薄层水平电泳法确定基因蛋白分子量

SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳,采用薄层均匀凝胶、连续的磷酸缓冲液系统水平电泳。实验表明,方法简单、经济、重复性好,且对化学试剂要求低,可以用于蛋白质分子量和纯度的初步鉴定。     

SDS聚丙烯酰胺凝胶反相染色法

该文介绍了近年来问世的SDS聚丙烯酰胺凝胶反相(负)染色法,特别着重介绍了最新的一种反相染色改进方法—咪唑—锌盐染色法。咪唑—锌盐染色法兼具下面几方面的优点:操作简便、快速且重复性好,灵敏度高并能检出小分子量肽片段,蛋白质回收率颇为理想,也未对蛋白质发生化学修饰作用。     

鸡蛋蛋白质水解多肽分子量分布的研究

采用超滤法结合凝胶过滤色谱法，测定了鸡蛋蛋白水解产物肽分子量的分布情况，结果表明：鸡蛋蛋白质水解多肽分子量是连续分布的，分子量1000以下占66．57％，分子量1000－2000之间占3．42％，分子量2000－4000之间占6．28％，分子量4000－10000之间占7．73％，分子量10000以上占16．00％。     

猪胸腺激素肽PT_3的研究

本文报导从猪胸腺素注射剂中,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,分离精制得猪胸腺激素活性肽PT_3的方法。该肽PT_3经反复聚丙烯酰胺凝胶园盘电泳,呈单一区带。经测定,此肽主要由酸性和中性氨基酸组成。用Sephadex-G-50测定其分子量的结果。E-玫瑰花环法测定,有活性。     

猪胸腺活性肽A_1和A_2的纯化和性质

本文报道了从猪胸腺免疫调节剂中,利用垂直板型制备聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分离纯化二种猪胸腺活性肽(PTPA_1和PTPA_2)的方法。二种肽在酸性和碱性聚丙烯酰胺凝胶园盘电泳中呈单一区带;在聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦中几乎呈单一区带。PTPA_1的等电点约为4.7;PTPA_2的等电点约为4.6。二种肽皆以酸性和中性氨基酸为主PTPA_1,不含色氨酸、酪氨酸和脯氦酸。依Sephadex G—50测定分子量的结果,估计PTPA_1的分子量约为7,200;PTPA_2的分子量约为8,700。二种肽均能非常显著地升高仔猪胸腺淋巴细胞玫瑰花结百分率(P<0.01)。     

一种测定大豆蛋白质水解度的简易方法

介绍了一种新的测定大豆蛋白质水解度的方法,G-25色谱层析法。该方法利用快速蛋白纯化系统将大豆蛋白水解多肽溶液进行G-25色谱层析,根据蛋白峰和肽峰面积计算蛋白质的水解度,并与甲醛滴定法进行了比较。结果表明,G-25色谱层析法测定的大豆蛋白水解度略低于甲醛滴定法。该方法快速、简便,可以普遍适用于各种蛋白质水解度的测定。     

适合于MALDI-TOF质谱分析蛋白质及亚基的SDS-PAGE技术

介绍适合于MALDI TOF质谱分析蛋白质及亚基的SDS PAGE技术,其主要特点是采用铜染色法在凝胶板上直接显色且采用有机溶剂萃取电泳纯的蛋白质和亚基,并用MALDI TOF质谱技术直接分析它们的分子量.本技术具有简便、快速和损失率小等优点,尤其适合于蛋白质组学、利用数据库分析蛋白质同源性和确定蛋白质种类等结构信息的研究,是一种较为理想的SDS PAGE和MALDI TOF质谱非在线联用分析技术.     

鲨鱼皮胶原蛋白肽的成分分析及对血管紧张素转化酶活力的影响

以鲨鱼皮为原料,采用现代生物化学技术制备胶原蛋白肽水解液,经过喷雾干燥,获得鲨鱼皮胶原蛋白肽干粉.对获得的胶原蛋白肽样品进行成分分析,测定了粗蛋白、粗脂肪、水分、灰分以及K、Na、Ca、Fe、Cu、Zn、Pb等金属元素的含量,应用氨基酸自动分析仪测定样品的氨基酸组成,并用化学分析法测定羟脯氨酸含量为7.08%,应用MALDI-TOF分析胶原蛋白肽分子量的分布,表明我们得到的鲨鱼皮胶原蛋白的水解产物胶原蛋白肽的分子量主要分布在2～3 ku,为水溶性多肽混合物.研究鲨鱼皮胶原蛋白肽对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制效应,表明该样品对ACE有较强的抑制作用,其IC50为4.8 mg/mL.本文还探讨了鲨鱼皮胶原蛋白的吸湿性和保湿性.     

流动注射分析法测定氨基酸和蛋白质扩散系数的研究

提出了用盘曲管道流动注射分析以半峰宽测定扩散系数的理论模型和实验方法，测定了一些小分子化合物和蛋白质样品的扩散系数，每次测定所需时间为１０－３０ｍｉｎ，提出了用该方法扩散系数测定蛋白质分子量的新方案并测定了一些蛋白质样品的分子量。     

鲨鱼皮胶原蛋白肽成分分析

应用植物蛋白酶和动物蛋白酶来处理酶解鲨鱼皮,通过现代生物化学方法分离制备鲨鱼胶原蛋白肽,并对其组成成分进行分析,测定了它们的粗蛋白、粗脂肪、灰分、氨基酸及Cu、Zn、Fe、Ca 、Na、K、Pb等金属元素的含量.应用MALDI-TOF分析两种胶原蛋白肽分子量的分布范围.结果表明,植物蛋白酶酶解方法研制的胶原蛋白肽分子量分布范围在2～3 ku区间,而用动物蛋白酶酶解方法研制的胶原蛋白肽分子量分布范围在2～7 ku区间.     

大连湾牡蛎蛋白的分离提取及分子量测定

以大连湾牡蛎为实验材料．首先采用冰醋酸粗提法提取牡蛎蛋白,然后用葡聚糖凝胶(Sephadex-G100)进行柱层析分离,SDS—聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离蛋白,Kodak凝胶成像分析仪分析及测定分子量．结果显示大连湾牡蛎中含有分子量为55kd的牡蛎特征蛋门,同时分离出其它4种蛋白质,分子量介于33．0～63.4kd之间．     

鲨鱼皮胶原蛋白肽成分分析

应用植物蛋白酶和动物蛋白酶来处理酶解鲨鱼皮，通过现代生物化学方法分离制备鲨鱼胶原蛋白肽，并对其组成成分进行分析，测定了它们的粗蛋白、粗脂肪、灰分、氨基酸及Cu、Zn、Fe、Ca、Na、K、Pb等金属元素的含量．应用MALDI-TOF分析两种胶原蛋白肽分子量的分布范围．结果表明，植物蛋白酶酶解方法研制的胶原蛋白肽分子量分布范围在2～3ku区间，而用动物蛋白酶酶解方法研制的胶原蛋白肽分子量分布范围在2～7ku区间．     

福建老酒中血管紧张素转换酶抑制物质的分离鉴定

福建老酒的样品经在ＴｏｙｏｐｅａｒｌＨＷ４０５凝胶过滤色谱柱分离成包括蛋白质、肽、乙醇和糖类等５个主要组分，其中含肽类物质的第二组分显示出较强的ＡＣＥ抑制活性，该组分经ＳｕｐｅｒｄｅｘＰｅｐｔｉｄｅＨＲ１０／３０进一步分离纯化，获得３个组分．其中的第二及第三组分具有ＡＣＥ抑制活性，其ＩＣ（５０）分别为２．８及８．１μｇＰｒｏｔｅｉｎ／ｍＬ，而分子量则为１１００和４５０．     

可编程序计算器在高分子科学和工程中的应用——凝胶渗透色谱数据的处理

凝胶渗透色谱法(GCP)自从六十年代问世以来,由于快速、可靠的特点,已成为测定聚合物分子量分布的基本方法。在实验中得到的凝胶渗透色谱图的横坐标为洗提体积(V_s),纵坐标为洗提液中聚合物的浓度(ω)。     

大鲵蜕皮中小分子肽的鉴定及抗菌活性

为了研究大鲵蜕皮中具有抗菌活性的小分子肽,采用SDS-PAGE电泳和SephadexG-75凝胶层析分离分析大鲵蜕皮中的成分,并采用氯化三苯四氮唑微量稀释法检测了抑菌活性。结果表明:大鲵蜕皮含有一种分子量约为15 000的小分子肽,该物质对5种试验菌种均有一定抑制活性。大鲵蜕皮发现的小分子肽可能是一种新的抑菌肽,其可能为大鲵人工养殖创造出新的产业价值。     

姬松茸子实体中活性肽的分离及其组成的初步研究

采用两次葡聚糖凝胶色谱法从姬松茸子实体提取的肽类物质初步分离获得肽,继而分析了所获得肽的氨基酸和分子量．结果表明,姬松茸子实体的活性肽含有丰富的氨基酸,是一种具有高F值(23．3)的寡肽,且其分子量在1500--30000u之间．     

凝胶渗透色谱法测定合成纤维的分子量分布——涤纶分子量分布的测定

一、前言凝胶渗透色谱(GPC)是一种液相色谱。它是利用高聚物溶液流过填有多孔凝胶的柱时,高聚物在桂内按其分子大小进行分离的方法。由于GPC测定高聚物分子量及分子量分布具有速度快、准确、重复性好、可自动化等优点,所以自1964年Moore发表了第一篇关于GPC的论文以后,该方法得到了迅速的发展。目前,国外GPC已仪器化、自动化。我国也于1976年生产了第一批GPC仪。 GPC用于合成纤维,特别是用于测定滌纶(PET)分子量分布,所见报导还不多。我们采用简易GPC仪测定PET分子量分布。担体为国产青岛海洋化工厂的微球硅     

胆木和裸花紫珠多糖的分子量测定

目的:分离纯化出胆木和裸花紫珠药材中的水溶性多糖成分,并测定其分子量和分子量分布.方法:采用水提醇沉法分离纯化出胆木和裸花紫珠水溶性多糖,采用高效液相凝胶色谱法联合CAD检测器,以葡聚糖作为标准溶液,运用Chromeleon 7 Extension Pack GPC Templates软件作图分析,根据葡聚糖对照品标准曲线和方程测定胆木和裸花紫珠水溶性多糖的分子量和分子量分布.结果:本方法分到的水溶性胆木多糖数均分子量Mn为230 777,重均分子量Mw为261 646,分子量分散系数为1.13,分布带较窄;裸花紫珠水溶性多糖数均分子量Mn为167 885,重均分子量Mw为747 309,分子量分散系数为4.45,分布带较宽.结论:该法测定大分子物质的分子量和分子量分布准确可靠,适用于多种无紫外吸收的大分子物质的分子量测定.     

香菇多糖的提取及结构分析

目的:找到一种操作简单、结果准确的香菇多糖提取及分子量测定的方法。方法:用水煮醇沉法提取香菇多糖,用蒽酮-硫酸法在621nm波长下,测定吸光度值计算糖含量,通过Sephadex-LH20柱,分离得到分子量范围不同的三段组分,GPC测定分子量范围。结果:蒽酮-硫酸法测定得到香菇多糖的糖含量为52.3%,经GPC测定三段组分分子量范围分别为27w、1w、300D。结论:结果表明,水煮醇沉法提取香菇多糖操作简单,柱分离纯化后,GPC测定分子量结果准确。     

油菜双向电泳技术体系的优化

为建立一套可以较好地分离油菜不同器官(花蕾、化药、叶片)的双向电泳技术体系,对IPG胶条的pH范围、凝胶染色的方法以及蛋白质的上样量进行优化.结果表明,以pH=4~7,17cm的IPG胶条进行双向电泳,胶体考马斯亮蓝染色,蛋白质上样量为800μg时,油菜的花蕾、化药以及叶片蛋白质均可得到很好的分离,获得的2-DE凝胶图谱清晰.为检验优化后的双向电泳技术体系与质谱的兼容性,选取10个蛋白质点进行肽质量指纹图谱分析,发现这些蛋白质点经质谱分析后均可得到成功鉴定.表明该分离体系与质谱兼容性较好,蛋白质点鉴定成功率较高.