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用杂交瘤技术建立抗KDRFc的杂交瘤细胞系,以KDRFc抗原免疫雌性BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经ELISA间接法检测和有限稀释法克隆培养,再经稳定性检测、效价检测,筛选出分泌抗KDRFc单克隆抗体的杂交瘤细胞.得到了10株能持续分泌抗KDRFc的单克隆抗体的细胞株,其中3株分泌的单抗具有较高的生物活性、特异性和稳定性. 相似文献
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摸索和探讨了HPES-1型高级基因转移仪在BALB/C小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0电融合中的应用,获得了一组选择参数,采用短脉冲输出方式,脉冲幅度6kV,脉冲宽度50μs,脉冲数2~9,循环数50×2及脉冲休止时间2s的电融合参数,纳合高细胞密度(10~5cell/200μl)增加细胞间聚集的方法,可较容易地获得杂交瘤,并应用该技术成功地制备了分泌人血清白蛋白单克隆抗体的杂交瘤。 相似文献
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本文介绍了以亲和层析纯化的免抗鼠IgG类抗体及其酶标物作为捕获及检测抗体进行鼠杂交瘤培养上清及腹水中IgG类单克隆抗体的ELISA定量测定方法。结果表明:小牛血清(BS)、免血清(RS)、马血滑(HS)、人血清(HuS)及非抗体产生细胞的培养上清对本项εLISA实验无干扰,使测定的结果较可靠,测定的鼠IgG各亚类的标准曲线的线性范围均在5~100ng/ml之间,因此这个快速、可靠的方法可为鼠IgG类单克隆抗体的定量测定提供一种实用的手段。 相似文献
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从影响融合率的2个主要因素探讨骨髓瘤细胞系Sp2/0细胞与黄曲霉毒素B_1免疫的脾细胞融合的最佳条件,使融合率达到100%.经筛选和克隆化,获得3株稳定分泌单克隆抗体的细胞株,分别命名为3B3、3H9、5G9.经过鉴定3株均为IgG_1亚类.其中3B3抗体与其他黄曲霉毒素几乎不发生交叉反应,腹水效价为1∶2×10~5,亲和力常数为3.1×10~7 L/mol,竞争性ELISA测出3B3抗体的最低反应浓度为0.05μg/L标准AFB_1样品的的回收率达96%.另外两株腹水抗体水平低,交叉反应强烈,腹水效价仅在1∶10~4数量级. 相似文献
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抗人癌胚抗原单克隆抗体的研制及其在免疫组化中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
以高纯CEA为抗原,免疫BALB/c小鼠.取其脾细胞和小鼠SP2/0-Ag14骨髓瘤细胞融合.经2次亚克隆。建立3株稳定分泌抗CEA特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。应用经纯化的该单克隆抗体进行了结肠癌组织切片的免疫组织化学实验.结果显示全部3种抗CEA单克隆抗体对结肠癌亚细胞组分均呈现特异性结合。表明已筛选出适于制作癌胚抗原临床诊断试剂盒所需的特异性单克隆抗体。 相似文献
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采用生物信息学方法分析几种病原性弧菌OmpK、OmpU和OmpW蛋白种间和种内的同源性,筛选高保守性蛋白OmpW.成功构建具备稳定分泌抗体IgG3的细胞株S5C10,鉴定其对5种弧菌具有特异性交叉免疫反应,而对9种非弧菌无免疫反应.研究结果显示OmpW可作为广谱性疫苗成分,其单抗可特异性检测多元弧菌. 相似文献
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抗CD25单克隆抗体对大鼠角膜移植排斥反应的抑制作用 总被引:1,自引:0,他引:1
为了观察抗CD25单克隆抗体(ART-18)对角膜移植排斥反应的抑制作用,应用SD大鼠对Lewis大鼠进行穿透性角膜移植、术后用抗CD25McAb治疗。结果显示:对照组大鼠角膜排斥反应发生率为100%;ART-18治疗组角膜排斥反应发生率为53.3%;ART-18联合环孢霉素A治疗组角膜排斥反应发生率为26.7%。结果表明:抗CD25McAb联合环孢霉素A治疗效果更好。 相似文献
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以获得的抗HMG_(14)McAb为探针,运用间接荧光免疫技术,对果蝇(D,Vivilis南京)唾腺染色体上HMG_(14)的分布及其HMG_(14)与活性区“puff”的关系进行了初步观察。发现;(1)HMC_(14)分布在唾腺染色体所有的横纹带上;(2)在“puff”区,HMG_(14)有增加的趋势;(3)DNaseI处理可以使染色体上的HMG_(14)丢失。实验结果进一步验证了HMG_(14)是染色体上的一种结构性蛋白。 相似文献
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