酶电极法测定肌苷片中肌苷

以固定化核苷磷酸化酶(EC 2.4.2.1)、黄嘌呤氧化酶(EC 1.2.3.2)与过氧化氢电极构成电流型酶电极,研究了肌苷酶电极分析法的各种分析条件及参数,并与紫外分光光度法对比测定了肌苷片中肌苷含量。酶电极法测定结果与紫外法测定结果之间有较好的一致性。采用酶电极法测定肌苷片中肌苷含量专一性高、成本低、分析速度快。     

用固定化酶管流动注射测定谷氨酸

用多孔玻璃珠固定自制的谷氨酸氧化酶（GO）制成GO固定化酶管，并结合流动注射系统测定谷氨酸（Glu)的含量，测定的线性范围在0．2－3．0mol/m3，精密度（c.v.)为0．75％，测定速率每小时60个样品，该酶管使用寿命为40d，在一定的条件下，保存稳定期达120天，当测定的Glu浓度低于3mol/m3时，pH在6．5－7．5，温度在20－30度，磷酸盐浓度在0．05－0．25mol/L范围内变化时，对Glu含量的测定几乎无影响，用醋酸纤维膜修饰的铂电极测定H2O2选择性好，该方法与试剂盒法同时测定不同发酵时间发酵液中Glu的含量，两者结果一致。     

谷氨酸氧化酶粗品的制备,性质及应用

谷氨酸氧化酶发酵液经（ＨＮ４）２ＳＯ４沉淀后用透析法获得酶粗品。利用ＧＯ测定谷氨酸发酵液中谷氨酸的含量与传统的瓦氏法结果一致，相关系数为０．９８６，相关方程为：ｙ－０．９２８ｘ＋０．１２７（其中ｙ，ｘ分别表示氧化酶法与瓦氏法测定的值）。且这种方法比瓦氏法方便、简单、分析成本低、耗时少。利用ＧＯ法测定血清中谷草转氨酶和谷丙转氨酶的含量，与传统的试剂盒法比较，相关系数分别为０．９７８、０．９８４，相关     

谷氨酸酶促反应中光替代谷氨酸氧化酶的研究

在弱碱性（ｐＨ＝１０．６）介质中,紫外光的照射引起谷氨酸的光化学反应,产生Ｈ２Ｏ２和ＮＨ３,与谷氨酸氧化酶存在下的酶促反应等效。以萘斯勒试剂使产物中的ＮＨ３显色并用分光光度法测定,以及以氯化血红素（ｈｅｍｉｎ）作为过氧化物酶的替代物,催化产物中的Ｈ２Ｏ２氧化、偶联对羟基苯乙酸（ＨＰＡ）的荧光反应并进行荧光检测。据此分别建立了间接测定谷氨酸的新方法。     

溶氧对谷氨酸棒杆菌发酵产谷氨酸代谢的影响

分别控制0、5%、30%3种溶氧水平进行谷氨酸分批发酵,考察了3种溶氧水平下谷氨酸棒杆菌发酵的代谢响应。结果表明,随着溶氧降低,发酵液中柠檬酸和α-酮戊二酸的含量降低,三羧酸(TCA)循环还原臂途径中的有机酸含量增加,丙氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸含量也有所增加,在溶氧为0时,乳酸和乙酸大量积累。通过分析不同溶氧水平下的相关酶活和胞内氧化还原状态,发现随着溶氧降低,谷氨酸脱氢酶酶活降低,乳酸脱氢酶酶活升高,胞内氧化还原电势升高,它们的共同作用使氧限制条件下发酵的代谢流流向TCA循环的还原臂途径和乳酸合成途径,导致谷氨酸产量下降。     

谷氨酸酶电极的研制

将产生谷氨酸脱羧酶(GDC)的大肠杆菌菌株(E,Coli.,AS.505),在37℃培养,所得细胞经抽提得到GDC粗品,将它固定于海藻酸钠上,配合CO_2选择性电极,制得谷氨酸酶电极。它具有下列特性:(1)电极对谷氨酸的线性响应浓度范围是1.0×10~(-3)—0.5tmol/L(8.3—6300mg)谷氨酸/L;(2)电极动态响应时间1分钟,即可达约90%响应值,静态响应时间约10分钟;(3)电极连续测定六十次以上仍有响应;(4)除L-赖氨酸及L-谷氨酰胺外,其余氨基酸均不干扰电极对谷氨酸的测定;(5)电极具较高的重演性。     

芜青中谷氨酸脱羧酶（Gad）酶性质的时空差异

该文对芜青中谷氨酸脱羧酶(Gad)粗酶的提取和优化、酶活力最适反应条件、时空分布差异及光照影响等进行对比分析,同时利用超高效液相色谱法技术(UPLC)分析测定反应产物γ-氨基丁酸(Gaba)的含量.实验结果表明,提取Gad粗酶时加入纤维素酶能提高约70%酶活力.在最适条件对比实验中,对芜青芽苗、块根、茎生长点、茎及顶端分生组织分别进行测定,其中芽苗与顶端分生组织中的酶活力较高.光照对萌发中芽苗的Gad酶活力有较大影响,避光条件下酶活力下降约75%.结果表明,芜青芽苗Gad酶活力好且易于获取,转化谷氨酸反应生成γ-氨基丁酸的转化率高.     

茚三酮比色法和旋光度法测定谷氨酸制备焦谷氨酸的转化率（英文）

研究了通过茚三酮比色法和旋光度法测定谷氨酸制备焦谷氨酸的转化率。通过紫外可见分光光度计在568nm,pH6.0状态下检测与茚三酮反应的谷氨酸和焦谷氨酸的含量。研究结果表明,谷氨酸具有较大的吸收峰,但焦谷氨酸吸光度为零。根据谷氨酸的标准曲线方程,可以计算其后反应溶液中的含量进而计算出转化率。基于谷氨酸和焦谷氨酸的旋光度—转化率工作曲线,可直接计算谷氨酸制备焦谷氨酸的转化率。结果表明,与高效液相色谱法相比,茚三酮比色法和旋光度法具有操作简单、快速、灵敏度高和成本低的优点。     

酶电极法测定药用乳酸中L-乳酸含量研究

以固定化L-乳酸氧化酶（1．1．1．27）与H2O2电极构成乳酸酶电极生物传感器,研究了乳酸酶电极分析法的各种分析条件及参数,并与药典标准酸碱滴定法对比测定了药用乳酸样品中L-左旋乳酸及D．L-外消旋乳酸的含量。结果供试药用乳酸样品中L-乳酸含量约占乳酸总量的10％,因此药用乳酸属于不等量立体异构体药物。采用酶电极法测定药用乳酸中的L-乳酸含量具有专一性高、成本低、分析速度快等优点。     

酶电极法检测苹果酸-乳酸发酵过程中乳酸变化

以固定化L-乳酸氧化酶（1．1．1．27）与H2O2电极构成乳酸酶电极生物传感器,研究了乳酸酶电极分析法的各种分析条件及参数,并与药典标准总酸测定法对比测定了葡萄酒苹果酸-乳酸发酵溶液中L-乳酸的含量。结果表明供试溶液中L-乳酸含量约占总酸量的10％～20％。采用酶电极法测定葡萄酒苹果酸-乳酸发酵溶液中的L-乳酸含量具有专一性高、成本低、分析速度快等优点。     

谷氨酸发酵调优操作模型

以谷氨酸发酵的产酸率，转化率及生产能力为优化目标，对谷氨酸工业生产过程中所涉及的工艺条件进行回归，建立了一套好的调优操作模型．计算表明，运用调优操作于谷氨酸发酵具有很大的潜力．     

谷氨酸能神经传递系统研究进展

谷氨酸广布于大脑皮质等处,以(-酮戊二酸、谷氨酰胺或鸟氨酸等为前体进行合成,通过快突触传递或慢突触传递与突触后膜上的三种类型的受体相结合,参与学习记忆、突触可塑性、细胞凋亡、自主运动神经活动及神经毒性作用等生理和病理功能。     

谷氨酸发酵溶氧研究（Ⅰ）

采用带溶氧电极的摇瓶对谷氨酸发酵过程进行研究,结果表明,只有对发酵过程(特别是生产期)的溶氧严加控制,才有可能得到谷氨酸高产。在装液量为30ml,摇床转速为160-180r/min,发酵中期溶氧水平8-10％时,谷氨酸产率6.56％,糖酸转化率55％。当采用pH和溶氧为标准补尿时,所得pH曲线及溶氧曲线不完全一致,但产酸率很接近,说明溶氧曲线至少可以作为补尿及判断发酵终点的依据之一。     

GA-BP网络在谷氨酸菌体浓度软测量中的应用

针对菌体细胞浓度是影响谷氨酸发酵过程重要的生物参数,而其在线实时检测难以实现的状况,采用遗传算法和BP神经网络相结合的方法(GA-BP网络)对其进行软测量。通过对谷氨酸生产工艺过程的分析,找到影响菌体细胞浓度的过程参数,从现场历史数据中选取样本,建立软测量模型。仿真结果表明:新方法可以避免单独使用BP网络陷入局部最小的问题,能加快全局收敛速度,对谷氨酸发酵过程菌体浓度的软测量效果更好。     

磁场-溶剂协同作用对谷氨酸结晶过程的影响

研究了磁场－溶剂协同使用对谷氨酸结晶过程的影响及磁场作用下谷氨酸过饱和溶液表面张力、电导率的变化,并对磁场促进谷氨酸结晶的作用机理进行了探讨,提出了一种利用磁场－溶剂协同作用制备谷氨酸晶种的新方法。研究结果表明,磁场对谷氨酸结晶有促进作用,磁场－溶剂协同使用加速了晶体的成核过程,生成的晶粒均匀,结晶率高。     

谷氨酸发酵过程最佳操作曲线的确定

从理论和实践上确定了综合考虑谷氨酸发酵过程温度、ＰＨ和通风量的最佳操作曲线，提出运用调优操作研究发酵过程最佳操作曲线的新方法。     

发酵液中谷氨酸分离方法的研究

采用谷氨酸发酵液先浓缩后调节等电点以提取谷氨酸。谷氨酸收得率在８５－９０％，比常用的等电点法收得率可提高１０—２０％．     

聚类综合算法对于谷氨酸发酵过程运行状态的识别

谷氨酸发酵过程中产品质量波动比较大,故障和误操作在早期不易被发现,结果易造成原料浪费与设备空转。针对谷氨酸发酵过程的实际生产情况,采取工况划分和工况识别的数据分析方法,获取不同的生产运行状态集合。同时,在完成工况划分后,对划分的故障状态进行识别,进而判断出引起生产故障的原因。通过仿真研究,验证了方法在运行状态识别方面的可行性。     

谷氨酸热分解机理的研究

用热重（TG）、差热分析（DTA）和红外光谱分析（IR）方法测试了谷氨酸的热分解过程,用AMI方法全优化计算了谷氨酸及其热分解中间产物、产物分子的几何构型,得到其总能量,键级等数据．通过对实验结果和计算结果如键级、定域轨道能的分析,提出了谷氨酸的热分解反应机理．     

利用透明颤菌血红蛋白基因在谷氨酸棒杆菌中的表达提高谷氨酸和谷氨酰胺的产量

为了降低谷氨酰胺(glutamine,Gln)生产过程中所需要的高溶氧水平对设备的要求,在谷氨酸棒杆菌C.glutamicum ATCC 14067中表达增强摄氧的透明颤菌血红蛋白基因(Vitreoscilla hemoglobin gene,vgb),以此提高细胞的摄氧能力及能量的供给水平.对得到的重组菌和野生菌进行了发酵实验.在溶氧只有5%的条件下,重组菌比野生菌细胞干重提高了1.2倍,单位细胞谷氨酸的生产能力提高了6.5倍,单位细胞谷氨酰胺的生产能力提高了1.4倍.对比结果显示,含有vgb基因的重组菌比野生菌在细胞生长、谷氨酸和谷氨酰胺合成等方面的能力都有显著提高.