葡萄籽原花青素提取物抗氧化作用研究

为研究葡萄籽原花青素提取物（grape procyanidins extract,GPE）抗氧化和对DNA氧化损伤的保护作用,我们采用七种生物化学发光体系,检测了GPE 对O₂^-、OH、H₂O_2、ONOO^-和全血嗜中性白细胞“呼吸爆发”产生的多种活性氧的清除作用,以及对OH引起的DNA氧化损伤的保护作用;采用Fe^2＋诱发脂蛋白多不饱和脂肪酸过氧化比色体系,检测了GPE对脂质过氧化分抑制作用。结果显示,GPE 能有效地清除O₂^-、OH、H₂O_2、ONOO^-和全血嗜中性白细胞“呼吸爆发”产生的多种活性氧而抑制体系 发光,并有效抑制脂质过氧化,半抑制浓度分别约为0.2ug/ml、90ug/ml、0.5ug/ml、10ug/ml、130ug/ml、70ug/ml;25ug/ml的GPE对DNA氧化损伤的抑制率誉为70％。提示GPE 能有效清除多种自由基,保护DNA免受·OH引起的氧化损伤,嗜良好的抗氧化剂。     

鹅毛玉凤花总多糖提取工艺优化及抗氧化活性研究

本研究以药用植物鹅毛玉凤花(Habenaria dentata)的块茎为材料,在单因素试验的基础上,选取提取时间、料液比和提取温度进行响应面试验,优化鹅毛玉凤花总多糖的提取工艺,并通过测定总多糖的DPPH自由基(DPPH·)清除率、羟基自由基(·OH)清除率、超氧阴离子自由基(O₂^-·)清除率和总还原力,探究鹅毛玉凤花的体外抗氧化活性。结果表明,鹅毛玉凤花总多糖的最佳提取条件为提取时间7 h,料液比1∶58.7 (g/mL),提取温度73.49℃,优化验证后的鹅毛玉凤花总多糖得率为9.59%,相对标准偏差(RSD)为0.13%。抗氧化试验结果表明,鹅毛玉凤花总多糖对DPPH·、·OH、O₂^-·的半抑制浓度(IC₅₀)分别为1.385 mg/mL、0.006 mg/mL和0.020 mg/mL,其总还原力是L-抗坏血酸的2.24%,表明鹅毛玉凤花总多糖具有较好的抗氧化能力。     

葡萄籽粗多糖的体内外抗氧化作用

为了研究葡萄籽粗多糖(crude polysaccharides from grape seeds,GSCPs)体外抗氧化作用及对秀丽隐杆线虫的体内抗氧化作用,采用水提醇沉法提取GSCPs,检测GSCPs对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和羟自由基的清除作用及对DNA氧化损伤的抑制作用;建立RAW 264.7巨噬细胞氧化损伤模型,在细胞水平探讨GSCPs的抗氧化能力;同时利用秀丽隐杆线虫研究GSCPs的体内抗氧化功能。体外实验结果表明:GSCPs可有效清除自由基,抑制DNA的氧化损伤,质量浓度为0.4mg/mL的GSCPs对DPPH自由基的清除率达84%,对羟自由基清除率为89%;GSCPs可以下调H₂O₂诱导的RAW 264.7巨噬细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,正向调节细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性,质量浓度为0.2mg/mL的GSCPs处理组可使细胞内SOD活性从H₂O₂处理组的81.1%升至96.3%,GSH-Px活性从H₂O₂处理组的92.1%升至99.6%。此外,GSCPs可延长秀丽隐杆线虫寿命,提高其对抗急性氧化应激的能力,有效清除秀丽隐杆线虫体内的ROS。质量浓度为0.8mg/mL GSCPs处理组秀丽隐杆线虫的平均寿命较对照组延长27.67%,将急性氧化应激的秀丽隐杆线虫平均存活时间延长33.58%,秀丽隐杆线虫体内ROS生成量较对照组可降低56.33%。因此,葡萄籽粗多糖在体内外均表现出良好的抗氧化性,可用于抗氧化功能产品的开发。     

γ-聚谷氨酸锰的制备及其性质研究

 用γ-聚谷氨酸(γ-PGA)作为载体,鏊合金属离子锰,制备成一种新型的自由基清除剂.通过微生物发酵得到γ-PGA,将γ-PGA与MnSO₄按不同物质的量比反应,用ICP测定结合率,并对产物进行结构表征.用SOD试剂盒检测其体外抗氧化活性.结果发现γ-PGA经121℃高压、酸降解后得到分子质量为15000u左右的小分子γ-PGA.当COO^-与Mn²⁺物质的质比为1:2时,结合率可高达91%.经检测γ-PGA-Mn具有缓释能力,其SOD活性为2513.78U/mL.通过本研究得到的聚合物具有良好的抗氧化作用及缓释作用.     

食用菇多糖提取物体外抗氧化性能研究

香菇和鸡腿菇分别经热水浸提,反复醇提、洗涤、真空干燥后得到两种多糖提取物。通过多糖抗食用油脂的氧化作用、利用Fenton反应检测对羟基自由基(.OH)的清除作用、对邻苯三酚自氧化系统产生的超氧阴离子自由基(O2-.)的清除作用以及在模拟胃液条件下清除NO2-的作用,对这两种不同来源的食用真菌多糖的体外抗氧化活性进行了研究。结果表明:两种多糖提取物都具有体外抗氧化性能,香菇多糖提取物的抗活性氧自由基能力和清除NO2-的能力优于鸡腿菇多糖提取物。     

芫荽对生物大分子氧化损伤的保护作用及自由基清除能力

研究芫荽对生物大分子氧化损伤的保护作用及自由基清除能力,采用福林酚法检测芫荽的多酚含量,利用2,2′-偶氮二异丁基脒二盐酸盐(2,2′-azobis-2-methyl-propanimidamide,AAPH)作为体外氧化诱导剂,采用凝胶电泳检测芫荽对DNA和蛋白质的氧化损伤保护,用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)法检测芫荽自由基清除率,用氧化自由基吸收能力(oxygen radical absorbance capacity,ORAC)分析检测芫荽的抗氧化能力值。结果表明,芫荽里的多酚类物质质量分数为4.054μg/mg；芫荽对DNA氧化损伤的最低保护质量浓度为4.0μg/mL,对牛血清蛋白的损伤保护质量浓度为125.0μg/mL；芫荽提取物对DPPH·的IC₅₀值为0.17μg/μL,芫荽提取物的ORAC值为485.3。综上所述,芫荽提取物具有较好的抗氧化活性。     

枸杞多糖体清除自由基活性研究

采用超氧阴离子自由基体系、羟基自由基体系、烷基自由基引发的亚油酸氧化体系、二苯代苦味肼基自由基DPPH体系,对枸杞多糖的抗氧化活性进行了研究,并同Vc进行了比较.结果表明：枸杞多糖对这几种自由基均有不同程度的清除作用,其对超氧阴离子清除作用不明显;清除羟基自由基能力与Vc相当;在较小浓度时,清除烷基自由基和DPPH自由基能力弱于Vc,但在较高浓度与Vc接近.     

白扁豆等4种中药多糖的体外抗氧化活性研究

利用Fenton反应检测石斛、益母草、沙苑子和白扁豆4种中药中的成分——多糖对羟基自由基和邻苯三酚自氧化体系产生的超氧阴离子自由基的清除作用,并对多糖抗氧化活性进行研究.结果表明,石斛、益母草和白扁豆中的多糖对超氧阴离子自由基和羟基自由基有不同程度的清除作用,而沙苑子中的多糖则具有促氧化活性.     

杏鲍菇粗多糖的抗氧化活性研究

对杏鲍菇子实体、菌丝体和发酵液粗多糖清除DPPH自由基、羟自由基的能力、铁离子螯合能力以及还原力进行了比较分析,结果表明:菌丝体、发酵液粗多糖清除DPPH自由基能力较强,清除率EC50值分别为4.15和4.81mg/mL;子实体、菌丝体和发酵液粗多糖清除羟自由基、螯合铁离子的能力较强,羟自由基清除率EC50值分别为1.27、1.31和3.54mg/mL,铁离子螯合能力EC50值分别为3.01、1.53和4.17mg/mL;在一定浓度范围内,多糖浓度增加其清除DPPH自由基、羟自由基的能力以及铁离子螯合能力亦增强,并呈现良好的量效关系.实验浓度范围内,3种粗多糖的还原力均较弱.     

山茱萸多糖提取过程研究

通过单因素实验及正交实验对提取液中多糖含量的各种影响因素进行了研究，确定了山茱萸多糖最佳提取工艺条件：提取温度 80℃，提取时间 2h，料液比1∶16，原材料粒度 300～450μm，提取次数4次，脱蛋白次数 6次。在此条件下提取并用DEAE-cellulose柱层析分离得到白色多糖PFCAⅢ，经IR检测为含有α糖苷键的多糖。     

不同品种山药块茎多糖和黏液质多糖对自由基清除能力的研究

实验以引自不同地区种植的3种山药品种(内蒙古毕克齐长山药B1,江西永丰山药YF2,河南铁棍山药HNTGJ29)为材料,采收后对其进行块茎多糖和黏液质多糖的提取,提取出的多糖用适量的蒸馏水溶解,制成浓度为1.0g.L-1的母液,再将母液稀释成不同的浓度,然后对其自由基的清除能力进行测定.实验结果表明:3种山药块茎多糖和黏液质多糖均具有对自由基的清除能力,但清除能力不同,清除能力与浓度呈现一定的正相关性.当山药块茎多糖和黏液质多糖溶液浓度为1.0g.L-1时,品种HNTGJ29的自由基清除能力最强,YF2其次,B1最弱,品种之间的清除能力差异显著.对于山药块茎多糖和黏液质多糖溶液清除能力的比较:当山药块茎多糖和黏液质多糖溶液浓度为1.0g.L-1时,山药块茎多糖溶液对DPPH.自由基的清除率为48.34%,高于山药块茎黏液质多糖溶液的清除率45.39%,但两者均较VC的清除率低;山药块茎多糖溶液对.OH自由基的清除率为30.82%,高于山药块茎黏液质多糖溶液的清除率27.91%,且与VC的清除能力相当.山药黏液质多糖溶液对O2-.自由基的清除率为29.42%,高于山药块茎多糖溶液的清除率25.88%,并与VC的清除能力相差不大.     

银耳多糖的提取及其清除自由基作用

讨论了采用热水提取、乙醇沉淀、sevag法获得银耳多糖的方法.并在体外化学模拟系统反应中,观察该多糖消除羟自由基、超氧阴离子自由基以及防止油脂质氧化的性能.试验表明:银耳多糖清除羟自由基的作用明显,50%清除量为0.112 mg/m l,对超氧自由基的清除能力随着多糖浓度而升高,50%清除量为0.264 mg/m l,油脂抗氧化性能介于VE和VC之间.     

多种植物提取物对DMPD自由基清除作用的研究

用DMPD法检测了植物来源的天然产物对DMPD˙＋自由基的清除作用. 结果表明,11种单体化合物和沙棘籽油在此反应体系表现出不同的活性. 黄酮类化合物中槲皮素活性最强,100 μmol/L时清除率为55.76%,芦丁和葛根素居中,分别是16.64%、2.25%,芹菜素最弱,此浓度未检测到清除作用;酚类化合物中阿魏酸的活性最强,100 μmol/L时达96.78%;三萜化合物熊果酸较齐墩果酸作用强,1 μmol/L时检测到清除活性达到最高,分别为23.05%和3.05%;混合物沙棘籽油对DMPD˙＋自由基有一定的清除能力,其半清除浓度为12.84 mg/mL. 此结果为这些植物来源化合物发挥抗氧化作用的合理浓度范围及进一步应用提供了一定的依据.     

低共熔溶剂提取黄精多糖工艺优化及抗氧化活性研究

选用不同离子组合的低共熔溶剂提取黄精多糖,筛选确定尿素-氯化胆碱低共熔溶剂提取黄精多糖效果最好,随后在单因素考察的基础上,采用响应面分析法优化尿素-氯化胆碱低共熔溶剂提取黄精多糖的工艺条件,并进行了低共熔溶剂重复利用对多糖提取率和含量的影响研究。通过测定总抗氧化能力、超氧阴离子(O-₂)自由基和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率考察黄精多糖体外抗氧化活性。结果表明:低共熔溶剂提取黄精多糖的优化工艺参数为温度70℃、尿素-氯化胆碱物质的量比1.19、时间42.30min、液料比20.75mL/g,此条件下的多糖提取率为18.55%,较预测值相对误差为2.69%,比传统的热水浸提法增加了139.97%。低共熔溶剂重复利用不仅对黄精多糖提取率没有影响,在重复利用第3次时提取率最高,较新鲜溶剂提高了83.9%;而且黄精多糖含量随重复次数增加呈不断增加后趋于稳定的趋势,重复利用4、5次后多糖含量基本趋于稳定,达到63.48%、64.12%,说明其纯度不断提高。黄精多糖的O-₂自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、总抗氧化能力随质量浓度的增加而增加;在测定的质量浓度范围内,清除O-₂自由基和DPPH自由基的IC₅₀分别为0.524、0.951mg/mL,总抗氧化能力最高为241.2μg/mL。因此,低共熔溶剂法是一种效率高、清洁环保的新型黄精多糖提取方法。     

PVC碳糊修饰电极测定Pb2+

 介绍了一种用PVC碳糊电极测定Pb²⁺的方法.该法在开路电路条件,富集介质为0.1 mol/L KNO₃(pH 11.0),检测底液为0.15 mol/L HNO₃.用微分脉冲阳极溶出伏安法扫描,有一灵敏Pb氧化峰出现,峰电位为-0.496 V(vs.Ag/AgCl),溶出峰电流与Pb²⁺在1.0×10-7～2~2.0×10^-5mol/L浓度范围内成很好的线性关系,线性相关系数为0.9960,检出限为5.0×10^-8mol/L.     

核桃楸皮粗多糖清除自由基研究

我们采用羟基自由基和超氧阴离子分别检测了核桃楸皮粗多糖的体外清除自由基的能力.结果显示,核桃楸皮提取物有较强的清除自由基的能力,IC50分别为1.14688mg/mL,1.26825mg/mL(IC50半数抑制剂的浓度).     

3种药用石斛多糖的抗氧化活性比较研究

比较了铁皮石斛、大苞鞘石斛和金钗石斛3种石斛茎段粗多糖、精多糖（除蛋白多糖）和多糖组分（过层析柱多糖分离组分）对DPPH、OH和O-2 3种自由基的离体抗氧化活性. 结果表明:随着多糖纯度增强和质量浓度的提高，抗氧化效果均显著增强，在12 g/L时，处理效果最佳，铁皮石斛多糖组分（DOPP-I）、大苞鞘石斛多糖组分（DWPP-I）和金钗石斛多糖组分（DNPP-I）对DPPH自由基的清除率均在75%以上，对OH自由基的清除率在 84%以上，且显著优于Vc (Vitamin c)，但3种多糖组分间差异不显著；3种石斛多糖对O-2自由基的清除能力显著低于Vc，但DWPP-I的清除能力显著高于DOPP-I和DNPP-I. 总之，大苞鞘石斛多糖组分DWPP-I的抗氧化能力略优于铁皮石斛和金钗石斛.     

Sm(Ⅲ)-HP配合物与DNA的作用机制

 应用紫外-可见光谱法和荧光光谱法并以中性红(NR)作光谱探针研究了Sm(Ⅲ)HP配合物与DNA的作用机制。研究表明,血卟啉(HP)与Sm(Ⅲ)的配合比n_Sm(Ⅲ)∶n_HP = 1∶ 1,Sm(Ⅲ)HP配合物与DNA的结合比n_Sm(Ⅲ)HP ∶ n_DNA = 1∶ 1,Sm(Ⅲ)HP配合物与DNA的结合常数K^θ_30℃ = 1.67×10⁴  L/mol。该过程为熵所驱动,其Δ _r H_m为4.86×10⁴ J/mol,Δ_r S_m为195.61 J/(mol·K),30 ℃时Δ_r G_m为－1.06×10⁴ J/mol。Scatchard法和探针法研究表明,Sm(Ⅲ)HP与DNA之间的结合方式主要是沟区作用。     

Au@SiO2修饰电极的制备及对Cyt c的直接电化学研究

研究Au@SiO₂复合纳米材料修饰电极的制备方法及其对细胞色素c (Cyt c)的电催化行为.Cyt c在该修饰电极上表现出一对氧化还原峰，且在1.0×10^-7~2.0×10^-5 mol/L浓度范围内，Cyt c峰电流与浓度呈良好的线性关系，检测下限为5.0×10^-8 mol/L (S/N=3).还应用紫外可见光谱考察了Au@SiO₂复合纳米材料的生物兼容性，结果表明，Au@SiO₂材料为Cyt c提供了一个“近水”的微环境，使其在该修饰电极表面不易变性，因而具有良好的生物相容性.     

α-硫辛酸和二氢硫辛酸的抗氧化作用

采用多种化学发光体系和比色体系研究了氧化型硫辛酸——α-硫辛酸（α-lipoic acid, LA）和还原型硫辛酸——二氢硫辛酸（dihydrolipoic acid, DHLA）直接清除活性氧、抗脂质过氧化以及对&;#8226;OH引起的DNA氧化损伤的保护作用.实验发现，LA和DHLA能有效清除相应体系中的活性氧过氧化氢（H₂O₂）、羟自由基（&;#8226;OH）、过氧亚硝基阴离子（ONOO^-）和二苯代苦味肼基自由基（DPPH&;#8226; ），能显著抑制脂质过氧化，并对&;#8226;OH引起的DNA氧化损伤有良好的保护作用，而DHLA还可以有效清除超氧阴离子自由基（O&;#8226;₂^-）.这些结果提示，LA和DHLA都是良好的抗氧化剂，但相比之下DHLA的抗氧化能力要显著强于LA.本研究为LA和DHLA保健和药用价值的进一步开发，提供了自由基生物学方面的依据.