猪脾血红素加氧酶的纯化和某些性质研究

通过DEAE——纤维素层析.羟基磷灰石层析及Sepharose CL-6B层析,从猪脾中获得了纯的血红素加氧酶。纯化的酶在聚丙烯酰胺凝胶电泳及SDS-聚丙烯酰胺电泳中均呈现现单一条带。测得该酶分子量约为30500道尔顿,含272个氨基酸残基。氨基酸组成分析表明该酶中谷氨酸、谷氨酰胺含量丰富,而半胱氨酸和色氨酸含量低。在280nm处具有较低的消光系数(E1%1cm=8.12),而在406nm处具有强烈的光吸收。Triton×-100和EDTA对酶有稳定作用。     

苦荞类胰蛋白酶水解酶的纯化及部分性质研究

采用缓冲液提取、盐析、凝胶过滤及离子交换层析等方法，从苦荞种子中分离纯化出1种类胰蛋白酶水解酶，经十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)测得其分于量为67kD，等电聚焦(IEF)测得等电点为6．3．该酶可以水解胰蛋白酶的底物BApNA，而且其活性不受苦荞胰蛋白酶抑制剂的影响．通过比较，苦荞中的胰蛋白酶水解酶在性质上与报道的甜荞BAPAase极为相似，可能属于同一类蛋白酶．     

甘薯糖蛋白和多糖的分离纯化及其鉴定

经水溶提取、乙醇沉淀、离子交换层析、凝胶过滤层析等步骤,成功从广薯98中分离到两种甘薯糖蛋白组分SPG-1、SPG-3和一种甘薯多糖组分SPPS-2.经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和凝胶过滤层析鉴定,均为单一的甘薯糖蛋白、甘薯多糖组分.     

一种家蝇幼虫热稳定抗菌肽的分离纯化

本文对家蝇三龄幼虫进行了超声处理，以诱导其产生抗菌物质。通过高温处理、酸性处理后，抗菌物质粗提中大量的热不稳定蛋白和酸性蛋白发生沉淀而被去除。将经过上述处理的粗提液经过一步Sephadex G-75凝胶过滤析、两步CM－Sepharose阳离子交换层析后，得到一个单一的具有抗阳性球菌的峰。SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示为一条带，相对分子质量大约为7000，将其命名为H1．H1为一种热稳定的碱性抗菌多肽。     

载脂蛋白AⅠ的分离纯化方法

介绍了载脂蛋白ＡⅠ的一种分离纯化方法，用离心法制备人血清高密度脂蛋白，乙醇／乙醚脱脂，经ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００凝胶层析及ＤＥＡＥ－５２离子交换梯度洗提得纯化的载脂蛋白。ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳证明为单一条带。     

α—淀粉酶的纯化

枯草芽孢杆菌（Bacillus sublilis）BF7658产生的α－淀粉酶，经絮凝、流水 层析和DEAE－－纤维素层分析进行了提纯。提纯的酶活力为132413．8U／g，与业用酶相比，纯度提高19－22倍，为精酶。用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，图谱上只出现单一的区带。     

粘质沙雷氏菌脂肪酶的分离纯化

粘质沙雷氏菌L-42发酵液经离心、丙酮沉淀、离子交换层析以及凝胶过滤等步骤,获得了比活性为1166.61 U/mg 的碱性脂肪酶,提取得率为20%,纯化倍数45.57倍,在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)上均呈现单一蛋白质条带,显示该酶为单体,SDS-PAGE测得酶的相对分子量约为 50 kDa.酶学特性研究结果表明,该酶的最适反应温度为35 ℃,最适pH值为9.0,在50 ℃以下、pH6.0~10.0范围内保持较好的稳定性. Ca2+、Mg2+ K+、Mn2+、Ni+等对酶有激活作用,而Fe2+、Zn2+、Co2+等对酶活有抑制作用.     

发光杆菌荧光素酶的提取

建立荧光素酶的提取方法。方法 饱和硫酸铵分步提取；亲和层析和离子交换层析纯化；聚丙烯酰胺凝胶电泳测分子量。结果 得到分子量为79ku的荧光素酶。结论 建立了稳定、可靠的荧光素酶提取方法。     

猪血超氧化物歧化酶纯化与分析─—一种铜盐沉淀新工艺

本文建立铜盐沉淀、选择热变性、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ—１００层析方法从猪血中提纯超氧化物歧化酶，纯化倍数１８６．５．该酶在聚丙烯酰胺凝胶电泳中呈一蛋白带．纯酶的比活性为９３２５ｕ／ｍｇ—ｐｒ（邻苯三酚—３２５法）．通过ＳＤＳ—ＰＡＧＥ法测出分子量为３００００．该酶对热稳定，纯酶液的最大吸收波长为２６０ｕｍ．     

猪血超氧化物歧化酶纯化与分析─—一种铜盐沉淀新工艺

本文建立铜盐沉淀、选择热变性、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ—１００层析方法从猪血中提纯超氧化物歧化酶，纯化倍数１８６．５．该酶在聚丙烯酰胺凝胶电泳中呈一蛋白带．纯酶的比活性为９３２５ｕ／ｍｇ—ｐｒ（邻苯三酚—３２５法）．通过ＳＤＳ—ＰＡＧＥ法测出分子量为３００００．该酶对热稳定，纯酶液的最大吸收波长为２６０ｕｍ．     

天冬氨酸酶的分离提纯及其变性复性的研究

以E.Coli J-3为原料,经菌体破碎、链霉素处理、热处理、硫铵分级、磷酸钙胶处理、DEAESephadex A-50柱层析、羟基磷灰石柱层析、Ultrogel AcA 34凝胶过滤、HPLC层析九个步骤,得到聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳纯的天冬氨酸酶。并探讨了各种环境因素对变性复性程度的影响。结果表明,不同的变性、复性条件会诱导不同构象的产生。诱导酶的性质与天然酶不同。     

SO2对玉米叶片组织过氧化物同功酶的影响

用动态熏气方法，将室内培养三叶期玉米（丹育六）幼苗进行ＳＯ２熏气，然后用取丙烯酰胺凝胶电泳法，分析熏气后玉米叶片过氧化物同功酶酶带活性和酶谱带数的变化。结果表明，玉米叶片过氧化物同功酶酶带活性，酶谱带数，可见伤害程度在一定接触范围内，与熏气时间和作用浓度成正相关。可以看出，过氧化物同功酶的出现，是ＳＯ２污染的结果，它的呈现程度，可作为植物受ＳＯ２污染的伤害指标。     

人体精子顶体蛋白酶的研究

用硫酸胺盐析、Sephadex G-100柱层析等方法,从人体精子中提纯得到电泳单点纯的顶体蛋白酶。用SDS-聚丙烯酰铵凝胶电泳法测定了人体精子顶体蛋白酶的相对分子质量(约为10470)。用N-末端分析和氨基酸组成分析等方法研究了这种酶的一些化学特征。实验结果表明,人体精子顶体蛋白酶由85个氨基酸残基组成,它是以亮氨酸为N-末端的单一多肽链。     

韭菜凝集素的纯化及部分性质的研究

用葡聚糖凝胶柱层析法从韭菜的叶片组织分离出一种对新鲜兔红细胞有强烈凝集作用的凝集素，ＰＡＧＥ鉴定和高碘酸－Ｓｃｈｉｆｆ试剂反应均显单一条带。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明该凝集素含有３个亚基，其相对分子质量分别约为３１０００、２４０００和２１０００。韭菜凝集素具有一定的热稳定性，在酸、碱处理中该凝集素对碱处理较酸处理稳定，氨基酸组成分析表明韭菜凝集素含有１４种氨基酸，其中半胱氨酸含量较高。     

猪血浆巯基蛋白酶抑制剂的分离纯化及性质研究

用(NH_4)_2SO_4分段盐析,DEAE-纤维素离子交换和Papain—Sepharose亲和层析,从猪血浆纯化了一种巯基蛋白酶抑制剂(SUlfhydryl proteinase inhibitor;简称SPI);纯化倍数为54.36倍.经高pH、低PH不连续电泳呈一条区带.含糖量为7.77％;PI为4.80.氨基酸组成分析表明,猪血SPI富含酸性氨基酸、芳香族氨基酸和含硫氨基酸.用SDS-PAGE和SephadexG-100层析,测得分子量为130000d和131000d,由两个分子量略有差别的亚基组成.对木瓜蛋白酶有强烈抑制作用,对胰蛋白酶无作用。α-螺旋结构含量高。     

Isolation and N-terminal amino acid sequence of membrane-bound human HLA-A and HLA-B antigens.

Membrane-bound HLA-A and HLA-B antigens have been extensively purified in good yield. The sequences of the N-terminal 16 amino acids have been determined using about 1 nmol of protein eluted from polyacrylamide gel after electrophoresis in sodium dodecyl sulphate.     

芥篮叶超氧化物歧化酶的分离提纯

本文建立硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-100层析,DEAE 纤维素(DE-52)拄层析方法从芥篮(B.alboglabra Baileg)叶肉中提纯超氧化物歧化酶,纯化倍数45.2,比活力97.3u/mg-pr(肾上腺素测定).南 DEAE-DE52层折获得的 SOD 活性部分,按 Weber与 Osborn 法作 SDS-PAGE,呈现单一斑带,分子量为13,000.此酶对热稳定性不高,70℃保温90min,活力全部丧失.纯酶液的最大吸收波长为204nm,芥篮叶中有四种 SOD同工酶.     

北京鸭红细胞超氧化物歧化酶—分离纯化和性质

采用氯仿—乙醇分级分离,丙酮沉淀以及DE-32纤维素柱层析的方法,从北京鸭红细胞中分离得到纯的铜锌超氧化物歧化酶(Cu·Zn-SOD)。4升鸭血红细胞的SOD制品总活力为375,400u,比活力为13,410u/mg蛋白,回收率为64％。 铜锌超氧化物歧化酶制品呈淡蓝绿色,最大紫外吸收波长为258nm。测得该酶分子量为32,000,亚基分子量为16,000。该酶亚基由150个氨基酸残基组成,不含色氨酸,并测得它的N—末端氨基酸为丙氨酸。     

苦荞胰蛋白酶抑制剂提取方法的研究

分别用磷酸缓冲液、０．２ｍｏｌ／Ｌ硫酸、０．４ｍｏｌ／Ｌ三氯乙酸以及水提法从苦荞种子中提取胰蛋白酶抑制剂,对四种提取方法所得产物的抑制活性及柱层析纯化结果比较表明：以磷酸缓冲溶液为提取介质,经热变性、盐析及ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱层析分离后苦荞胰蛋白酶抑制剂的活性和得率较高,是较为理想的提取方法。