青海茶卡盐湖嗜盐碱芽胞杆菌资源分析

采用3种不同的培养基,通过可培养法,从青海茶卡盐湖样品中共分离获得110株嗜盐碱芽胞杆菌.基于16S rRNA基因序列相似性鉴定及系统发育分析,得出这些菌株为芽胞杆菌10个属的41个种,它们与最近匹配模式菌株的16S rRNA基因序列相似性在96%~100%之间,以芽胞杆菌属为优势菌,共计25种83株;存在6个潜在新种.3种酶筛实验结果表明,87%的嗜盐碱芽胞杆菌菌株具有产酶能力,产蛋白酶70株,产纤维素酶81株,产木聚糖酶50株.青海茶卡盐湖中的芽胞杆菌种类丰富多样且能产多种酶,并且潜藏着新的微生物物种,研究结果可为嗜盐碱芽胞杆菌资源开发提供理论基础.     

病原芽胞杆菌几丁质酶产生菌的筛选与活性鉴定

通过特异引物PCR方法和水解圈活性法对62株苏云金芽胞杆菌菌株、26株蜡状芽胞杆菌菌株及18株球形芽胞杆菌菌株进行了几丁质酶产生菌的筛选.所测苏云金芽胞杆菌中除4株野生型菌株外均为阳性结果,蜡状芽胞杆菌仅1株为阴性结果,球形芽胞杆菌全为阴性结果,且水解圈法观察结果与PCR检测结果一致.在此基础上,通过DNS比色法对几丁质酶产生菌株的几丁质酶比活力也进行了测定.对这些具有致病性的病原芽胞杆菌几丁质酶的研究对于研究其致病机理及对其进行遗传改良具有重要的理论和实际应用价值.     

枯草杆菌原生质体诱变育种的研究

本文报道原生质体制备技术与诱变育种相结合的新的育种技术,以BF—7658为出发菌株,经原生质体诱变育种,选育出两比亲株产α_—淀粉酶高1.4倍的新菌株。     

氮离子注入选育耐酸性α-淀粉酶产生菌诱变效应的研究

利用低能(30keV)氮离子注入中温中性α-淀粉酶产生菌枯草芽孢杆菌BF7658,研究对其产耐酸性α-淀粉酶的诱变效应.结果表明,BF7658菌株存活率曲线是典型的"马鞍型"剂量-效应曲线,在"马鞍型"区域对应注入剂量50×1014～100×1014 ions/cm2下具有较高的突变率.通过诱变筛选到一株最适作用pH为5.0,较出发菌株的最适作用pH偏低一个单位的突变株,编号TUST743.该突变株产酸性α-淀粉酶的酶活为343U/mL.该酶在pH4.5和4.0条件下的相对酶活为61%和38%,说明此突变株所产酸性α-淀粉酶对低pH有较好的耐受性.经连续传代实验,表明该菌株遗传性质稳定.     

土法造纸木素降解之探索Ⅲ.嫩毛竹自然发酵过程中的细菌分离鉴定与嫩竹软化菌的筛选

试验证实,嫩毛竹自然发酵过程中的微生物主要是细菌。分离出并纯化了１００株细菌,其中６０株是芽胞杆菌。将分离出的１００株细菌分别接入石灰预处理过的嫩竹,从中筛选出能使嫩竹进一步软化的菌株３株,也均为芽胞杆菌。对这６０株芽胞杆菌进行了形态学及其生理生化特征的鉴定,按Ｐｒｉｅｓｔ氏等（１９８８年）的数值分类系统分类到组,将３株（３０８,３０９,３１０）对嫩竹软化有明显作用的芽胞杆菌的１株（３０８）鉴定到种,认为是短小芽胞杆菌（Ｂ．ｐｕｍｉｌｕｓ）。另外４０株非芽胞杆菌参阅《伯杰氏系统细菌学手册》第１卷和第２卷,鉴定到科或属,有微球菌、葡萄球菌、李氏杆菌、不动杆菌、肠杆菌科等。     

枯草杆菌原生质体再生前后细胞壁的变化及其对酶渗透性的影响

报道了枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis BF—7658原生质体的制备、再生及其传代后的细胞的电镜观察;酶产量的变化;初步证明经原生质体再生所得到的α——淀粉酶高产菌株,同其细胞壁再生过程及细胞壁的渗透性有着密切关系.     

微生物与嫩竹土法造纸

嫩竹土法造纸已有二千余年历史。其工艺是用石灰浸泡、联合微生物作用,以降解嫩竹中木素及部分半纤维素,达到制浆、造纸的目的。微生物以细菌为主,还有些原生动物与真菌。从分离出的１００株细菌中,６０株为芽胞杆菌,其余为肠杆菌科（埃希氏菌、枸椽酸杆菌）、不动杆菌、黄色杆菌、假单胞菌、醋酸杆菌、产碱杆菌、葡萄球菌、微球菌、李氏杆菌等。能使嫩竹软化的３株细菌均为芽胞杆菌,其中１株（３０８号）为短小芽胞杆菌。嫩竹经石灰处理后,以分得的３０８号短小芽胞杆菌处理４ｄ,可将嫩竹软化造纸,使土法的数月到１年的生产周期缩短为２４ｄ。判断木素降解的经验方法,是以手捏竹片。它是简易可行的有效方法。古代的工艺及其可改造处,曾予以讨论。     

高原地区耐冷菌的分离鉴定

经过10℃下7天驯化,活性污泥系统对生活污水的COD去除率达到90%以上,污泥驯化完成,此时污泥中的优势菌种为耐冷菌;通过反复分离得到32株在10℃下生长良好的优势菌株;再通过初筛阶段测定平均OD值,复筛阶段测定模拟生活污水COD去除率,筛选出低温情况下生长良好且COD去除效率高的五株菌株;通过菌落特征、形态特征和生理生化特性,鉴定得出高原地区的优势低温耐冷菌分别为:革兰氏阴性好氧杆菌—假单胞菌属、革兰氏阳性菌好氧杆菌—嗜冷杆菌属、革兰氏阳性芽胞杆菌和球菌—芽胞杆菌属、革兰氏阴性好氧杆菌—黄杆菌属、革兰氏阴性杆菌—产碱杆菌属。     

一株产酸蜡状芽胞杆菌的筛选及其抑菌特性研究

利用MRS培养基从多种蔬菜中,筛选产酸且具有较好抑菌活性的芽胞杆菌.经多次复筛,最终从96株初筛菌株中,获得一株抑菌谱广、抑菌活性高的菌株N5.通过对其形态学、生理生化特征及其16SrDNA D1/D2 区域的分析表明,N5为蜡状芽胞杆菌.抑菌特性结果表明,N5产生的抑菌物质存在于发酵液上清中,具有较好的热稳定性和耐酸性.     

牡丹江火山口原始森林苏云金芽孢杆菌的分离和cry基因鉴定

对牡丹江火山口原始森林苏云金芽孢杆菌的分布与基因多样性进行研究.采集91份土壤样品,利用温度筛选法从中分离出40株苏云金芽胞杆菌并对其进行光学显微观察,晶体形态为球形和菱形.PCR-RFLP鉴定结果表明:该地区的苏云金芽胞杆菌含有cry1,cry2,cry4,cry8,cry9,cry18,cry26,cry28,cry35基因,含cry8基因的菌株最丰富;苏云金芽孢杆菌在火山口原始森林的分布具有良好的多样性.     

枯草芽胞表面CotC和CotG共展示海藻糖合酶研究

为了实现海藻糖合酶(TreS)在胞外的应用及避免胞内表达的不便利,构建了芽胞表面展示TreS的重组枯草芽胞杆菌.以枯草芽胞杆菌芽胞表面锚定蛋白CotC、CotG作为TreS融合展示蛋白,通过荧光共聚焦显微镜、Western blot、Dotblot及酶活性分析表明,TreS成功展示于枯草芽胞杆菌的芽胞表面,且由CotC和CotG共展示TreS芽胞表面酶活力大于CotC、CotG单独展示TreS酶活力之和.通过在TB培养基中培养,共展示重组芽胞表面酶活力(以芽胞干质量计)达到1 511.6 U/g,表面展示分子数达到7.366×10~9.     

苏云金芽胞杆菌的研究进展

围绕国内外对苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)研究的新进展,分别从转苏云金芽胞杆菌作物的安全性、苏云金芽胞杆菌的酶学研究、苏云金芽胞杆菌的基因学研究、苏云金芽胞杆菌的蛋白质学研究四个方面进行论述,为进一步预防昆虫对苏云金芽胞杆菌植物产生抗性、防止苏云金芽胞杆菌基因飘逸、构建新型苏云金芽胞杆菌载体及生产出杀虫毒性更高、专一性更强的苏云金芽胞杆菌植物提供了新的思路.     

氮离子注入选育耐酸性α-淀粉酶产生茵诱变效应的研究

利用低能（30keV）氮离子注入中温中性α-淀粉酶产生菌枯草芽孢杆菌BF7658，研究对其产耐酸性α-淀粉酶的诱变效应结果表明，BF7658菌株存活率曲线是典型的“马鞍型”剂量-效应曲线，在“马鞍型”区域对应注入剂量50×10^14-100×10^14ions／cm^2下具有较高的突变率．通过诱变筛选到一株最适作用pH为5．0，较出发菌株的最适作用pH偏低一个单位的突变株，编号TUST743．该突变株产酸性α-淀粉酶的酶活为343U／mL．该酶在DH4．5和4．0条件下的相对酶活为61％和38％，说明此突变株所产酸性α-淀粉酶对低pH有较好的耐受性．经连续传代实验，表明该菌株遗传性质稳定、     

土法造纸木素降解之探索：Ⅲ.嫩毛竹自然发酵过程中的细菌分离鉴定与 …

试验证实，嫩毛竹自然发酵过程中的微生物主要是细菌。分离出并纯化了１００株细菌，其中６０株是芽胞杆菌。将分离出的１００株细菌分别接入石灰预处理过的嫩竹，从中筛选出能使嫩竹进一步软化的菌株３株，也均为芽胞杆菌。     

水解胶原蛋白对枯草芽胞杆菌生长的影响

本文测定了不同氮源(水解胶原蛋白CH、蛋白胨、明胶、硝酸钠、氯化铵)对枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)生长的影响;考察了CH和玉米浆的不同配比对枯草芽胞杆菌生长的影响;研究以CH为氮源时,不同碳源对枯草芽胞杆菌生长的影响;考查CH对其它细菌发酵的影响.研究发现,在CH为氮源条件下,枯草芽胞杆菌的发酵过程可顺利进行,且微生物的生物量可保持在较高水平;同玉米浆相比,CH能使枯草芽胞杆菌达到较高的生物量;以CH为氮源时,淀粉比葡萄糖、蔗糖更有利于枯草芽胞杆菌的生长;除了枯草芽胞杆菌以外,大肠杆菌(Escherichia coli ATCC 15489)和地衣芽胞杆菌(Bacillus licheniformis CICC 20031)也能有效利用CH.这表明,在实验条件下水解胶原蛋白(CH)可以作为多种微生物发酵的氮源.     

产α-ALDC的枯草芽孢杆菌原生质体融合条件

通过双亲灭活原生质体融合技术对2株产α-乙酰乳酸脱羧酶的枯草芽孢杆菌3226-5和V-20进行原生质体融合.初步探讨了2菌株较适宜的融()条件.对获得的几百株融合子进行酶活比较,从中得到20株酶活比双亲高的菌株.     

光合细菌种间原生质体融合及融合子鉴定

以浓度为3mg/l的溶菌酶溶液处理对数生长期的光合细菌球形红假单胞菌(丙酸钠~-)和沼泽红假单胞菌(甘露糖醇~-)50min,获得两菌体形成的原生质体,再生率分别为86％和62％。等量的两亲株原生质体在35％聚乙二醇(PEG,MW.6000)诱导下融合5min,融合率为2.1×10~(-4)。经影印法鉴定,生成的融合子可以分别在丙酸钠和甘露糖醇为唯一碳源的培养基上生长。融合子的体积为3.63um~3,约为两亲株的体积之和。融合子菌落形态特征界于两亲株之间,其降解底物中有机物COD_(cr)的能力,优于任一亲本菌株。获得的融合子杂种细胞,存在着高效降解利用机污染物的优势。     

牛奶中苏云金芽胞杆菌的分离与鉴定

采用醋酸钠．抗生素分离法对超市牛奶样品进行苏云金芽胞杆菌（Bacillus thurgngiensis,Bt）的分离,获得2株Bt菌株,分别命名为BtBRC—LJ1和BtBRC-LJ2。利用PCR方法对Bt BRC-LJ1和BtB RC-LJ2菌株幼皿和nheC肠毒素基因的分布进行检测。结果显示,这2个菌株均含有这两种肠毒素基因。     

一株黄原胶降解菌的筛选与鉴定

从土壤中分离出一株能够降解黄原胶的菌株,对这株黄原胶降解菌进行形态特征、生理生化特征及16SrDNA的序列分析,并利用系统发育分析等研究结果,确认该菌株属于芽胞杆菌科的芽胞杆菌属,为进一步开展菌株改良、定点诱变等提高菌株降解黄原胶能力的工作奠定基础．     

环状芽胞杆菌（Bacilluscirculans）的转化和中性蛋白酶基因的表达

用枯草芽胞杆菌质拉载体ｐＮＱ１２２和含有中性蛋白酶基因的重组质粒ｐＭＰＲ８转化环状芽胞杆菌Ｃ－２，转化频率为１．０×１０３转化子／μｇＤＮＡ．含有ｐＭＰＲ８的转化子能在酪蛋白平板上形成清晰的水解圈，其蛋白酶活性与相同质粒转化枯草杆菌ＤＢ１０４所得酶活性相近．Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交结果证实了转化细胞中存在质粒ｐＮＱ１２２和ｐＭＰＲ８，两种质粒在该菌中的稳定性差别很大．