＳＳＨＩＰＰＩＮＧＡＮＤＳＨＩＰＢＵＩＬＤＩＮＧＩＮＤＵＳＴＲＩＥＳ￥（ＣａｐｔａｉｎＪａｍｅｓＳ．Ｃ．Ｃｈａｏ，ＤＣＳ，ＬＬ．Ｄ．ＪｏｈｎＪ．Ｃｌａｒｋ，Ｐｈ．Ｄ．）Ａｂｓｔｒａｃｔ...     

基因工程菌E.Coli2426／pMN表达产物的纯化

用基因工程菌Ｅ．Ｃｏｌｉ２４２６／ｐＭＮ高效表达了麦芽糖结合蛋白—人神经生长因子（β）融合蛋白，菌体经超声波破碎后，上清液经Ａｍｙｌｏｓｅ亲和柱一步即可获得ＳＤＳ－ＰＡＧＥ纯蛋白质，回收率为１０％左右，按标准分子量计，该融合蛋白（５５ＫＤａ）确是麦芽糖结合蛋白（４２ＫＤａ）与人神经生长因子（β）（１３ＫＤ）的络合物     

人肿瘤坏死因子穿梭表达载体的构建

应用ＤＮＡ重组技术,将人肿瘤坏死因子（ｒｈＴＮＦ）ｃＤＮＡ插到质粒ＰＲＬ４３９的ＰｐｓｂＡ启动子下游,得到中间载体ＰＲＬ＿ＴＮＦ;再把ＰＲＬ＿ＴＮＦ上含ＰｐｓｂＡ和（ｒｈＴＮＦ）ｃＤＮＡ的片段连到穿梭载体ＰＤＣ＿８上,构建成穿梭表达载体ＰＤＣ＿ＴＮＦ．转化大肠杆菌ＴＧ１后,进行发酵培养．ＳＤＳ＿ＰＡＧＥ分析和免疫印迹检测结果显示ｒｈＴＮＦ获稳定表达,分子量为１７ｋｕ．本研究结果为ｒｈＴＮＦ在蓝藻中的表达提供了技术基础．     

基因重组牛碱性成纤维细胞生长因子的纯化和鉴定

牛碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＲ）ｃＤＮＡ在Ｅ．ｃｏｌｉ中表达，高压均质破碎菌体后，上清液以Ｈｅｐａｒｉｎ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ亲和层析、Ｃ１８反相ＨＰＬＣ分高纯化得到一分子量为２．２５×１０￣４的蛋白质，其等电点为９．３４，并能与抗牛ｂＦＧＦＭｃＡｂ反应；其氨基酸组成与ｂＦＧＦ文献值一致；活性分析结果表明此蛋白质不仅能促进ＢＡＬＢ／ｃ３Ｔ３细胞增值，ＥＤ＿（５０）＝０．８５ｎｇ／ｍｌ，而且能促进鸡胚尿囊膜微血管增生，所得蛋白为具有生物活性的重组碱性成纤维细胞生长因子。     

水合二氟化钴脱水反应动力学的研究

利用非等温热分析方法研究了水合二氟化钴脱水反应动力学。实验数据经Ｆｒｅｅｍａｎ－Ｃａｒｒｏｌｌ法及Ｃｏａｔｓ－０Ｒｅｄｆｅｒｎ法处理,获得脱水反应动力学方程为ｄａ／ｄｔ＝Ａ．ｅｘｐ（－Ｅ／ＲＴ）．（１－α）,反应级数ｎ＝１．０,活化能Ｅ＝１０６．４ＫＪ／ｍｏｌ,频率因子Ａ＝２．９９８＊１０＾１１Ｓ＾－１,ＥＴ ＨＡＤＮＩＳＩＦ ＣＦ ＲＣ ＹＩＤ ＳＭ ＧＪ ＦＪＴＦＢ     

磁共振成像诊断听神经瘤的价值

目的：为评价磁共振成像（ＭＲＩ）诊断听神经瘤的价值，本文分析４４例听神经瘤ＭＲＩ表现，探讨该瘤囊性的病理基础及鉴别诊断。方法：采用德国Ｓｉｅｍｅｎｓ１．０Ｔ超导ＭＲ系统，常规ＳＥ序列或快速ＳＥ序列Ｔ１中权，Ｔ２加权成像，层厚３－７ｍｍ，其中３６例静脉内注射Ｇｄ－ＤＴＰＡ增强扫描。结果：本组４６个肿瘤中，有２个（４．３％）地内耳道ＩＡＣ内；６个（１３％）仅限于桥小脑角（ＣＰＡ）；３８个（８２．６％）     

苯乙烯—甲基丙烯酸共聚物的合成,结构与性能研究

采用悬浮聚合法合成了苯乙烯－甲基丙烯酸共聚物（ＳＭＡＡ），得率为９２％左右。由Ｋｅｌｅｎ－Ｔｕｄｏｓ法求得苯乙烯（Ｓｔ）与甲基丙烯酸（ＭＡＡ）在８０℃进行共聚反应的竞聚率为Ｔｓｔ＝０．３０５，ＴＭＡＡ＝０．６００。通过正交试验，确定了最佳配方。经ＦＴ－ＩＲ、ＤＳＣ、元素分析、化学滴定、ＧＰＣ等表征，证实了所合成的产物为透明的苯乙烯－甲基丙烯酸无规共聚物。研究表明，ＳＭＡＡ的耐热性比ＰＳ好得多，其玻     

人组织型纤溶酶原激活剂（t—PA）在大肠杆菌中的表达,…

人组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）ｃＤＮＡ重组在表达质粒ｐＤＲ７２０中。在Ｅ．ｃｏｌｉＣ６００中获得了表达，表达水平为２％。以醋酸锌显色ＰＡＧＥ凝胶回收ｔ－ＰＡ表达条带，进行复性处理。复性产物经Ｂｅｎｚａｍｉｄｉｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ，Ｌｙｓｉｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析，纯化得到ＳＤＳ－ＰＡＧＥ银染一条带纯度，比活为４，０００ｍｏｌ／ｓ·ｇ的人ｔ－ＰＡ。     

检测丽蚜小蜂取食寄主银叶粉虱的多重聚合酶链式反应

结合Ｄ２引物和ＢＥＦ引物,优化了一个可以用来检测丽蚜小峰（Ｅｎｃａｒｓｉａ ｆｏｒｍｏｓａ Ｇａｈａｎ）取食寄主银叶粉虱（Ｂｅｍｉｓｉａ ａｒｇｅｎｔｉｆｏｌｉｉ Ｂｅｌｌｏｗｓ＆Ｐｅｒｒｉｎｇ）的重多聚合酶链式反应。特异于银叶粉虱的ＢＥＦ引物（正向５′－ＡＡＴ ＴＣＡ ＣＡＣ ＡＴＡ ＣＧＴ ＴＡＧ ＣＣＣ ＣＴ－３′和反向５′－ＴＡＡ ＣＣＧ ＡＡＣ ＣＡＴ ＣＡＡ ＣＡＧ ＡＴＴ ＡＴＴ－３     

研究聚ADP核糖基化作用与细胞恶变关系的双基因真核表达重…

本文将聚ＡＤＰ核糖聚合酶基因１．４ｋｂ部分序列反向插入真核表达载体ｐＭＡＭｎｅｏ和ｐＳＭＧ中，同时１２位密码子突变的活化ｒａｓ癌基因也一同克隆到上述载体中，从而获得具有不同真核基因筛选标记的双基因真核表达重组ｐＭＡＭｎｅｏ－Ｃｌ．４－Ｔ２４，ｐＭＡＭｎｅｏ－Ｃｌ．４－ａｒＴ２４，及ｐＳＭＧ－Ｃｌ．４－Ｔ２４，上述质粒的构建成功为研究聚ＡＤＰ核糖基化作用与细胞恶变的关系提供了一种新的分子模型。