银(Ⅰ)与血清白蛋白的结合及其后续效应

等离子点pH(5.4)条件下,用平衡透析法和紫外光谱、荧光光谱、共振散射光谱研究了Ag(Ⅰ)与人血清白蛋白(bovine serum albumin,简称BSA)的结合.Scatchard图分析表明,Ag(Ⅰ)在HSA或BSA中有强弱两类结合部位,通过计算机拟合获得结合的逐级稳定常数值.紫外扫描发现Ag(Ⅰ)与HSA或BSA的结合存在滞后效应,表明Ag(Ⅰ)与HSA或BSA的结合可能诱导蛋白质构象发生缓慢变化(A～B),测得并讨论了这一构象变化的速度常数和活化参数.通过Ag(Ⅰ)-HSA和Ag(Ⅰ)-BSA体系的紫外光谱,推测Ag(Ⅰ)与血清白蛋白中的硫结合形成直线型或近似直线型的配合物.利用荧光猝灭法计算出Ag(Ⅰ)-HSA和Ag(Ⅰ)-BSA体系的Stern-Volmer 常数和双分子猝灭速率常数.共振散射光谱结果分析表明Ag(Ⅰ)的结合可使白蛋白分子趋于聚集.     

Zn(Ⅱ)、Mn(Ⅱ)竞争结合人血清蛋白研究

用平衡透析法在生理pH值（7．43）条件下，研究了等摩尔比的Zn（Ⅱ）与Mn（Ⅱ）离子竞争结合人血清白蛋白（HSA）。Scatchard图分析表明，Zn（Ⅱ）与Mn（Ⅱ）在HSA中没有共同的强结合位点，在竞争和非竞争结合时，Zn（Ⅱ）的强结合位点数目均为1，Mn（Ⅱ）的强结合位点数目均为2。Hill图分析说明Zn（Ⅱ）与Mn（Ⅱ）之间具有一定的正协同效应。     

金(Ⅲ)与血清白蛋白的结合及其后续效应研究

在生理pH(7.43±0.02)条件下,用平衡透析法和紫外光谱、荧光光谱研究了金(Ⅲ)与人血清白蛋白(human serum albumin,简称HSA)或牛血清白蛋白(bovine serum albumin,简称BSA)的结合.Scatchard图分析表明,金(Ⅲ)在HSA或BSA中有强弱两类结合部位,通过计算机拟合获得结合的逐级稳定常数值.利用荧光猝灭法计算出金(Ⅲ)-HSA和金(Ⅲ)-BSA体系的Sterm-Volmer常数和双分子猝灭速率常数.紫外扫描发现金(Ⅲ)与HSA或BSA的结合存在可能诱导蛋白质构象发生缓慢变化(A~B),测得并讨论了这一构象变化的速度常数和活化参数.我们认为金(Ⅲ)能与血清白蛋白中的硫、氧、氮等结合形成平面四方型的配合物.     

Ni(Ⅱ)与紫外线照射血清白蛋白的后续效应

用紫外光(253.7 nm)辐照1×10-4m o l.L-1的人血清白蛋白(HSA)和牛血清白蛋白(BSA),时间分别为0、1、2、3、4 h后,用同样浓度的N i(Ⅱ)溶液与辐照后的HSA和BSA作用,随时间扫描测定N i(Ⅱ)溶液与HSA和BSA的紫外可见光谱,发现N i(Ⅱ)溶液与照射过的或未经照射的HSA和BSA作用都具有明显的后续效应,而热力学常数k值随照射时间的延长逐渐降低,△G≠值却逐渐增大,这表明紫外光照射使蛋白质变性,导致N i(Ⅱ)与血清白蛋白的结合减弱,但结合的过程并未发生变化。     

等电点时Cu(Ⅱ)与HAS或BSA结合的研究

用平衡透析法研究了等电点时Cu(Ⅱ)与人血清白蛋白(HAS)或牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.Scatchard图分析表明,HAS和BSA对Cu(Ⅱ)各有1个强结合部位,它可能位于白蛋白分子的N-端三肽段上.为全面反映Cu(Ⅱ)与HAS或BSA的结合情况,用非线性最小二乘法拟合Bjerrum方程,首次报道了等电点时Cu(Ⅱ)-HAS和Cu(Ⅱ)-BSA体系的逐级稳定常数值,其K1的数量级为104.Hill常数分析表明Cu(Ⅱ)与HAS或BSA的结合均产生了一定的正协同效应.     

血清白蛋白与锌(Ⅱ)-精氨酸络合物相互作用的极谱法研究与应用

在pH9．1的乙醇胺-盐酸介质中，血清白蛋白与锌（Ⅱ）-精氨酸络合物反应作用生成一种在滴汞电极上电化学惰性的锌（Ⅱ）-血清白蛋白络合物，使锌（Ⅱ）-精氨酸络合物在-1．20V（vs．SCE）络合吸附波还原峰电流降低，峰电流降低值与2～28mg／L范围内牛血清白蛋白（BSA）或1～29mg／L范围内人血清白蛋白（HSA）呈线性关系；检出限分别为0．2和0．4mg／L．应用该法测定了人血清样品中总蛋白含量．     

溴甲酚紫与血清白蛋白的相互结合反应

应用荧光光谱法研究了水溶液体系中,溴甲酚紫与牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)之间的相互作用.结果表明溴甲酚紫对血清白蛋白的荧光有较强的猝灭作用,其荧光猝灭主要为静态猝灭,从荧光猝灭结果求得不同温度下溴甲酚紫与BSA,HSA的结合常数K,发现随反应温度上升K值下降.由反应焓变、熵变,确定了溴甲酚紫与血清白蛋白的结合主要是静电引力.依据非辐射能量转移机理,测定了不同温度下溴甲酚紫与血清白蛋白相互结合时,其给体-受体间距离和能量转移效率.进一步证实了该反应为单一静态猝灭过程,且阐明了其猝灭机理是通过能量转移产生的.     

金属离子对一种ICT荧光探针与人血清白蛋白作用的影响

采用荧光光谱法研究了Cu2＋对1-酮-2-（对二甲氨基苯亚甲基）-四氢萘（KDTN）与人血清白蛋白（HSA）相互作用的影响.结果表明,Cu2＋的存在对KDTN与HSA的猝灭类型及分子之间作用力没有影响,使KDTN对HSA的猝灭效应增强;荧光猝灭双倒数曲线表明,Cu2＋的存在使KDTN与HSA的结合常数发生明显变化,结合位点仍接近1.     

1-苯基-3-甲基-4-苯甲酰基吡唑酮-5在硝酸稀释剂中对Pb(Ⅱ)萃取的热动力学研究

研究了1-苯基-3-甲基-4-苯甲酰基吡唑酮-5（HPMBP）从硝酸介质中对Pb2＋的萃取,测定了萃取反应抖的反应热△rHm^θ;运用斜率法得出萃合物的组成为Pb（PMBP）2;得到了萃取反应平衡方程式Pb^2＋＋2HPMBP（o）=Pb（PMBP）2＋2H^＋;得出了反应的速率方程ν=K∫[HPMP]（o）[H^＋]^2[Pb^2＋]-Kb[HPMBP]（o）^-1[H^＋]^-2[Pb^2＋]（o）.     

橙皮素同2种血清蛋白相互作用的光谱研究

利用荧光光谱法以及分子对接计算研究了橙皮素同人血清白蛋白(HSA)间的相互作用,并将结果同牛血清白蛋白(BSA)进行对比。实验结果表明,橙皮素均可以通过静态猝灭的方式有效地猝灭这2种蛋白质,且猝灭常数相近,猝灭效率差别很小。橙皮素与HSA结合位点数与BSA相同,但是结合常数小于BSA,并且同步荧光光谱数据显示橙皮素与BSA和HSA的相互作用使得这2种血清蛋白的结构发生了一些变化,从而导致荧光猝灭。分子对接计算表明,橙皮素同BSA及HSA的作用方式相似,都是在疏水及氢键作用驱动下结合在BSA或HSA部分氨基酸残基形成的疏水性口袋中。     

Equilibrium dialysis study on the interaction between Cu(Ⅱ) and HSA or BSA

The interaction of Cu(Ⅱ) and human serum albumin (HSA) or bovine serum albumin (BSA) at physiological pH is studied by equilibrium dialysis. The successive stability constants are obtained by non-linear least square methods fitting Bjerrum formula. For both the Cu(Ⅱ)-HSA and Cu(Ⅱ)-BSA systems, the order of magnitude of K 1 and K 2 was found to be ≈10 4 mol -1·dm 3. There are about twenty stoichiometry binding sites found in one HSA or BSA molecule. They can be divided into two or three sets. Results of equilibrium dialysis experiments suggest that there exists one strong metal binding site in both Cu(Ⅱ)-HSA and Cu(Ⅱ)-BSA. It is the imidazol group nitrogen atoms of His 3 that are primarily concerned with copper binding site. After reaching dialysis equilibrium, there is the interaction among the different binding sites, the values of K all deviate from the simple statistical effect except for K-1 and K-2 in both Cu(Ⅱ)-HSA and Cu(Ⅱ)-BSA systems, and the positive cooperative effect is found.     

Equilibrium dialysis study on the interaction between Cu(II) and HSA or BSA

The interaction of Cu(II) and human serum albumin (HSA) or bovine serum albumin (BSA) at physiological pH is studied by equilibrium dialysis. The successive stability constants are obtained by non-linear least square methods fitting Bjerrum formula. For both the Cu(II)-HSA and Cu(II)-BSA systems, the order of magnitude of K₁ and K₂ was found to be ≈10⁴ mol⁻¹· dm³. There are about twenty stoichiometry binding sites found in one HSA or BSA molecule. They can be divided into two or three sets. Results of equilibrium dialysis experiments suggest that there exists one strong metal binding site in both Cu(II)-HSA and Cu (II)-BSA. It is the imidazol group nitrogen atoms of His³ that are primarily concerned with copper binding site. After reaching dialysis equilibrium, there is the interaction among the different binding sites, the values ofK all deviate from the simple statistical effect except forK ₁ and K₂ in both Cu(II)-HSA and Cu(II)-BSA systems, and the positive cooperative effect is found.     

Pb~(2+)与人血清白蛋白的相互作用

用平衡透析和差示吸收光谱法详细研究了Pb2+与人血清白蛋白(HSA)的相互作用.平衡透析研究结果表明,Pb2+与HSA的相互作用明显受到缓冲溶液pH影响,在pH 6.3和pH 5.4时,Pb2+在HSA上的强结合位点数分别是2.1个和1.1个,弱结合位点数分别为7.0个和2.4个,通过非线性最小二乘法拟合Bjerrum方程,首次报道了Pb2+-HSA体系的逐级稳定常数,Hill系数表明Pb2+与HSA的结合具有负协同效应.使用差示吸收光谱法研究物质的量比为1∶1的Pb2+-HSA体系的电荷转移谱带,发现组氨酸咪唑基是Pb2+在白蛋白中的优先配位基团.进一步根据Zn2+与Pb2+竞争结合HSA上的强结合位点,推断Pb2+在HSA中优先结合位点是位点A.     

Interaction of APT with BSA or HSA

1 Introduction In the past few years, a series of saturated, unsatu- rated fatty hydrocarbon and aryl substituted thiourea compounds have been synthesized and successfully used in analytical chemistry[1―4]. N-n-amyl-N'-(sodium p-aminobenzenesulfonate) thiourea (APT) is one of these newly synthesized reagents. As a kind of drug, thiourea compounds exhibit various biological activi- ties such as antiviral and antifungal[5]. They can be used as insecticides, herbicides and plant-growth regula-…     

Cu~(2+)、Fe~(3+)、Zn~(2+)对香豆素-3-羧酸与牛血清白蛋白相互作用的影响

用荧光光谱法研究Cu~(2+)、Fe~(3+)、Zn~(2+)对香豆素-3-羧酸与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的影响.结果表明:三种金属离子均能增强香豆素-3-羧酸对BSA的荧光猝灭及两者的结合作用,使体系的荧光猝灭常数、结合常数增大;Zn~(2+)的存在没有改变两者的作用力类型,仍以疏水作用力为主,Cu~(2+)、Fe~(3+)存在下,作用力变为以静电引力为主.表明Cu~(2+)、Fe~(3+)、Zn~(2+)对香豆素-3-羧酸与牛血清白蛋白的作用有重要影响.     

烯唑醇与血清蛋白的立体选择性作用机制

手性药物与血清蛋白的结合通常表现出立体选择性。采用UV-Vis吸收光谱、荧光光谱和分子对接技术研究了R-烯唑醇和S-烯唑醇与人血清蛋白(HSA)/牛血清蛋白(BSA)的结合差异。结果表明:血清蛋白与R-烯唑醇的结合能力强于S-烯唑醇;烯唑醇对血清蛋白的荧光猝灭机制为静态猝灭;R-烯唑醇和S-烯唑醇与HSA相互作用的总能量分别为-26.4 kJ/mol和-23.6 kJ/mol,与BSA的对接能量分别为-27.6 kJ/mol和-23.3 kJ/mol,说明R-烯唑醇与血清蛋白形成的复合物更稳定。研究结果可为后续开展烯唑醇的立体选择性作用机制研究提供依据。     

用荧光猝灭法研究人血清白蛋白与吲哚美辛的结合反应

应用荧光光谱法研究了吲哚美辛与人血清白蛋白(HSA)的相互作用. 发现吲哚美辛对HSA的荧光有较强的猝灭作用. 采用两种计算结合常数K^A的方法， 并对两种计算方法进行比较. 探讨了温度对吲哚美辛与HSA结合反应的影响， 得到了不同温度下的结合常数 K^A 与结合位点数n值. 进一步探讨了一些金属离子对吲哚美辛与HSA结合常数的影响. 根据热力学常数确定了它们之间的主要作用力类型.     

Molecular docking and spectroscopic methods to probe the interaction of acetylgliotoxin and HSA

The interaction between acetylgliotoxin and human serum albumin (HSA) has been studied by spectroscopic method. Acetylgliotoxin quenches the intrinsic fluorescence of HSA in a static quenching procedure. The binding of acetylgliotoxin to HSA causes a slight conformational change of HSA. The binding constants at different temperatures as well as enthalpy change and entropy change, are calculated according to relevant fluorescent data and Van’t Hoff equation. The hydrogen bond is a predominant intermolecular force for stabilizing the complex, which is in conformity with the results of molecular modeling study.     

Cu2+对香豆素与BSA相互作用的影响

采用荧光光谱法研究了Cu^2＋对香豆素类中药有效成分的母核化合物香豆素与牛血清白蛋白（BSA）相互作用的影响．实验结果表明，有Cu^2＋存在时，香豆素对BSA内源荧光的猝灭过程是以静态猝灭为主，香豆素与BSA结合过程的表观结合常数KA数值为lO^4量级，结合位点数n的范围为2．9～3．4，香豆素-BSA的分子间相互作用力类型仍是以疏水作用为主，熵增加是该作用过程的主要热力学驱动因素；与不合Cu＾２＋的相比，香豆素对BSA内源荧光的静态猝灭常数KP、表观结合常数KA都明显增大，但结合位点数和分子间作用力类型没有明显改变，表明Cu＾2＋可能参与了香豆素与BSA的结合过程．     

荧光光谱法研究香豆素-3-羧酸与牛血清白蛋白的相互作用

利用荧光光谱、紫外吸收光谱法研究了香豆素-3-羧酸与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.结果表明:香豆素-3-羧酸对BSA的荧光猝灭为静态猝灭,香豆素-3-羧酸与BSA 1∶1结合形成复合物,结合常数与结合位点分别为3.21×104L·mo L-1,0.974 6(298 K)和2.00×104L·mo L-1,0.949 5(310 K),两者之间的作用力以氢键和范德华力为主.同步荧光光谱表明,香豆素-3-羧酸与色氨酸残基发生了作用,从而使其所处的微环境发生了改变.