高温菌及用于废物处理的研究

论述了高温菌的特点 ,讨论了高温菌在废物处理过程中的应用 ,指出了高温菌用于废物处理系统的优点及不足     

FD-TRT耐热逆转录酶的特性分析

从嗜热细菌ＦＤ３００９中克隆并分离纯化得到的耐热逆转录酶（ＦＤ－ＴＲＴ）,逆转录反应在６５℃高温下进行,可克服常温逆转录酶的许多缺点,以酵母核糖体ｒＲＮＡ为模板,以与２５５和１８Ｓ ｒＲＮＡ匹配的寡聚脱氧核苷酸为引物,探明了ＦＤ－ＴＲＴ的最适反应条件： ２５ｍｍｏｌ／Ｌ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ ８．５,２５℃）,２５ ｍｍｏｌ／Ｌ（ＮＨ４）２ＳＯ４,２ ｍｍｏｌ／Ｌ ＭｎＣｌ２,１００ μｇ／ｍｌ明胶．５ ｕｎｉｔ ＲＮａｓｉｎ,２５０ ｍｍｏｌ／Ｌ ４种 ｄＮＴＰ, １μＣｉ３ Ｈ－ｄＣＴＰ, １２ｕｇ ＲＮＡ,２５ ｐｍｏｌ引物,并在此条件下测得 ＦＤ－ＴＲＴ和 Ｔａｑ ＤＮＡ 聚合酶逆转录活力与聚合酶活力的相对比值分别为０．０５６,０．００４５．     

耐热碱性磷酸酯酶基因的亚克隆及其在大肠杆菌中的表达

根据耐热碱磷酸酯酶基因的酶切图谱和ＤＮＡ序列,分别在基因的起始密友子和终止密码子设计２个突变引物。引物的５‘端分别带有ＮｄｅⅠ和ＢａｍＨⅠ酶切全点。通过ＰＣＲ从质粒ｐＴＡＰ１１８Ｂ中扩增获得了ＦＤ－ＴＡＰ基因的全序列。经过酶切将基因亚克隆于高达载体ｐＪＬＡ５０３。     

海藻糖对银杏叶过氧化物酶活性的影响

对银杏叶过氧化物酶热稳定性、最适pH值及海藻糖对酶热稳定性的保护作用和pH值的影响进行了初步研究.结果表明,用40℃和50℃分别处理30 min,过氧化物酶活性分别剩余78%和39%,在60,70,80℃下活性可分别维持27,18和3 min.银杏叶过氧化物酶最适pH值为6.4和9.2.加入海藻糖后酶活性略有降低(活性丧失约8%),但加热后海藻糖的保护优势得以显现,海藻糖浓度为0.14 mol/L时保护效果最好,而且不同温度处理下酶活的下降趋势均较对照组缓慢,尤其在50,60,70℃条件下,相比对照组高出12%~27%的活性,加热时间长短对海藻糖的保护效果无太大影响.经0.14 mol/L浓度的海藻糖处理后,酶活的最适pH值为6.6和9.4.     

种间原生质作融合构建耐热性α—淀粉酶高产菌株的研究

以枯草芽胞杆菌BF7658和高温芽胞杆菌SW2—3为亲株,通过原生质体融合,获得一株稳定的融合子BSF_1.该融合子生长温度为中温型,与BF7658相同;而融合子酶的热稳定性与SW2—3相似,摇瓶酶活性为160μ/mL.     

用加速热稳定试验筛选甲型肝炎减毒活疫苗热稳定保护剂

为筛选具有良好热稳定保护效果的甲肝减毒活疫苗（H2株）保护剂,利用正交设计和加速热稳定试验,将不同配比的保护剂和液体疫苗混合后,封入安瓿,分别置37度和45度,不同时间取样,检测其感染性滴度,结果表明无保护剂的对照疫苗在45度条件下感染性滴度仅能维持2D不变,第3天开始下降,至4天已下降1．27logCCID50.mL^-1,而有保护剂的5批疫苗在45度条件下感染性滴度能维持5天无显著变化,在37度条件下无保护剂的对照疫苗感染性滴度仅能维持7天无显著变化,10天显著变化,下降1．0－1．1logCCID50.mL^-1,而有保护剂的5批疫苗在37度条件下感染性滴度能维持10天无显著变化,研究表明0．1mol.L^-1MgSO4,ω=5％,乳糖,0．01mol.L^-1精氨酸,0．01mol.L^-1甘氨酸组成的保护剂具有最佳保护效果,其热稳定保护效果明显优于现在使用的对照疫苗。     

甲硒氨酸耐热邻苯二酚2,3双加氧酶的高表达和分离纯化

甲硒氨酸多波长反常散射法是国际上９０年代发展的蛋白质晶体结构测定的新方法,该法得以实施的首要一步是获得硒取代（硫）的高纯蛋白质。通过亚克隆将编码耐热邻苯二酚２,３双加氧酶（简称ＴＣＴＤ）的基因ＰＨＥＢ克隆至表达载体ｐＲＳＥＴ,得到了高表达质粒ｐＲＳＥＴ－ＰＨＥＢ,转入Ｍｅｔ缺陷的菌株Ｂ８３４ＤＥ３。通过诱导表达和分离纯化得到了甲硒氨酸参入的ＴＣＴＤ。经质谱测定发现ＴＣＴＤ的所有７个甲硫氨酸都被甲硒     

耐热碱性磷酸酯酶(TAPND27)的表达、纯化和性质测定

通过分离纯化和酶学性质测定,确定耐热碱性磷酸酯酶（ＴＡＰＮＤ２７）为八聚体,最适反应温度为６５℃,在９９℃保温３０ｍｉｎ仍保留４９．４％的活性,在质量分数为５％的Ｔｗｅｅｎ２０体系中依然有７０％以上的酶活性,并且有很宽的ｐＨ稳定范围。这表明ＴＡＰＮＤ２７适合在高温条件和高浓度去污剂的体系中应用。     

淀粉聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定耐热糖化酶组分

采用微波诱变筛选出一突变株,该突变株粗酶液的最适作用温度比出发株的高20℃;建立了一种Starch-PAGE检测粗酶液中具有糖化酶活性组分的方法,测定出突变株含有4个糖化酶组分;并建立了SDS-Starch-PAGE检测耐热糖化酶组分的方法,鉴定出突变株含有3个耐热糖化酶组分.     

耐热木聚糖酶助漂针叶木硫酸盐浆的研究

探讨了嗜热真菌耐热木聚糖酶助漂针叶木硫酸盐浆的应用前景.着重研究了应用耐热木聚糖酶进行生物助漂的酶用量、酶处理的pH值以及漂白用氯量等影响因素.结果表明,在不影响纸浆的各项性能的情况下,经酶处理的纸浆白度相比对照增加1.06%~5.11%ISO.同时,酶处理纸浆漂白时可减少漂白用氯量.另外,在偏碱性条件下进行酶处理对纸浆漂白效果的影响较为显著.纸浆纤维的扫描电镜结果显示,酶未对纤维造成损伤,而是改善了纸浆纤维的可漂性.该耐热木聚糖酶非常适宜应用于酶助漂.