雄性大鼠海马多巴胺受体的增龄性改变

采用放射配基结合分析法初步观察了大量海马多巴胺（Dopamine,简称DA）受体的增龄性变化及腹腔注射使DA受体不可逆失活的EEDQ（N－乙氧羰基－2乙氧基－2双氧喹啉）后,DA受体的恢复情况,结果表明老年大鼠海马DA受体结合力较青年大鼠差异不明显,注射EEDQ后两者DA受体亲和力均明显降低,但恢复时青年大鼠恢复的速度快于老年鼠者,表明老年大鼠海马DA受体比青年大鼠更容易受到伤害,恢复也更困难,这些变化可能与老年期的一些表现及老年病的学习记忆紊乱有一定关系。     

柴胡-白芍对抑郁大鼠海马神经递质的影响

通过观察柴胡-白芍药对治疗抑郁模型大鼠海马中枢神经递质变化及BDNF和Trk B表达的情况,探讨其抗抑郁症的机理.采用HPLC法测定海马组织单胺类神经递质5-HT(5-羟色胺)、NE(去甲肾上腺素)、DA(多巴胺)的质量比.采用免疫组化法检测海马中BDNF(海马脑源性神经元)和Trk B(受体型酪氨酸蛋白激酶)阳性神经元面密度值的变化.结果表明,与模型组比较,柴胡白芍药对高、中剂量组海马单胺类神经递质5-HT,NE和DA质量比均显著增加,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01);上调BDNF和Trk B阳性神经元面密度值(P0.05或P0.01).其作用机制可能是提高大鼠脑内海马组织和皮质组织NE、5-HT、DA质量比及上调BDNF(海马脑源性神经元)和Tr KB(受体型酪氨酸蛋白激酶)的表达.     

眶额叶区多巴胺对胃运动的影响及其机制研究

通过大鼠眶额叶微量注射给药,记录胃内压(Intragastric pressure,IGP),观察胃运动变化的方法,研究了眶额叶多巴胺(dopamine,DA)对胃运动调节的神经机制.结果显示,眶额叶注射DA10μg,胃内压显著升高;眶额叶单独注射DA D1受体阻断剂SCH 2μg(SCH23390,SCH),胃内压降低.眶额叶注射SCH 2μg,能阻断DA升高胃内压的作用;眶额叶注射利陪酮(Risperidon)2μg,可升高胃内压,增强胃运动.但利陪酮却不能阻断DA升高胃内压的作用;切断双侧膈下迷走神经,眶额叶注射DA增加胃内压的作用被消除.以上各组中胃收缩频率均无明显变化.实验结果表明,眶额叶内DA能增大胃内压,增强胃运动,DA对胃内压及胃运动的增强作用主要是通过D1受体介导,经过迷走神经传出.     

慢性应激性抑郁发生中海马糖皮质激素对BDNF的影响

为证明慢性应激性抑郁的发生与应激引起的糖皮质激素(Glucocorticoids,GCs)分泌增加,导致海马脑源性神经营养因子(Brain Derived Neurothrophic Factor,BDNF)表达抑制有关.实验用大鼠通过建立慢性不可预见性温和应激(Chronic Unpredictable Mild Stress,CUMS)抑郁模型,通过海马微量注射皮质酮及糖皮质激素受体拮抗剂米司非酮,然后测量体重,观测行为学表现,并用酶联免疫吸附法检测海马内GCs和BNDF含量.结果显示:CUMS明显诱发大鼠抑郁样行为,海马组织中皮质酮明显升高,BDNF水平明显下降.海马微量注射米司非酮,使CUMS诱发的大鼠抑郁样行为明显改善,且BDNF水平明显升高.正常大鼠海马微量注射皮质酮后,表现出与CUMS组相似的抑郁样行为,且海马组织中BDNF明显下降.以上结果表明,慢性应激引起大鼠海马皮质酮明显升高,使海马BDNF表达明显减少,导致抑郁发生.糖皮质激素Ⅱ型受体(Glucocorticoids Receptor,GR)起着重要作用.     

转化生长因子-β1与硒蛋白P在慢性应激性抑郁发生中的作用及关系

为了研究慢性应激性抑郁发生中海马转化生长因子β1(transforming growth factor beta–1,TGF-β1)和硒蛋白P的作用及其关系,实验通过建立慢性不可预见性温和应激(Chronic Unpredictable Mild Stress,CUMS)动物抑郁模型,同时海马内微量注射TGF-β1以及TGF-β1型受体激酶抑制剂LY-364947,然后测量大鼠体重变化率,并通过糖水消耗以及旷场实验、悬尾实验检测大鼠行为变化,运用Elisa、Western blot分别检测大鼠海马组织内TGF-β1和硒蛋白P的含量变化.结果显示,与正常对照组相比,CUMS组大鼠表现出明显的抑郁样行为,海马组织内TGF-β1含量升高,硒蛋白P表达下降;正常大鼠海马内注射TGF-β1并不导致抑郁样行为,相反,CUMS同时海马内注射TGF-β1能逆转应激导致的抑郁样行为;正常和CUMS大鼠海马注射TGF-β1均能明显抑制硒蛋白P的表达;而应激的同时注射TGF-β1型受体激酶抑制剂LY-364947同样具有抗抑郁效应,此时硒蛋白P表达较CUMS组明显升高.以上结果表明:海马TGF-β1和硒蛋白P参与了应激性抑郁的发生;硒蛋白P对海马可能具有保护作用,TGF-β1通过TGF-β1型受体抑制硒蛋白P表达可能是导致抑郁发生的途径之一,而TGF-β1抗抑郁作用可能是经过TGF-β1型受体以外的其他途径实现.     

中脑腹侧被盖区多巴胺转运蛋白的变化对老年大鼠术后认知功能的影响

目的研究中脑腹侧被盖区(VTA)多巴胺转运蛋白的变化与老年大鼠术后发生认知功能障碍之间的关系。方法将50只大鼠随机分为空白组、假手术组、PND模型组、多巴胺转运蛋白敲低AAV·DAT·RNAi组、多巴胺转运蛋白敲低阴性对照AAV·NC组,每组10只。模型组大鼠进行丙泊酚全麻下脾切除手术; AAV干预大鼠预先经脑立体定位仪显微靶向注射AAV·DAT·RNAi或AAV·NC至VTA核团;假手术组大鼠输注丙泊酚。采用Morris水迷宫及条件恐惧实验判断大鼠认知功能损伤程度;免疫荧光染色观察VTA区及海马CA1区DAT、α-synuclein(α-syn)、β-Amyloid1-42(Aβ1-42)的蛋白定位及表达情况; Western blot法检测海马α-synuclein(α-syn)、β-Amyloid1-42(Aβ1-42)的蛋白含量,比较各组间蛋白含量的差异。结果与空白组比较,PND模型组大鼠行为学表现出明显的认知功能减退;海马CA1区α-syn、Aβ1-42蛋白含量明显升高(P0.05)。与PND模型组相比,AAV·DAT·RNAi组大鼠行为学显示认知功能减退改善; AAV·DAT·RNAi组VTA区多巴胺转运蛋白含量明显降低;海马CA1区α-syn、Aβ1-42蛋白含量明显降低(P0.05)。结论 VTA区多巴胺转运蛋白参与了老年大鼠认知功能障碍,并且VTA区DAT变化对老年大鼠术后认知功能的影响可能与调控海马区α-syn、Aβ1-42蛋白聚集有关。     

半夏泻心汤对衰老大鼠学习记忆能力的改善及分子机制

目的以D-半乳糖致衰老大鼠为动物模型,研究半夏泻心汤(BXT)对衰老大鼠学习记忆能力的改善及大脑海马区Ach、NE、DA、5-HT受体mRNA表达的影响,探究BXT对改善大鼠学习记忆能力的相关作用机制。方法结合Y型水迷宫测试的大鼠逃避潜伏时间,通过注射D-半乳糖建立老龄大鼠模型;随后将动物分为老龄对照组、石杉碱甲组、壮年对照组、BXT低剂量组、BXT中剂量组、BXT高剂量组,按组别不同进行灌胃给药。连续给药6周后,再次通过Y型水迷宫测试大鼠学习记忆能力改善情况,检测Ach、NE、DA、5-TH受体mRNA及抗体的表达,观察海马区病理学变化,由此探究BXT对衰老大鼠学习记忆能力改善的分子机制。结果与老龄对照组比较,在训练后24 h、48 h和96 h,各剂量BXT给药组均能明显缩短老龄大鼠逃避潜伏期。大鼠海马区组织HE染色显示,与老龄对照组相比,BXT高剂量组海马神经元损伤有所改善,但BXT中剂量组和低剂量组未见明显改善;免疫组化结果显示BXT高剂量组与老龄对照组相比,其椎体细胞染色数量多,排列紧密度好,细胞颜色较深。结论本研究发现BXT能改善老龄大鼠学习记忆能力,尤其是高剂量BXT改善效果最为明显,可能与增加老龄模型大鼠海马CHRM1、DRD2、HTR1a、ADRA2a mRNA的表达有关。     

整肤疗法对运动性疲劳大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响

[目的]观察整肤疗法对运动性疲劳大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响,以探索整肤疗法对中枢神经系统的作用机制.[方法]将40只SD雄性大鼠随即分成安静对照组、运动后即刻处死组、运动后自然恢复组及运动后整肤治疗组.除安静组外,其余组游泳运动至疲劳,即刻组立即处死取下丘脑,自然恢复组休息30min,整肤疗法组施以整肤治疗(提拉皮肤刺激)30min,两组均断头处死取出下丘脑,采用高效液相色谱一电化学检测法检测各组大鼠下丘脑中5-羟色胺(5-HT)和多巴胺(DA)水平.[结果]大鼠运动性疲劳后,下丘脑中的5-HT水平明显升高,DA水平则较明显降低;经过整肤治疗后,5-HT和DA水平虽然变化不明显,但是5-HT水平比自然恢复组低,DA水平已经比运动后即刻略有回升.[结论]整肤疗法在短时间内对运动性疲劳大鼠下丘脑中5-HT和DA水平的影响不明显,但能看出有促进疲劳恢复的趋势.     

电针穴位对脑缺血-再灌流大鼠海马和大脑皮层AChE活性的影响

目的:探讨电针穴位对脑缺血-再灌流损伤引起的脑海马及大脑皮层内乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的影响.方法:采用夹闭大鼠双侧颈总动脉(CCAO)造成脑缺血-再灌流损伤模型,以改良Ellman法测定AChE.每日电针双侧"百会"、"风池"、"大钟"及"足三里"穴30min、7和14d,疏-密波频率:2～20Hz,强度2 0A.结果:实验后第7d,大鼠海马及大脑皮层内的AChE活性在缺血-再灌流组明显低于假手术组,而其电针组的AChE活性则基本恢复;第14d,缺血-再灌流及其电针组的大脑皮层AChE活性恢复,海马AChE活性有所恢复.结论:脑缺血-再灌流所致的脑损伤可能与脑内AChE的活性有关;电针能提高大鼠海马及大脑皮层内的AChE活性,从而可能对抗脑缺血-再灌流所致的脑损伤作用.     

异丙酚和氯胺酮对大鼠认知及免疫功能影响的研究

目的:研究异丙酚和氯胺酮对大鼠认知及免疫功能的影响.方法:80只7 d大鼠被随机分成4组:对照组、氯胺酮组(A组),异丙酚组(B组)、氯胺酮和异丙酚组(C组).所有实验动物连续注射3次.检测大鼠血清白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平,测定大脑海马神经元凋亡水平.水迷宫测试大鼠认知能力.结果:水迷宫测试显示,注射后第1天,对照组、B组及C组迷宫测试潜伏期逐渐降低;注射后第3 d,与对照组比较,A、B、C组潜伏期及交叉循环时间显著降低.4组大脑海马神经元凋亡率分别为(2.2±0.6)%,(15.1±7.3)%,(4.3±1.1)%,(10.6±2.4)%.麻醉后A、B、C组血清IL-4和IL-10水平均明显高于对照组(P0.05).A、B、C组IL-1β水平均明显低于对照组(P0.05).结论:异丙酚能降低氯胺酮对大鼠认知及免疫功能.     

游泳运动对增龄小鼠肾脏细胞凋亡和自由基代谢的影响

为探讨游泳运动和增龄对小鼠肾脏细胞凋亡及一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响.本实验采用8月龄昆明种系健康小鼠为研究对象,随机分为2组：运动组、增龄对照组,另设2月龄青年对照组.运动组的运动方式为游泳,共训练6周.结果显示,增龄小鼠肾组织中SOD活性与青年对照组相比下降,MDA含量升高,肾脏细胞水平凋亡升高,游泳运动可明显升高增龄小鼠肾组织SOD活性,抑制增龄小鼠肾组织细胞凋亡水平.由此认为,增龄可改变小鼠肾脏细胞凋亡及自由基代谢水平,游泳运动可改善小鼠肾脏随增龄而出现的退行性变化.     

葡萄离体培养中胚状体发生的研究Ⅰ.胚状体发生的组织细胞学观察

以葡萄（ＶｉｔｉｓｖｉｎｉｆｅｒａＬ．）的花药和花丝为实验材料，观察了葡萄离体培养中胚状体的发生发育过程．结果表明：（１）葡萄的花药和花丝经诱导都可形成胚性和非胚性两类不同的愈伤组织，与外植体来源无关，胚状体经胚性愈伤组织产生．（２）胚状体多起源于胚性愈伤组织表层或表层以下的单个细胞，这些细胞核大，细胞质浓，染色深，在表层者易于脱落而处于单个离散状态，它们的第一次分裂有均等分裂，也有不等分裂，经２细胞、３细胞、多细胞原胚等阶段发育为成熟的胚状体．（３）葡萄胚状体具有与双子叶植物合子胚相似的发育过程     

三七皂甙Rg1对小鼠记忆获得和记忆保持障碍的影响

研究三七皂甙Rg1对小鼠记忆获得和记忆保持障碍的影响。分别以腹腔注射东莨菪碱(3mg/kg)、亚硝酸钠(120mg/kg)造成小鼠记忆获得和记忆保持障碍,采用避暗法测定小鼠进入暗室的潜伏期,检测小鼠记忆能力。结果显示,模型组小鼠出现显著的记忆获得障碍和记忆保持障碍,与对照组比较有显著性差异(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,三七皂甙Rg1在30、60mg/kg小鼠进入暗室的潜伏期显著增加(P<0.01,P<0.05)。结果表明,三七皂甙能明显改善由东莨菪碱所致小鼠记忆获得和亚硝酸钠造成的记忆保持障碍。     

Toosendanin-induced change of dopamine level detected by microdialysisin vivo at rat striatum

To investigate the effect on central nervous transmission of toosendanin (TSN), a presynaptic blocker, rat striatum was perfusedin vivo with a TSN-containing artificial cerebrospinal fluid (ACSF) and the level of dopamine (DA) as well as related metabolites in the collected dialysates has been determined by a microbore HPLC with electrochemical detection (microbore HPLC-ECD). The results are as follows: ( i ) TSN induced a biphasic change of DA from its basal level;( ii ) the basal contents of two metabolites, 3,4-dihydroxyphenylacetic acid (DOPAC) and homovanillic acid (HVA) increased in turn and stayed at a higher level than basal control for a long period. The basal level of 5-hydroxyindoleacetic acid (5-HIAA), a metabolite of 5-hydroxytryptamine(5-HT), had a change similar to that of HVA; ( iii ) after perfusion with TSN-containing ACSF, high K₊-evoked DA release was inhibited. These results show that TSN does not selectively affect acetylcholine (ACh) release, but probably acts on a common mechanism responsible for transmitter release at different synapses by interfering with the proteins involved in fusian and resulting in diffusion of the vesicular contents into the cytoplasm and blockade of normal exocytosis.     

Channel kinetics determine the time course of NMDA receptor-mediated synaptic currents

Synaptic release of glutamate results in a two component excitatory postsynaptic current (e.p.s.c.) at many vertebrate central synapses. Non-N-methyl-D-aspartate receptors mediate a component that has a rapid onset and decay while the component mediated by N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptors has a slow rise-time and a decay of several hundred milliseconds, 100 times longer than the mean open time of NMDA channels. The slow decay of the NMDA-mediated e.p.s.c. could be due to residual glutamate in the synaptic cleft resulting in repeated binding and activation of NMDA receptors. However, in cultured hippocampal neurons, we find that the NMDA receptor antagonist D-2-amino-5-phosphonopentanoate has no effect on the slow e.p.s.c. when rapidly applied after activation of the synapse, suggesting that rebinding of glutamate does not occur. In addition, a brief pulse of glutamate to an outside-out membrane patch results in openings of NMDA channels that persist for hundreds of milliseconds, indicating that glutamate can remain bound for this period. These results imply that a brief pulse of glutamate in the synaptic cleft is sufficient to account for the slow e.p.s.c.     

ELISA方法检测恒河猴血清中抵抗素

目的用ELISA检测试剂盒,探索一种恒河猴血清抵抗素（Resistin）定量的快速检测方法,初步建立各年龄段恒河猴血清抵抗素的正常参考值。方法选择用于人抵抗素检测的ELISA定量检测试剂盒,对恒河猴血清进行抵抗素的测定;按年龄段将实验猴分组,幼年组、成年组和老年组,每组10只,制备血清,检测抵抗素,并进行统计分析,初步建立各年龄段恒河猴血清抵抗素的正常参考值。结果用ELISA定量检测试剂盒测定恒河猴血清抵抗素数值稳定,幼年组、成年组和老年组的血清抵抗素正常参考值分别为（6 510±1 730）pg/mL、（5 880±1 250）pg/mL和（1 760±920）pg/mL,有随年龄增长而逐步降低的趋势,老年组极显著低于幼年组和成年组（P〈0.01）。结论人抵抗素ELISA检测试剂盒可以作为一种对恒河猴血清抵抗素定量的临时快速的检测方法,且随着年龄的增长其血清抵抗素正常参考值有逐步降低趋势。     

空间辨别性学习记忆活动对大鼠海马齿状回SDF-1免疫阳性细胞的影响

目的:探讨空间辨别性学习记忆活动引致大鼠海马形态学可塑与海马齿状回内基质细胞衍生因子-1(SDF-1)表达的关系。方法:用水迷宫训练SD大鼠建立空间辨别性学习记忆模型,用免疫组化方法和图像分析技术检测大鼠海马齿状回SDF-1免疫阳性细胞的变化。结果:(1)对照组大鼠海马齿状回可见少量SDF-1免疫阳性细胞,阳性细胞胞体呈圆形或椭圆形,胞核较大,胞浆呈棕黄色。阳性细胞主要分布在齿状回颗粒细胞层;游水组大鼠海马齿状回SDF-1免疫阳性细胞的数量和形态与对照组的相比未见差异;模型组大鼠海马齿状回SDF-1免疫阳性细胞数量随着训练时间逐渐增多,细胞形态同对照组,胞浆呈深棕黄色,并有一至多个突起。(2)对照组与游水组7、14、21 d的大鼠海马齿状回SDF-1免疫阳性细胞在形态和数量未见统计学差异(P>0.05);对照组与模型组7、14 d大鼠海马齿状回SDF-1免疫阳性细胞的形态和数量未见统计学差异(P>0.05);模型21 d大鼠齿状回SDF-1免疫阳性细胞的形态和数量与对照组的比有明显统计学差异(P<0.01)。结论:大鼠海马齿状回内SDF-1阳性细胞可能参与空间辨别性学习记忆活动引致的形态学可塑性。     

淀粉基水性异氰酸酯木材胶黏剂老化机理研究

将淀粉基水性异氰酸酯木材胶黏剂用于结构胶合木的胶接并进行加速老化处理，通过Raman、13C-NMR及GPC分析老化过程中发生的化学及物理变化，以揭示该胶黏剂老化机理。结果表明:在胶膜加速老化过程中异氰酸酯基发生了化学反应，有胺生成随后又分解，而与聚异氰酸酯(PMDI)交联的复合变性淀粉的结构未见改变。加速老化后的胶黏剂中聚乙烯醇(PVA)的高分子链被切断，形成低分子溶于水中，而其他成分没有溶出与降解。     

急性有氧运动对成年男性单胺类神经递质代谢物含量变化的影响研究

研究急性有氧运动对成年男性单胺类神经递质代谢物含量变化的影响,在某健身俱乐部中选择20名成年男性作为研究对象,随机将其划分成对照组和运动组。要求运动组受试者利用功率自行车进行10 min中等强度的急性有氧运动,对照组受试者不进行任何运动,其他条件和运动组相同。和对照组相比,运动组受试者尿液中VMA和HVA含量均明显升高,差异具有显著性(P0.05)。运动组DA、Ad和NE水平随着急性有氧运动时间的增加呈上升趋势;而对照组DA水平随时间的增加无显著变化;运动组DA水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。运动组DA、Ad和NE代谢物水平随急性有氧运动时间的增加而逐渐增加,而对照组DA代谢物水平随时间的增加无显著性变化;运动组DA代谢物水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。运动组5-HT水平随着急性有氧运动时间的增加有所增加,对照组5-HT水平趋势也基本保持不变,运动组5-HT水平略高于对照组,但差异无统计学意义(P0.05)。运动组5-HT代谢物水平随急性有氧运动时间的增加有所增加,对照组5-HT代谢物水平随时间的增加无显著性变化,运动组5-HT代谢物水平略高于对照组,但差异无统计学意义(P0.05)。说明急性有氧运动能够增加成年男性CA代谢物含量,对5-HT的代谢没有影响,整体看来急性有氧运动有助于成年男性机体调节。     

番茄红素改善D-半乳糖致衰老大鼠抗氧化功能的研究

用D-半乳糖注射Wistar雄性大鼠5个月,建立衰老模型.对青年对照组、正常老龄对照组、模型组、高/中/低不同剂量番茄红素组血清MDA含量、肝脏匀浆MDA含量和血液SOD、GSH-Px酶活性进行测定及比较.实验结果表明青年对照组和番茄红素组血清MDA含量和肝脏匀浆MDA含量均比模型组有显著降低（P＜0.01）,而血液SOD、GSH-Px酶活性比模型组有显著升高（P＜O.01）.因此摄入适量番茄红素可以有效地增强大鼠机体抗氧化能力,从而延缓D-半乳糖诱发的大鼠衰老.