全文获取类型
收费全文 | 961篇 |
免费 | 52篇 |
国内免费 | 88篇 |
专业分类
系统科学 | 2篇 |
丛书文集 | 26篇 |
教育与普及 | 38篇 |
理论与方法论 | 3篇 |
综合类 | 1032篇 |
出版年
2023年 | 5篇 |
2022年 | 12篇 |
2021年 | 12篇 |
2020年 | 9篇 |
2019年 | 16篇 |
2018年 | 15篇 |
2017年 | 9篇 |
2016年 | 14篇 |
2015年 | 18篇 |
2014年 | 33篇 |
2013年 | 26篇 |
2012年 | 38篇 |
2011年 | 49篇 |
2010年 | 37篇 |
2009年 | 37篇 |
2008年 | 77篇 |
2007年 | 53篇 |
2006年 | 50篇 |
2005年 | 54篇 |
2004年 | 53篇 |
2003年 | 55篇 |
2002年 | 52篇 |
2001年 | 42篇 |
2000年 | 42篇 |
1999年 | 36篇 |
1998年 | 39篇 |
1997年 | 32篇 |
1996年 | 31篇 |
1995年 | 22篇 |
1994年 | 21篇 |
1993年 | 28篇 |
1992年 | 21篇 |
1991年 | 22篇 |
1990年 | 19篇 |
1989年 | 13篇 |
1988年 | 7篇 |
1987年 | 1篇 |
1986年 | 1篇 |
排序方式: 共有1101条查询结果,搜索用时 31 毫秒
31.
【目的】提高朱黄青霉(Penicillium minioluteum )α-葡聚糖酶(Dextranase)基因在毕赤酵母(Pichia pastoris)中的表达水平。【方法】根据毕赤酵母的密码子偏爱对酶基因进行优化与合成。优化后的基因片段与载体 pGAPZαA 连接,转化毕赤酵母 KM71 H。【结果】获得组成型分泌表达α-葡聚糖酶的工程菌 KM71 H/pGAPZαA-dex。发酵工艺试验中,摇瓶培养144 h,酶活为153 U/mL。6.8 L发酵罐补料分批培养92 h,酶活达到1218 U/mL。【结论】该工程菌以甘油作为碳源,发酵调控简单,产酶水平较高,具有适用于大规模生产的潜力。 相似文献
32.
酵母抽提物是一种优良的天然调味料,在食品行业中用途广泛。简述了酵母抽提物的性能特点及呈味增鲜原理,并对其在方便面调味料中部分或完全替代味精的应用做了重点阐述。 相似文献
33.
家蚕(Bombyx mori)的Nvd-Bm蛋白是一种与胆固醇7,8–脱氢酶相关的蛋白.根据NCBI中报道的家蚕中的胆固醇7,8–脱氢酶基因序列(Gen Bank登录号:AB232986.1),采用密码子优化及基因克隆技术,扩增获得胆固醇7,8–脱氢酶目标基因nvd-Bm,并构建了重组穿梭载体p PIC9K-nvd-Bm,通过电转化,成功构建了含有p PIC9K-nvd-Bm的毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115异源真核表达工程菌株.经SDS-PAGE蛋白电泳分析表明,含有p PIC9K-nvd-Bm的毕赤酵母GS115表达菌株能够成功表达目标蛋白,为胆固醇的7,8–脱氢产物即7–脱氢胆固醇的生物转化奠定了基础. 相似文献
34.
由于全球蛋白质缺乏,单细胞蛋白(Single cell protein,SCP)作为一种安全的食品添加剂和饲料,越来越受到人们的重视。尽管SCP大规模生产历史已有近百年,但是对各种优良生产菌株、潜在底物以及最优发酵条件的研究仍然是世界各国研究的热点。基于此,本研究以沼液和香蕉秆压榨汁为研究对象,对能利用其生长的菌株进行筛选,为进一步的单细胞蛋白生产提供参考。实验结果表明:酵母菌、芽孢杆菌都能利用沼液和香蕉秆压榨汁生长,但香蕉秆压榨汁不易保存,因此不宜作为发酵底物;热带假丝酵母Candida tropicalis在沼液中的生长能力强于酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae Y49和毕赤酵母Pichia pastoris GS115;芽孢杆菌在沼液中的生长无规律,且易染杂菌,不适合实际生产应用。因此,沼液作为热带假丝酵母单细胞蛋白生产的培养基,不仅能为单细胞蛋白的生产提供原料,也有利于沼液的妥善处理,实现经济效益和环境效益的双赢。 相似文献
35.
在芽殖酵母中构建CDC10-mCherry和SPC42-mCherry荧光蛋白, 作为酵母细胞周期不同时期的报告系统。根据酵母细胞中芽环(CDC10-mCherry)的产生和消失以及纺锤体极体(SPC42-mCherry)的复制和分离,可以测量细胞周期中 G1期、S期、Early M期和Late M期的时间长度。在此报告系统的基础上, 分别构建S期细胞周期蛋白CLB5-GFP和M 期细胞周期蛋白CLB2-GFP菌株, 实现单细胞观测, 检验报告系统工作的稳定性和准确性。该报告系统可作为研究酵母细胞周期不同时期时间长度等定量生物学问题的背景菌株。 相似文献
36.
37.
采用聚乙烯醇(PVA)为主要载体,添加少量壳聚糖(SA)、SiO2和CaCO3,利用聚乙烯醇-硼酸(PVA-H3BO3)包埋法,包埋苯酚降解菌TX1并制备成胶珠,研究胶珠对含酚废水的降解。通过正交实验、单因素实验和传质性能分析确定并优化包埋条件,结果表明PVA浓度8%、SA浓度0.2%、SiO2浓度2.4%、CaCO3浓度0.4%和饱和H3BO3液pH值6.7时,包埋胶珠机械强度好、结构稳定、无泄漏、固定化效果好。同时发现该条件下的固定化细胞培养12 h后对初始浓度为500 mg/L苯酚废水的降解率为78.1%。 相似文献
38.
产朊假丝酵母细胞和细胞壁对铜离子吸附能力观察 总被引:4,自引:0,他引:4
通过比较产朊假丝酵母细胞与分离纯化的细胞壁对铜离子吸附能力差异,探讨了细胞壁在酵母吸 重金属离子过程中的作用。结果表明,细胞壁吸附的铜郭量通常是细胞吸附量的50%以上。 相似文献
39.
用不连续PAGE对酵母二型性菌体培养过程中可溶性蛋白质进行电泳分析,发现有5条谱带只在菌丝体形态中显出,单细胞形态中未见显出;还有6条在ycelial中蛋白质谱带粗,染色深,在Yeast中蛋白谱带细,染色浅。这些差异带分别出现在(MH4)2SO4沉淀的0% ̄50%或50% ̄75%级分中。 相似文献
40.