核糖体DNA ITS区应用于虫草属无性型鉴定的初步研究

虫草无性型鉴定是困扰学术界的一个难题．本文检索了互联网上报道的虫草及可能的无性型序列，应用相关软件构建进化树，研究了它们的同源性．从总体上看，核糖体DNA ITS区序列研究与传统经典分类学相互印证进行虫草无性型鉴定是完全可行和必要的．     

一株高产抗菌活性物质链霉菌的初步分类鉴定

对一株土壤中筛选出的可以产抗菌活性物质的链霉菌进行了研究，测定了该菌的抗菌谱，发现该菌株对多种植物病原性真菌及细菌有拮抗作用，但对植物病原性真菌的抑制效果低于植物病原性细菌.通过形态特征、培养特征、生理生化特性及抑菌谱等系列比较，发现该链霉菌菌株与链霉菌属的黑胡桃链霉菌(Streptomyces nogalater)的特征基本相符；通过16S?rDNA序列比对，发现该菌株16S?rDNA与黑胡桃链霉菌的16S?rDNA同源性达99％.根据多项分类原则和系统进化树的构建分析，将该菌株暂归入黑胡桃链霉菌类.     

山东链霉菌产抗真菌物质的理化性质的初步研究

从土壤中筛选得到1株产广谱抗真菌物质山东链霉菌(Streptomyces shandongensissp．nov)，该菌代谢产物对多种植物病原真菌有很强的抗菌作用．研究了温度及pH变化、UV照射对该菌发酵液中抗菌物质的稳定性的影响；并利用pH纸层析等多种层析技术研究了该抗菌物质的水溶性、离子特性等一些理化性质，为这一农用抗生素的进一步纯化和结构测定提供依据．     

火菇素纯化流程的改进

利用前文建立的火菇素免疫单向琼脂扩散定量检测技术 ,对火菇素纯化流程作了定量监测 ,针对一、二、三等金针菇原料的不同特点 ,对纯化技术作了相应改进 ,可分别使火菇素的提取率提高 71 .3% ,1 87.6%和 2 1 7.9% ,1Kg风干子实体的火菇素产量达到 1 0 9.1mg ,52 .3mg和 2 7 0mg .     

平菇黄腐病病原菌分离与鉴定

本实验主要是对平菇黄腐病病原菌进行研究。从感染黄腐病的平菇幼菇子实体中分离得到2种具平板生长优势的革兰氏阴性杆状细菌(编号为G1和G2),通过对平菇子实体回接感染实验,发现细菌G1感染的平菇子实体病灶与自然感染的黄腐病状况一致,因此认为该菌就是导致平菇黄腐病的主要病原菌。经采用传统的生理生化实验与16s rDNA序列分析以及Biolog微生物自动鉴定系统分析鉴定,确定该菌为荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)。     

火菇素抗体探针的制备与高灵敏度的火菇素定性技术的建立

从金针菇子实体浸提液中提取了抗癌活性物质火菇素 ,将纯化的火菇素用Freund佐剂乳化后注射到新西兰白兔体内 ,经数次加强免疫后采血并分离了抗血清 ,应用免疫学方法检测与硝酸纤维素滤膜上抗原蛋白相结合的抗体探针 ,检测极限可达 2 0 - 4 0pg的抗原信号     

芽孢杆菌L-32发酵条件优化及提高原油采收率实验研究

经筛选得到了一株能以原油为碳源进行生长繁殖的菌株 ,初步鉴定为芽孢杆菌 (L 32 ) ,对其发酵条件进行了优化 ,确定出最佳的发酵条件 ,并确定了厌氧条件下以原油为碳源时的培养基成分。通过补加葡萄糖使其浓度保持在8g/L的方法可以提高菌体的浓度。实验结果表明 ,L 2 3可以以原油为碳源生长 ,并能在降低原油粘度的同时使原油培养基内水相的pH值下降。L 2 3能提高实验岩心的原油采收率 ,即在关井 96h后 ,L 2 3可使原油采收率提高 9.6 %左右。     

丙酮酸和柠檬酸对鏈霉菌A_(1-7)形成葡萄糖異构酶的影响

放线菌葡萄糖异构酶的研究始于1964年,比细菌葡萄糖异构酶的研究大约晚了十一年,但由于很快获得了葡萄糖异构酶高产量的菌株,且具有一些其他的特性,故一跃而成为开发葡萄糖异构酶的一个重点对象,广泛引起各国有关工作者的注意和兴趣。我国徐子渊、沈善炯首次发现木糖异构酶(即葡萄糖异构酶)的诱导物并不限于其作用底物,D—核糖同样具有诱导作用。国外有人报导过Str.boliliae手Str.achromogenes除木糖外,也能利用山梨醇或甘油产生葡萄糖异构酶。我们在进行放线菌产酶条件试验时,发现某些有机酸能诱导形成葡萄糖异构酶,现初步总结如下。     

大肠杆菌磷酸果糖激酶基因在野生型专性自养嗜酸性氧化硫硫杆菌Tt-Z2中的表达

利用PCR技术扩增E．coli K-12磷酸果糖激酶-1基因(pfkA)，将该基因与广泛寄主的IncQ质粒pJRD215连接构建重组质粒pSDK-1，该质粒可与pfk基因缺陷株E．coli DF1010互补．通过接合转移的方式将其导入专性自养极端嗜酸性氧化硫硫杆菌Tt-Z2中并得到表达．pSDK-1在宿主Tt-Z2中有较好的稳定性，在无选择压力条件下连续传50代仍可保留68％．酶活性测定表明，pSDK-1的pfkA基因在缺陷株E．coli DF1010中表达水平略高于出发菌株E．coli K-12；而在氧化硫硫杆菌中则以较低水平进行表达．葡萄糖可促进含pSDK-1的氧化硫硫杆菌Tt-Z2的生长，而对照菌株的生长则未受明显影响．说明重组菌可部分利用葡萄糖作为碳源而生长．     

虫草中两种核苷类活性成分的毛细管电泳研究

虫草素和腺苷是虫草属药用真菌的主要核苷类活性成分，以往多用薄层扫描和高压液相法进行分离。本文建立了毛细管区带电泳分离测定虫草素和腺苷的分析方法，并测定了四种不同的虫草中虫草素和腺苷的含量及不同提取时间对虫草素和腺苷含量的影响。首次报道了九州虫草中虫草素的存在。采用0.025mol/L的硼砂（pH9.4）作为缓冲液，在电压为20kV和检测波长为258nm的条件下，4种虫草水提液是的虫草素和腺苷获得了基线分离，并具有良好的精密度和重现性。同时发现蒙山九州虫草中虫草素的含量甚高，具有良好的药用前景。