IGF-ⅡP3脱氧核酶活性的实验研究

目的 利用肝癌细胞株SMMC-7721 比较IGF-ⅡP3脱氧核酶的活性.方法 噻唑蓝比色法(MTT)检测4种脱氧核酶在不同浓度、不同作用时间、不同给予方法时的催化活性.结果 DRz1的抑制活性相对较高(P<0.05);脱氧核酶对靶基因随浓度增加抑制率相应提高,呈现一定的浓度依赖性;脱氧核酶24h的抑制率明显高于其他实验组(P<0.05);转染给予法显著优于直接给予法(P<0.05).结论 脱氧核酶对靶基因的抑制率呈浓度、时间依赖性.     

HER-2基因特异性核酶在MDA-MB-453细胞内的瞬时效应

目的确定人表皮生长因子受体-2(HER-2)特异性锤头状核酶(hammerhead ribozyme,RZ)对雌激素受体阴性乳腺癌细胞MDA-MB-453的影响.方法应用RT-PCR、免疫细胞化学检测RZ对MDA-MB-453细胞HER-2表达的影响;MTT法检测RZ对细胞增殖的影响.结果RZ转染入MDA-MB-453细胞中,RT-PCR检测出转染RZ的MDA-MB-453细胞中HER-2 mRNA表达量明显下降;免疫细胞化学方法检测细胞内的HER-2蛋白表达下降;MTT法检测细胞增殖活性明显受抑.结论RZ在MDA-MB-453细胞内有效抑制靶基因HER-2mRNA和蛋白的表达,同时可抑制细胞增殖,有助于进一步研究雌激素受体阴性乳腺癌细胞HER-2信号转导通路.     

磁场对缺氧性心肌损伤大鼠血红细胞SOD活性变化的影响

目的：探讨磁场对缺氧性心肌病大鼠血红细胞SOD活性变化的影响。方法：将大鼠随机分为四组：空白对照组、磁作用对照组、缺氧性心肌损伤组、缺氧性心肌损伤磁场治疗组。采用四氮唑蓝法测定各组大鼠血红细胞SOD活性。结果：大鼠血红细胞SOD活性,心肌损伤磁场治疗组明显高于缺氧性心肌损伤组（P＜0．01）,磁作用对照组高于空白对照组（P＜0．05）。结论：在磁场作用下缺氧性心肌损伤大鼠和健康大鼠血红细胞SOD活性可明显升高,进而表明：磁场对缺氧性心肌损伤大鼠和健康大鼠心肌具有一定的保护作用。     

RT-PCR法检测外周血中AFPmRNA的研究

AFPmRNA是成人肝细胞癌变后AFP基因转录产物.RT-PCR法检测外周血中AFPmRNA对原发性肝癌的早期诊断、鉴别诊断及预测转移均有重要意义.探讨了AFPmRNA的基因特点、RT-PCR检测方法及AFPmRNA的临床检测意义.     

人端粒酶催化亚单位(hTERT)特异性核酶对乳腺癌细胞MCF-7活性的作用及影响

目的 探讨端粒酶特异性核酶对乳腺癌细胞MCF-7端粒酶活性、增殖和凋亡的影响.方法 设计合成RZ基因,构建人端粒酶锤头状核酶真核表达质粒pcDNA3.1( )-hTERT-RZ,测序鉴定.提取MCF-7细胞总RNA,RT-PCR扩增靶基因的cDNA片段,插入载体pMD18-T并测序鉴定.将核酶重组体及hTERT载体体外转录,琼脂糖凝胶电泳检测Rz的切割活性.核酶载体转染乳腺癌细胞MCF-7,RT-PCR法检测核酶重组子转染效率及核酶转染细胞中hTERT mRNA的表达量,TRAP法测定细胞端粒酶活性,MTT法、流式细胞仪测定细胞增殖及凋亡.结果 测序表明peDNA3.1( )-hTERT-Rz和pMD18-T-hTERT构建成功.5%琼脂糖凝胶电泳表明体外转录出Rz和靶基因hTERT,Rz对靶基因hTERT具有切割活性.构建好的核酶真核表达载体转染乳腺癌MCF-7细胞.发现其潜伏期延长,对数生长期减缓,S期细胞比例降低,G1期细胞比例增高(P＜0.01).端粒酶活性检测发现端粒酶活性明显降低.结论 端粒酶催化亚单位特异性核酶对靶基因hTERT在体外和体内均有催化切割活性,该核酶在乳腺癌MCF-7细胞中抑制hTERT的表达和细胞增殖,为核酶应用于恶性肿瘤的基因治疗提供了实验依据和新型工具酶.     

肿瘤标志物联合检测在原发性肝细胞癌早期诊断中的应用

用生物发光免疫分析法、 比色法联合检测确诊的原发性肝细胞癌（53例）、 乙型病毒 性肝炎（80例）、 慢性乙肝合并肝硬化（34例）患者同份血清的肿瘤标志物甲种胎儿蛋白( AFP)和肿瘤特异性生长因子(TSGF)．　结果显示， 原发性肝细胞癌组血清TSGF和AFP与其他 组比较均有显著差异（P<0.01）； 原发性肝癌组中TSGF与AFP联合阳性检出率为96.2 %． 关键词: 生物发光免疫分析技术； 甲种胎儿蛋白； 肿瘤特异性生长因子； 原发性肝细胞癌     

用荧光法研究各种因素对赤豆α-球蛋白构象的影响

研究蛋白质变性,虽然已有五十多年的历史,但至今仍然是一个重要的研究课题。过去,对蛋白质变性的研究,多偏重于动物及微生物的蛋白,对植物蛋白的变性研究不多。用荧光法研究一些变性因素对赤豆α-球蛋白分子构象的影响,讫今未见报道。本文报道了这方面的研究结果。     

茜草抗肿瘤作用及其机制研究

茜草是茜草科植物干燥的根及根茎,分布于全国各地,尤以西南地区种类多、品质佳,茜草性寒、味苦,归心肝经,具有凉血止血、祛风除湿、祛瘀通经、止咳祛痰之功,但茜草因产地不同,所含的化学成分也不同,其药理作用亦不同.文章就茜草的抗肿瘤活性成分、抗肿瘤作用及其机制进行了研究,为开发和利用茜草这一药用资源提供理论依据.     

发光免疫分析法在医学中的应用

自从Berson和Yalow发展放免测定技术以来，超微量物质的示踪分析有了很大突破，然而由于放射标记物和有关废物处理产生很多环境放射污染问题，迫使人们去寻找敏感性高的非放射性标记的免疫分析法。发光免疫分析技术（LIA）就是其中之一。发光现象早己为人们所知，把发光反应与免疫反应结合起来建立发光免疫分析法却是近二十余年的事。这种方法即有发光检测的灵敏、快速性，又有免疫分析的特异性，为免疫分析技术提供了类同放免的新方法。1基本原理化学发光是指化学反应引起反应产物形成激发态，若此产物分子具有发射荧光的能力，则可发出…     

脱氧核酶在基因治疗上的应用

长期以来,DNA一直被认为是一种被动分子,仅仅适合于携带遗传信息.但通过体外筛选技术得到脱氧核酶后,发现DNA作为具有催化活性的核酸,理论上能够对任意序列的 RNA分子进行特异性切割,因此具有潜在的治疗应用价值.