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41.
用PCR突变的方法使人白血病抑制因子基因的终止密码子缺失,并与质粒pPICZαA上的myc表位及6个组氨酸处于同一读码框,构建融合表达载体pPICZαA-hLIFM.通过氯化理化学转化法使表达载体整合到毕赤巴斯德酵母X-33的基因组DNA中。转化子经甘油增菌和甲醇诱导,实现了hLIF基因在毕赤酵母表达载体系统中的表达.SDS-PAGE检测和 Western blot分析结果表明在相对分子质量为61 000处有一条人白血病抑制因子特异蛋白带.凝胶薄层扫描分析结果显示表达的目的蛋白占培养液上清总蛋白的 33.3%.且该表达产物具有抑制小鼠畸胎瘤细胞F9克隆形成的活性.  相似文献   
42.
何元政  包雷  刘定干 《科学通报》2000,45(21):2293-2296
酵母三杂交系统是新近发展起来的一个分析RNA结合蛋白的有力工具,然而在利用该系统筛库过程中,常会遇到大量假阳克隆,将克隆颜色鉴定与5-氟乳清酸负性筛选相结合,运用到酵母杂交系统的筛库过程中,极大地提高了筛库的效率和对假阳性克隆的鉴别,并已实现了对重要的RNA结合蛋白的筛选,这一改进将大大方便该系统在分析RNA与蛋白的相互作用中的运用。  相似文献   
43.
系统考察了pET可溶性表达系统对酵母来源的S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的表达情况,结果显示:采用含Nus·Tag融合标签的pET-44a为载体,trx B和gor双突变的Origami为宿主最适合目的蛋白的可溶性表达。进一步考察不同来源的大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌的可溶性时,也得到了相似的结论,比较发现酵母来源的SAM合成酶可溶性表达的比活力最高达60.9 U/mg。  相似文献   
44.
探讨了酵母精在调味汤料中的应用情况及添加用量.研究表明,酵母精应用于多用途营养调味料时,添加量应控制在0.5%~0.75%;应用于牛肉方便面汤料时,添加量控制在1.5%~2.0%,能使调味汤料增香、增鲜,掩饰异味,使风味更加醇厚.  相似文献   
45.
使用拟南芥作为模型,采用筛选出和谷氨酰tRNA合成酶有相互作用的蛋白质的方法研究谷氨酰tRNA合成酶在植物中可能具有的未知功能.首先利用反转录PCR方法获得拟南芥的cDNA,然后通过酵母双杂交系统,用拟南芥的谷氨酰tRNA合成酶作为诱饵对拟南芥cDNA文库进行筛选,并获得多个阳性菌落.对该菌落进行进一步的鉴定得到和谷氨酰tRNA合成酶具有相互作用的蛋白质,这对进一步研究谷氨酰tRNA合成酶及其相互作用蛋白质参与的生命活动奠定基础.  相似文献   
46.
目的探讨硒酵母胶囊与缺血性脑血管疾病的相关性.方法观察脑血管疾病33例用硒酵母胶囊治疗及其相关分析.结果治疗组比对照组的显效率明显增高.结论低硒与心脑血管疾病密切相关,所以应及早补充硒元素,使心脑血管疾病碍到尽快的改善和控制,并得到早期预防.  相似文献   
47.
小曲米酒菌种的保存方法   总被引:1,自引:0,他引:1  
根霉和酵母菌种保藏技术很多,但原理基本一致,即采用低温、干燥、缺氧、缺乏营养、添加保护剂或酸度中和剂等方法,挑选优良纯种。最好是它们的休眠体,使微生物生长在代谢不活泼,生长受抑制的环境中。常用的方法有:蒸馏水悬浮或斜面传代保藏:干燥-载体保藏或冷冻干燥保藏:超低温或在液氮中冷冻保藏等方法。根据小曲米酒的生产情况,斜面传代保藏法用的最多。  相似文献   
48.
干燥技术回收利用甜菜糖废醪液的实验研究   总被引:1,自引:1,他引:0  
以醪液和麸皮、玉米皮的混合物为研究对象,利用吸附流化床干燥技术考察其干燥情况.初步研究了温度、混合比、料层高度及吸附剂颗粒粒度等的变化对干燥速率的影响,确定了吸附流化床干燥技术加工处理醪液的可行有效的干燥工艺参数.实验表明,吸附流化床干燥技术加工处理醪液,采用吸附剂和醪液的加热温度80~90℃,混合比0.8,吸附剂颗粒粒度0.63~0.8mm,床层高度100mm,可获取很好的干燥效果;可以为组织大规模生产提供设计依据和参考,证明了利用醪液的干燥技术加工饲料是一种资源再利用的有效方法.  相似文献   
49.
酵母双杂交系统是一种体内研究蛋白质相互作用的非常有效的分子生物学方法,自建立以来得到了不断的改进与发展,并衍生出单杂交系统、三杂交系统、方向杂交系统等一系列相关技术,在蛋白质组学及药物开发研究中发挥了重要作用。  相似文献   
50.
报道了采用紫外线诱变和化学诱变,以及双诱变方法对甲醇酵母CandidaboidniNo.2201野生株进行诱变筛选,得到10个诱变株.它们分别在1%葡萄糖、1%甲醇、4%甲醇等为碳源的培养基上摇床培养,均比野生株显示出生长优势.其中5株诱变株在5%木糖培养基上的生长优于野生株,为进一步诱变筛选耐高底物浓度,生长速度快,具有高生物量积累特性的诱变株提供了新的出发菌株.  相似文献   
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