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1.
利用二硫键法制作寡核苷酸DNA Microarray,并将该技术应用到HCV检测中,建立了一种快速、灵敏、安全的寡核苷酸DNA Microarray丙肝病毒检测体系。该体系还可同时对占中国丙肝病毒75%左右的HCV1b亚型进行分型。另外,在丙肝病毒基因组RNA反转录的过程中采用随机引物,从而为进一步的多种肝炎病毒的寡核苷酸DNA Microarray混合检测奠定了基础。  相似文献   
2.
FD-TRT耐热逆转录酶的特性分析   总被引:2,自引:0,他引:2  
从嗜热细菌FD3009中克隆并分离纯化得到的耐热逆转录酶(FD-TRT),逆转录反应在65℃高温下进行,可克服常温逆转录酶的许多缺点,以酵母核糖体rRNA为模板,以与255和18S rRNA匹配的寡聚脱氧核苷酸为引物,探明了FD-TRT的最适反应条件: 25mmol/L Tris-HCl(pH 8.5,25℃),25 mmol/L(NH4)2SO4,2 mmol/L MnCl2,100 μg/ml明胶.5 unit RNasin,250 mmol/L 4种 dNTP, 1μCi3 H-dCTP, 12ug RNA,25 pmol引物,并在此条件下测得 FD-TRT和 Taq DNA 聚合酶逆转录活力与聚合酶活力的相对比值分别为0.056,0.0045.  相似文献   
3.
鸭血烯酸是由鸭血清中提取的不饱和脂肪酸.在体外实验中具有使艾氏腹水癌细胞膨胀失活的作用.用于治疗艾氏癌患鼠,可抑制其腹水癌和实体瘤的生长.与环磷酰胺(CPA)或氟脲嘧啶(SFU)相比,鸭血烯酸的毒性较低,疗效较高,约20%~40%被治愈的患鼠,可长期存活.  相似文献   
4.
利用包含 40 96条各种人类基因的DNA芯片研究了代谢增强剂PMA(phorbolmyristateacetate)激活的人单核巨噬细胞HTP 1的早期应答基因 ,根据已有的旧基因信息 ,实验结果基本反映了人单核巨噬细胞早期应答基因的表达谱 .选取其中一条候选早期应答基因为后续研究对象 ,并进行蛋白质的酵母表达 ,为下游的基因功能研究奠定一定的基础 .  相似文献   
5.
多聚酶链式反应   总被引:5,自引:0,他引:5  
毛裕民 《科学通报》1990,35(2):81-81
1985年以前进行遗传病的产前诊断一般都用羊膜穿刺术采取羊水中的胎儿脱落细胞,抽提它们的DNA,然后用分子杂交等方法进行检测,一次检测需要几天时间,而且胎儿至少四周,操作既复杂又较不安全,1985年美国Cetus公司人类遗传学实验室的科学家发明了一种  相似文献   
6.
α—珠蛋白基因的PCR检测   总被引:2,自引:1,他引:1  
用多对引物的复合PCR技术,分别扩增α-珠蛋白基因族中α1和α2基因片段;参照β-珠蛋白基因PCR扩增产物量,判断α1和α2基因是否正常,是否为缺失的纯合子或杂合子,对α-地中海贫血症先征者家系基因型进行PCR分型诊断。  相似文献   
7.
应用PCR技术检测α—地中海贫血SEA型携带者   总被引:1,自引:0,他引:1  
SEA型α-地中海贫血症在东南亚的地区很普遍,在我国广西壮族自治区,发病率也很高。应用跨SEA型5端和3端缺失断裂点的三引物进行PCR扩增,在有该缺失的染色体上扩增一条194bp的特异条带,在无该缺失的染色体上扩增一条287bp的特异条带,可以清楚地区分SEA型缺失杂合子,纯合子和正常个体。检测40例α-地中海贫血症患者的结果表明:SEA型缺失杂合子28例(70%),SEA缺失的高发区,此法在临床  相似文献   
8.
耐热碱性磷酸酯酶(TAPND27)的表达、纯化和性质测定   总被引:5,自引:0,他引:5  
通过分离纯化和酶学性质测定,确定耐热碱性磷酸酯酶(TAPND27)为八聚体,最适反应温度为65℃,在99℃保温30min仍保留49.4%的活性,在质量分数为5%的Tween20体系中依然有70%以上的酶活性,并且有很宽的pH稳定范围。这表明TAPND27适合在高温条件和高浓度去污剂的体系中应用。  相似文献   
9.
甲硒氨酸多波长反常散射法是国际上90年代发展的蛋白质晶体结构测定的新方法,该法得以实施的首要一步是获得硒取代(硫)的高纯蛋白质。通过亚克隆将编码耐热邻苯二酚2,3双加氧酶(简称TCTD)的基因PHEB克隆至表达载体pRSET,得到了高表达质粒pRSET-PHEB,转入Met缺陷的菌株B834DE3。通过诱导表达和分离纯化得到了甲硒氨酸参入的TCTD。经质谱测定发现TCTD的所有7个甲硫氨酸都被甲硒  相似文献   
10.
脑表达的X连锁基因的克隆、染色体定位和初步功能研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
通过筛选人18周胎脑cDNA文库,得到一条与Bexl和Bex2在高度同源性的基因,经HUGO/GDB人类基因命名委员会的同意命名为BEX1,Northern杂交发现该基因在脑和胰腺中高表达,在心脏,胎盘,肝脏和肾脏中有较低表达,而在脑和骨骼肌中没有表达,用斯坦福大学G3辐射杂交系将BEX1定位于Xq22上的Marker DXS990和DXS 1059之间,以BEX1作为杂交探针小对小鼠的原位杂交中发现BEX1的小鼠同源基因在小鼠的生精小管中有表达,而在间质组织中没有表达,在成年小鼠(出生10周)中BEX1同源基因在生精小管的外周细胞中表达,在中层细胞(包括次级精母细胞和精子细胞)和内层细胞(主要由精子组成)中没有表达,而在6周的处于青春期的小鼠中,BEX1的同源基因在整个生精小管中都有表达,但外层细胞的表达比中层和内层细胞的表达要高得多,而在3周的幼年小鼠中,BEX1的同源基因仅有微量表达,所以BEX1在小鼠中的同源基因在青春期表达上升,生精小管成熟后表达维持在一定的水平,这提示BEX1基因可能参与精子发生及生精小管发育的过程。  相似文献   
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