前胡组织培养和细胞悬浮培养中胚状体发生及植株再生

前胡的种子幼苗切段在含有1mg/l2,4-D的(1/2)MS 固体培养基(大量元素减半)上,诱导产生愈伤组织。诱导两个半月的愈伤组织,在含有1mg/l6-BA+0.5mg/lIBA 或无激素的(1/2)MS 固体培养基上,分化出胚状体,再生成完整植株。愈伤组织在液体培养基中振荡分散及过滤制备成悬浮培养物,在含1mg/l2,4-D的液体培养基中,胚性细胞不断增殖。转移至含有0.05mg/l 2,4-D+0.05mg/l 6-BA 的(1/2)MS 液体培养基中,分化出胚状体,发育成完整植株。     

甘薯品种“白星”体细胞胚的诱导

将甘薯品种“白星”带2个叶原基的茎尖接种于含5μmol/L 2,4-D的修改的MS培养基上能诱导出胚性俞伤组织;胚性愈伤组织在不含生长素类的修改的MS培养基上进一步发育成子叶胚;子叶胚在1/2MS培养基上能发育成试管植株.     

花椰菜外植体成苗的研究

本文报道花椰菜三个栽培品种花梗外植体成苗的几条途径,并讨论了激素对苗分化的效应.其结果如下: 1;花梗外植体培养在含有不同浓度IAA或NAA的MS培养基,可以直接成苗;或者在6-BA培养基上先长芽,然后转移到有IAA或NAA的培养基中生根,发育成新植株. 2;花梗外植体在含有2,4-D的培养基中,首先形成愈伤组织,然后在其表面产生胚状体,胚状体可在无激素的培养基中发育成苗.此外,也可通过愈伤组织再分化成苗,例如先长根,再分化绿芽.     

蛇床愈伤组织的形态发生及植株再生

蛇床幼茎外植体在ＭＳ＋２，４－Ｄ２ｍｇ／ｌ＋ＫＴ０．２ｍｇ／ｌ培养基上形成淡黄绿色松软状愈伤组织。愈伤组织在转入培养基ＭＳ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／ｌ＋２Ｔ０．８ｎｇ／ｌ以后分化出不定芽，在１／２ＭＳ＋ＩＡＡ２ｍｇ／ｌ培养基中可产生不定根，进而发育成为完整植株。愈伤组织在ＭＳ＋２，４－Ｄ０．２ｍｇ／ｌ＋ＺＴＺＴ０．４ｍｇ／ｌ培养基中继代３～４次以后，再转入ＭＳ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／ｌ＋ＺＴ０．８ｍｌ／ｌ培养基中继代１～２次，形成了大量胚状体。胚状体经过球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚最终发育成再生植株。器官发生和体细胞胚胎发生这两种形态发生方式在发生顺序、形态特征和所需激素条件等方面都是不同的。     

冬小麦成熟胚愈伤组织诱导及分化

以4个冬小麦品种的成熟胚为外植体进行离体培养，研究了品种、不同激素组合以及不同预处理等因素对愈伤组织形成及分化的影响．结果表明，代表不同基因型的品种是影响离体培养的重要因素，成熟胚愈伤组织的诱导使用4mg／L的2，4-D浓度较为有利，在MS KT1mg／L 6-BA2mg／L培养基上分化率较高．低温及CaCl2预处理对成熟胚愈伤组织的影响与小麦品种有关．     

仙客来种苗球茎胚性愈伤的诱导及体胚的发生

为了建立仙客来稳定的快繁增殖体系,以仙客来种苗为试材,接种于含不同浓度激素组合的I／2MS培养基上,经过初培养和多次继代培养,诱导产生胚性愈伤,结果表明：球茎是较好的诱导胚性愈伤的材料,1／2MS＋6-BA0．2mg／L＋2,4-D2mg／L＋蔗糖30g／L＋琼脂6．5g／L＋肌醇100mg／L＋酪蛋白100mg／L是较好的诱导配方,将胚性愈伤转接到不含激素的1／2MS基本培养基上,诱导产生大量球形胚和鱼雷胚,2—3周后正常成熟的体胚萌发,表明此研究可以为仙客来的快速繁殖提供技术参考．     

雷蒙特红豆草下胚轴愈伤组织原生质体再生植株

雷蒙特红豆草１０ｄ龄无菌苗的焉胚轴切段在附加２，４－Ｄ和ＫＴ各１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上诱导愈伤组织，取培养３周后形成的愈伤组织进行酶解可获得大量原生质体。原生质体在修改的ＫＭ８Ｐ液体培养基中培养，第１０ｄ开始分裂，２周后形成小细胞团，４周时发育成大细胞团。第７周将小愈伤组织转于含０．５％琼指糖的固体培养基上，它们可以旺盛生长，成为有根、芽分化的胚性愈伤组织，转于分化培养基上发育成苗的小植株。无根苗     

蒲苇愈伤组织的诱导和再生体系的建立

以蒲苇成熟种子为外植体,MS为基本培养基并附加不同激素组合,筛选出诱导蒲苇愈伤组织产生和分化的最佳培养基,成功建立蒲苇的再生体系．试验结果表明：蒲苇种子最佳灭菌方式是将种子灭菌前用无菌水浸泡24h左右,然后用75％酒精消毒20s,再用0．1％（W／V）氯化汞消毒灭菌10min．愈伤组织诱导的最佳培养基为MS＋2,4-D3．0mg/L＋6-BA0．1mg／L;愈伤组织分化的最佳培养基为MS＋6-BA 2．0mg／L＋NAA 0．1mg/L分化继代的最佳培养基为MS＋6-BA 1．5mg／L＋NAA 0．2mg/L;生根最佳培养基配方为1／2MS＋NAA 0．8mg/L＋6-BA 0．2mg／L＋（0．02％）AC．     

杉木合子胚愈伤组织的诱导及植株再生

以杉木成熟及未成熟合子胚为外植体，研究了基本培养基、植物激素、合子胚的发育阶段等因素对杉木愈伤组织的诱导及不定芽分化的影响。结果表明：1／2MS＋2mg／L 2，4-D＋1．0mg／L 6-BA＋1．0mg／L KT＋30g／L蔗糖是成熟合子胚诱导愈伤组织的最佳培养基；处于胚胎选择阶段或者组织与器官分化阶段的幼胚，能诱导出松软、晶莹透明的愈伤组织，诱导频率为2％～6％。成熟阶段的幼胚诱导出的愈伤组织的外观形态与成熟合子胚诱导出的愈伤组织相似，愈伤组织的诱导频率随着合子胚发育的成熟而迅速提高；DCR＋1．5mg／L 6-BA＋1．5mg／L KT＋20g／L蔗糖是诱导不定芽发生的最佳培养基。高约1．5cm的不定芽转入生根培养基，生根率可达100%。     

大理百合的离体快繁研究

以大理百合的鳞片为外植体进行离体培养,获得再生植株,并初步建立起快速繁殖体系．结果表明：大理百合鳞片适宜诱导芽和愈伤组织的培养基MS＋0．5mg／LBA＋0．1～0．5mg／LNAA＋3％蔗糖;增殖培养基为MS＋0．5mg／LBA＋0．05～0．1mg／LNAA＋4．5％蔗糖;生根结鳞茎培养基为1／4MS＋0．01mg／LNAA＋6％蔗糖＋10mg／LCCC．     

激素和添加物对蝴蝶兰组培快繁的影响

以蝴蝶兰人工授粉的果荚种胚和组培苗的叶片、茎尖为外植体,进行组织培养快速繁殖研究.结果表明,果荚种胚是最好的外植体材料,1个果荚可培育出上万个原球茎.种胚诱导原球茎最佳激素组合为:6-BA 0.3mg/L+NAA 0.2 mg/L;原球茎增殖最佳激素组合为:6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;2%蔗糖和10%香蕉泥可以显著促进原球茎增殖;原球茎分化最佳激素组合为:6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;诱导生根IBA 0.5mg/L最佳;炼苗后移栽苗成活率达95%以上.优化后的蝴蝶兰组织培养条件,可为蝴蝶兰快速繁殖工厂化生产提供参考.     

利用离体培养技术打破桂花种子休眠的试验

桂花种子成熟后胚有后熟作用,胚乳中可能含有抑制胚萌发的物质,使用赤霉素和3个月的层积处理也不能促使其萌发。将桂花种子进行3个月层积处理后,进行离体培养,培养基中加入0.5 mol/L BA,1.0 mol/L BA 0.5NAA可以打破种子的休眠,促进萌发。     

利用离体培养技术打破桂花种子休眠的试验

<正>桂花种子成熟后胚有后熟作用,胚乳中可能含有抑制胚萌发的物质,使用赤霉素和3个月的层积处理也不能促使其萌发。将桂花种子进行3个月层积处理后,进行离体培养,培养基中加入0.5 mol/L BA,1.0 mol/L BA+0.5NAA可以打破种子的休眠,促进萌发。     

春剑种子无菌萌发过程的显微观察

【目的】春剑(Cymbidium tortisepalum var. longibracteatum)种子在自然环境下难以萌发,大约只有百万分之一的萌发率。分析春剑种子萌发机制,可为春剑种子的高效萌发和共生萌发提供参考。【方法】通过无菌播种技术对春剑种子进行萌发试验,并用体式显微镜和扫描电镜对各发育阶段春剑种子形态变化进行观察。【结果】Hyponex(花宝1号)3 g/L + 6-BA 0.50 mg/L + NAA 0.50 mg/L培养基上种子萌发效果最佳,种子萌发率为30.33%;从播种到形成幼苗需400 d。观察发现,春剑种子萌发的主要途径为种胚膨大并从种子一侧突破种皮但未从种皮中脱落,种胚突破种皮后经光合作用变绿并分化成原球茎,原球茎伸长生长形成根状茎最后形成幼苗。【结论】添加适宜浓度的6-BA和NAA能有效促进春剑种子的萌发;春剑种子的发育阶段分为:未萌发、种胚吸水膨大、种皮破裂露出种胚、形成原球茎、形成根状茎、形成幼苗6个阶段。     

红豆杉离体胚培养快速育苗研究

采用Ｂ５和ＭＳ相组合的ＢＭ基本培养基和适宜浓度的激素（２,４－Ｄ,６－ＢＡ和ＧＡ３）能解除红豆杉种胚的休眠．单因子试验和不同组合的正交试验结果显示：单独使用２,４－Ｄ０．１ｍｇ／Ｌ,６－ＢＡ２ｍｇ／Ｌ和ＧＡ３２ｍｇ／Ｌ均在一定程度上促使红豆杉种胚的萌发,萌发率分别为７０％,５５％和２８．６％;最佳正交组合为６－ＢＡ１ｍｇ／Ｌ＋２,４－Ｄ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＡＣ４ｇ／Ｌ,萌发率达８１％．     

荷花胚组织培养的初步研究

以荷花胚为试材,研究不同生长调节剂、基本培养基、外植体消毒时间对离体荷花胚萌发的影响.结果表明,诱导胚萌发较理想的培养基为MS+6-BA0.5 mg/L+2,4-D0.2 mg/L+0.1%AC+3%蔗糖;MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L+0.1%AC+3%蔗糖,光照14h.d-1.总结了荷花胚组织培养上存在的问题,并对解决某些问题提出了一些建议.     

普通油茶体胚再生体系研究

为构建农杆菌介导的油茶遗传转化受体系统,选择普通油茶‘长林'4号、53号和166号的幼胚为外植体材料,进行多因素多水平的组织培养试验。结果表明:培养基的pH对愈伤组织诱导率影响不显著,愈伤组织的诱导率受油茶品种影响极显著; ‘长林'53号的幼胚极易实现胚性愈伤组织诱导和完整植株再生,MS培养基是最佳培养基,2,4-D和TDZ为幼胚较敏感的植物激素,对愈伤组织诱导影响最大; 当MS+2 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L TDZ处理时,‘长林'53号体胚诱导率为98%; MS+1 mg/L 2,4-D+2 mg/L KT+500 mg/L CH处理时,‘长林'53号体胚诱导率为89.6%。在不同2,4-D、KT、TDZ和添加物水平的L₉(3⁴)正交试验中,除3个处理外,其他处理组合的‘长林'53号体胚诱导率都达到100%。已分化的胚性愈伤组织在不含任何激素的MS培养基上,可以实现胚状体的萌发、生长及完整植株再生。     

向日葵未成熟胚体细胞胚胎发生的研究

以不同基因型向日葵未成熟胚为材料,从幼胚的大小、蔗糖浓度、碳水化合物(糖类)、激素(2,4-D和6-BA)等方面探讨了向日葵体细胞胚胎发生的影响因素.结果表明:幼胚≤2 mm时,体细胞胚胎发生频率较高(45.5%);体细胞胚胎发生的适宜培养基为MS 0.4 mg/ L 2,4-D 120 g/ L蔗糖.     

羌活种子特性和发芽率研究(一)

为了解决羌活种子自然发芽率低这一问题,采用不同浓度的生长调节剂进行种子浸泡处理,测定其发芽率,同时对野生种子和栽培种子进行比较。结果表明:青海省野生羌活种子的长和宽、胚和胚乳都比栽培种小;种皮透水性良好,对发芽率没有影响;赤霉素对羌活种子发芽率有促进作用,500 mg/L赤霉素可作为羌活种子处理的适宜浓度;细胞分裂素没有促进羌活种子发芽率的作用;混合细胞分裂素对羌活种子发芽率有促进作用,(200+200)mg/L浓度处理的发芽率最高。     

红松成熟胚愈伤组织诱导外植体选择及培养条件优化

【目的】通过培养条件的优化和适宜外植体类型的筛选,解决红松成熟胚愈伤组织诱导中存在的愈伤组织诱导率低、生长状态差、褐化率较高等问题,为建立红松成熟胚体胚发生体系奠定基础。【方法】用5种培养基类型、3种蔗糖浓度和9种植物生长调节剂组合,选择8种来源于成熟种子不同部位的外植体,对愈伤组织诱导的培养条件和适宜外植体类型进行优化和筛选。【结果】① 在5种培养基中,DCR培养基上愈伤组织诱导率高于其他培养基、生长状态好于其他培养基; ② 添加在DCR中的3种蔗糖浓度中,35 g/L时的愈伤组织诱导率最高(92.01%)、褐化率最低(17.01%); ③ DCR添加35 g/L蔗糖情况下,9种植物生长调节剂组合中NAA 2.0 mg/L + 6-BA 1.5 mg/L组合的愈伤组织诱导率最高、褐化率最低、生长状态最佳; ④ 在选出的优化培养条件下,8种来源外植体中,从裸胚上切离的下胚轴的愈伤组织诱导率高、褐化率低,且增殖能力强,具备胚性愈伤组织的形态解剖特征。【结论】红松成熟胚愈伤组织诱导的优化培养条件为DCR +蔗糖35 g/L + NAA 2.0 mg/L+ 6-BA 1.5 mg/L,适宜外植体裸胚上切离的下胚轴。