火菇素纯化流程的改进

利用前文建立的火菇素免疫单向琼脂扩散定量检测技术 ,对火菇素纯化流程作了定量监测 ,针对一、二、三等金针菇原料的不同特点 ,对纯化技术作了相应改进 ,可分别使火菇素的提取率提高 71 .3% ,1 87.6%和 2 1 7.9% ,1Kg风干子实体的火菇素产量达到 1 0 9.1mg ,52 .3mg和 2 7 0mg .     

火菇素cDNA的初步免疫学筛选

火菇素是一种具有抗癌活性的简单蛋白，从金针菇中分离纯化火菇素的方法如下：金针菇子实体经乙酸液浸提、硫酸铵和乙醇分级沉淀后，通过DEAE-Sephadex A-50除去色素和部分杂蛋白，最后经CM．Sephadex C-50离子交换柱层析分离，得到了电泳均一的纯化蛋白．以火菇素为抗原制备的抗血清为探针对构建的金针菇cDNA表达文库进行免疫印记筛选，对获得的阳性克隆进行PCR、酶切以及在大肠杆菌中诱导表达等初步鉴定，为进一步确证、克隆火菇素基因打下了基础．     

火菇素纯化流程的改进

利用前建立的火菇素免疫单向琼脂扩散定量检测技术，对火菇素纯化流程作了定量监测，针对一、二、三等金针菇原料的不同特点，对纯化技术作了相应改进，可分别使火菇素的提取率提高了７１．３％，１８７．６％和２１７．９％，１Ｋｇ风干子实体的火菇素产量达到１０９．１ｍｇ，５２．３ｍｇ和２７．０ｍｇ。     

菇脚生产蘑菇饮料

在食用菌商品菇加工分级过程中，剔除出来的次菇、菇根及碎屑，可以利用起来生产蘑菇饮料，提高经济效益。l原料处理将罐头、盐渍、干制和鲜销等分级剔出来的菇脚和次菇，经清理后，置0．5％流代硫酸钠溶液中，洗去泥沙、杂质。捞出后再置于0．l％的硫代硫酸钠溶液中浸泡，以达到保护色泽的目的。24小时后取出来，用流动水漂洗，再摊在竹筛上晒干备用。2原料配方干菇脚4209、白糖16Og、奶粉150g、葡萄糖509、柠檬酸469、胭脂红（食用）0．sg、山梨酸Zg、食用香精30滴、净化水10L。3生产工艺（l）将菇脚倒人铝锅内，加净化水3L，煮沸30分钟…     

紫外线诱变侧耳菇担孢子的研究

对侧耳菇 99号担孢子 ,采用不同时间的紫外线照射诱变 ,分离纯化后 ,得到在遗传上相对稳定的突变菌株———侧耳菇 99号V0 2 .该菌株在综合PDA斜面培养基上生长速度快 ,菌体浓密洁白 ,较对照菌株性状优良 .     

绒白乳菇中提取的乳菇菌素-D的免疫抑制作用

研究从绒白乳菇菌中分离出的一种新型倍半萜类化合物-乳菇菌素D的免疫抑制作用及机制。运用体外培养法取BALB/C小鼠脾细胞,研究乳菇菌素D对静止脾细胞、Con A(刀豆蛋白A)和LPS(脂多糖)刺激后的脾细胞(含B淋巴细胞和T淋巴细胞)增殖的抑制作用;运用MTT法经酶标仪检测吸光度,并计算刺激指数(stimulating index,SI);体外培养小鼠脾细胞,运用ELISA检测法观察乳菇菌素D对脾脏中T淋巴细胞分泌IL-2的抑制作用。结果显示该化合物对静止的脾细胞无抑制作用;对Con A和LPS刺激后的脾细胞增殖有显著抑制作用(P0.05),最大浓度药物组刺激指数SI低至0.28;高浓度的乳菇菌素D对Con A刺激的小鼠脾细胞产生的IL-2,具有显著抑制作用(P0.05)。结果显示乳菇菌素D通过抑制抗原刺激后的T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖、抑制其分泌细胞因子,从而发挥免疫抑制作用。研究结果将为开发以乳菇菌素D为母体、经结构修饰、安全低毒的免疫抑制剂提供理论基础。     

白玉菇的研究进展

综述了白玉菇种质资源、生物学特性、营养成分、栽培技术、保鲜技术等方面的研究进展,探讨了白玉菇研究与产业发展前景。白玉菇又名白色蟹昧菇、白色真姬菇、白玉蕈,在日本则称之为“御菇”或“御茸”,其菇体洁白如玉,质地细腻,口感特佳,是一种倍受国内外市场青。     

绒白乳菇中提取的乳菇菌素-D免疫抑制作用的研究

研究从绒白乳菇菌中分离出的一种新型倍半萜类化合物-乳菇菌素D的免疫抑制作用及机制。运用体外培养法取BALB/C小鼠脾细胞,研究乳菇菌素D对静止脾细胞、Con A(刀豆蛋白A)和LPS(脂多糖)刺激后的脾细胞(含B淋巴细胞和T淋巴细胞)增殖的抑制作用;运用MTT法经酶标仪检测吸光度,并计算刺激指数(stimulating index,SI);体外培养小鼠脾细胞,运用ELISA检测法观察乳菇菌素D对脾脏中T淋巴细胞分泌IL-2的抑制作用。结果显示该化合物对静止的脾细胞无抑制作用;对Con A和LPS刺激后的脾细胞增殖有显著抑制作用(P0.05),最大浓度药物组刺激指数SI低至0.28;高浓度的乳菇菌素D对Con A刺激的小鼠脾细胞产生的IL-2,具有显著抑制作用(P0.05)。结果显示乳菇菌素D通过抑制抗原刺激后的T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖、抑制其分泌细胞因子,从而发挥免疫抑制作用。研究结果将为开发以乳菇菌素D为母体、经结构修饰、安全低毒的免疫抑制剂提供理论基础。     

猪肚菇大棚栽培技术

猪肚菇属中温偏高温型菌类,子实体生长发育适宜温度为23~32℃。根据漳州地区的气候条件,栽培的形式以大棚规模化墙式叠排袋栽生产。培养料的处理方式为室外淋水预处理、混合堆制发酵和常压蒸汽灭菌。接种后的栽培袋在24~28℃进行发菌培养,一般经30d左右菌丝可长满袋。为了使猪肚菇子实体原基分化较快形成菇蕾,昼夜需有8℃以上的温差刺激,菇蕾形成后,为了提高菇品质量,菇棚温度最好保持在23~32℃,菇棚内的相对湿度保持在85%~90%,合理通风和光照,有利于子实体生长发育,生物转化率高且稳定的效果。     

北芪菇化学成分的初步研究

采用试管预试法和圆形滤纸层析法对北芪菇的化学成分进行检测,结果表明北芪菇中含有氨基酸、多肽、蛋白质、有机酸、多糖、生物碱、黄酮及其苷类、酚性成分、植物甾醇、三萜成分、挥发油成分.     

鸡新城疫病毒HN蛋白多表位抗原的表达与免疫原性研究

有效抗原及表位的预测和筛选是疫苗研究的基础,在对鸡新城疫病毒HN蛋白抗原表位预测的基础上,对多表位抗原进行表达与免疫原性测定。根据生物信息学表位预测方法获得的家禽新城疫病毒抗原表位,利用PCR技术合成基因,构建pBVIL1-HN重组载体,转化大肠杆菌HB101,进行基因工程表达;经纯化蛋白后免疫小鼠,抗体滴度用酶联免疫吸附方法测定,确定抗原的免疫原活性。结果表明,多表位抗原基因经测序结果正确,融合基因在大肠杆菌得到高效表达,电泳纯融合多表位抗原经三次免疫得到抗血清,抗体滴度为1：8000。鸡新城疫病毒HN蛋白多表位抗原得到高效表达,且具有良好的免疫原性。     

Characterization of murine cytolytic-helper hybrid T cell clones

L3T4, Lyt-2 and the T-cell receptor for antigen are cell-surface molecules involved in antigen specific T cell activation. We have constructed functional murine cytolytic-helper T-cell hybrid clones to study the link between expression of cell-surface molecules and specific cell function. Three of the clones express two antigen receptors and both Lyt-2 and L3T4, normally expressed on mutually exclusive subsets of mature T lymphocytes. The pattern of lymphokines produced by the hybrid cells in response to antigen was not controlled by the specific antigen receptor; both T-cell growth factor, produced only by the helper T-cell partner, and gamma-interferon, produced only by the cytolytic T-cell partner, were secreted when either antigen receptor was stimulated. However, cytolytic activity appeared to be restricted to the recognition of antigen by the T-cell receptor of the cytolytic partner. Thus cytolysis appears to be rightly linked to the antigen receptor of the cytolytic parent but lymphokine release is not tightly linked.     

猪瘟抗体水平的实验室检测技术

利用已知的血凝抗原检测未知的血清抗体，通过将抗原吸附 (致敏 )在红血球表面，再与相应的抗体结合，红血球便出现凝集现象，不仅肉眼可见，直观性强，而且反应的敏感性也大大提高。     

应用噬菌体随机肽库研究抗溶藻弧菌及其外膜蛋白单抗识别的特异性表位

用噬菌体随机七肽库筛选制备的抗溶藻弧菌及其外膜蛋白的纯化单抗，经3轮淘洗，获得较高程度富集的噬菌体，效价较高，第3轮淘洗比第1轮淘洗的产量高出近百倍。同时获得的阳性噬菌体经ELISA检测能与Va抗原发生强的阳性反应，确证了淘洗筛选的结果。     

口服耐受增效剂对抗原诱导性葡萄膜视网膜炎的作用

目的：观察口服牛视网膜S抗原与脂多糖(LPS)对Wistar大鼠抗原诱导性葡萄膜视网膜炎(AIU)的影响。方法：用纯化牛视网膜S抗原和福氏完全佐剂的混合乳剂致敏大鼠，14d后接种S抗原于致敏鼠眼玻璃体腔复制AIU模型。观察致敏前口服S抗原及LPS、单独口服S抗原或牛血清白蛋白(BSA)对AIU眼部表现和迟发型超敏反应(DTH)的影响。结果：与口服BSA组比较，口服S抗原及LPS组在AIU第1、3、5d的临床分级参数显降低，炎症持续时间显缩短，DTH显降低。与单独口服S抗原组比较，口服S抗原及LPS组在AIU的炎症持续时间显缩短，DTH显降低。结论：口服S抗原及LPS明显抑制AIU的炎性反应和DTH，口服LPS可加强S抗原对AIU的免疫抑制作用。     

Expression of human hepatitis C virus core antigen in tobacco plants by tobacco mosaic virus-based vector system

Tobacco mosaic virus (TMV) has the potential to highly express foreign gene. A novel TMV-basedin trans expression system was constructed. A TMV mutant TSHc had its coat protein replaced with hepatitis C virus (HCV) core antigen gene. Anotherr TMV mutant TSBD was replicase-defective. Coinfection of the two mutants could cause systemic infection in tobacco plants byin trans complementation of their functions. TSHc could effectively replicate and assemble to viral particles, which were a little longer than that of wild-type TMV. HCV core antigen was expressed in whole tobacco plants. A similar expression level of HCV core antigen was detected on serial passages, which suggested that this viral expression system be stable.     

RH株弓形虫抗原及高效价多克隆抗体的制备

通过制备和分析弓形虫抗原蛋白，并以此抗原制备高效价的兔抗弓形虫多克隆抗体，为弓形虫的免疫检测和诊断提供有效的方法和途径，同时也为基因工程产物的鉴定提供方便有效的检测手段．速殖子主要来源于感染后72～74h获得的腹水，通过常规方法制备和提纯弓形虫可溶性抗原，采用SDS-AGE方法分析抗原蛋白的分子量．以抗原和福氏佐剂制备成完全和不完全福氏佐剂通过脊柱两旁皮下多点免疫的途径免疫新西兰大白兔，制备兔抗弓形体多克隆抗体，间接ELISA法检测血清中抗体的效价．经过观察所获得的虫体阶段主要处在宿主细胞巨噬细胞内而尚未逸出阶段，通过对结果的分析，所制备的弓形体抗原的分子量主要集中在17～156ku之间，与文献报道有差异，兔抗弓形体抗体效价在60000以上．该研究结果将为弓形体的蛋白质研究，免疫诊断、预防及有效治疗奠定基础．     

吗啡人工抗原的合成及多克隆抗体的制备

利用化学法合成吗啡人工抗原,将此抗原免疫新西兰大白兔制备抗吗啡多克隆抗体.利用混合酸酐法将吗啡人工抗原分别与蛋白质载体BSA及OVA偶联,经蛋白质电泳以及紫外扫描检测,证明吗啡人工抗原合成成功.用间酶联免疫检测法检测,证明制备得到了高效价的吗啡多克隆抗体血清,且与吗啡人工抗原具有高特异性反应,可用于吗啡免疫学检测方法的研究.     

DNA疫苗经基因枪介导的免疫研究

将基因枪介导的DNA疫苗用于小鼠腹部免疫,并用免疫组化法检测gD抗原在接种部位的表达,利用ELISA检测血清中的抗gD抗体,并采用病毒攻击检测DNA疫苗对动物的保护效果。结果表明,基因枪可有效地将DNA质粒运送至小鼠皮肤组织,DNA疫苗携带的抗原保护基因gD2糖蛋白能在真皮和肌肉组织中高效表达。同时,免疫小鼠体内产生高滴度的中和抗体,能有效抵抗HSV2病毒的攻击。     

抗堆型艾美球虫子孢子单克隆抗体杂交瘤细胞的复苏及其活性的初步鉴定

将堆型艾美耳球虫卵囊孢子化、破碎、脱去孢子囊、纯化子孢子并将其超声裂解,最终离心得到子孢子可溶性抗原,经紫外分光光度法测得抗原样品的浓度为1.58mg/mL.将保存的杂交瘤细胞解冻,培养并利用其制备抗体.用制备的抗原对此抗体进行了初步鉴定.